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    貓傳染性鼻氣管炎研究進展

    2013-06-05 15:23:59山東省東阿縣畜牧局252200
    山東畜牧獸醫(yī) 2013年9期
    關(guān)鍵詞:病貓氣管炎皰疹病毒

    黃 明 (山東省東阿縣畜牧局 252200)

    文獻綜述

    貓傳染性鼻氣管炎研究進展

    黃 明 (山東省東阿縣畜牧局 252200)

    貓傳染性鼻氣管炎(Feline infectious Rhinotracheitis)是由貓皰疹病毒1型(feline herpesvirus type 1,F(xiàn)HV-1)引起的一種以上呼吸道感染為主要癥狀的急性、高度接觸性傳染病。臨床以角膜結(jié)膜炎、上呼吸道感染和流產(chǎn)為特征,但以上呼吸道癥狀為主。主要感染貓科動物,發(fā)病率很高,可達100%,但病死率在不同年齡的貓上差異很大,成年貓一般不引起死亡,但幼仔貓的死亡率可達50%。該病首先從美國發(fā)現(xiàn),并從中分離到病毒[1]。隨后在歐、美等一些國家均相繼報道。我國已多次發(fā)現(xiàn)可疑病例,但還沒有對其進行診斷和檢測的報道。

    1 病原

    貓皰疹病毒1型屬于皰疹病毒科,甲型皰疹病毒亞科成員[2],為雙股DNA病毒,具有皰疹病毒的一般形態(tài)特征。1958年由Crandell and Maurer首次從美國患呼吸道疾病的仔貓體中分離與鑒定[1]。

    1.1 形態(tài)結(jié)構(gòu) 位于細胞核內(nèi)的FHV-1病毒粒子平均直徑約148nm,位于細胞漿內(nèi)的病毒粒子直徑約為128~168nm,細胞外游離病毒的直徑約164nm,含162個殼粒。病毒粒子主要由核心、衣殼和囊膜三部分組成。核心直徑介于30~70nm之間,由雙股DNA與蛋自質(zhì)纏繞而成,觀察超薄切片標本時,核心常為均勻一致的圓形電子致密區(qū),但有時也能看到花紋樣結(jié)構(gòu)。病毒衣殼為立體對稱的正二十面體,外觀呈六角形。外層衣殼的形態(tài)結(jié)構(gòu)是皰疹病毒科的重要特征,它由162個互相連接呈放射狀排列且有中空軸孔的殼粒構(gòu)成。殼粒的大小約為12.5×9.5nm.主要成分為多肽[2]。衣殼周圍有一基質(zhì)層,通常被皮層(tegument)包繞,皮層外面由雙層病毒膜包裹,病毒膜表面附有纖突,病毒膜與纖突統(tǒng)稱為囊膜[3]。

    通常在宿主細胞核內(nèi)看到各種形狀核心的未成熟病毒粒子,直徑約95nm,該病毒粒子在細胞核內(nèi)形成核內(nèi)包涵體,此種包涵體由電子散射力較強的物質(zhì)所構(gòu)成的病毒基質(zhì)和未成熟病毒粒子組成,有時可看到未成熟粒子似乎以包涵體的基質(zhì)為基地,形成半月狀或馬蹄形結(jié)構(gòu)。在宿主細胞核的空泡中還看到成熟粒子及向空泡內(nèi)突出的“芽”結(jié)構(gòu),此種成熟粒子屬于小囊膜病毒粒子,直徑約135nm。在宿主細胞漿的空泡中看到大囊膜病毒粒子及由多個核衣殼構(gòu)成的包涵物,同時在該胞漿空泡膜上能看到病毒“芽”結(jié)構(gòu)。在細胞間隙看到大囊膜粒子及空心粒子,直徑約為185nm[3]。

    1.2 基因結(jié)構(gòu) 1991年Grail等對貓皰疹病毒I型B927毒種進行了限制性酶切圖譜的分析,發(fā)現(xiàn)其基因組大小約為126 kbp,由一99kbp的長獨特區(qū)(UL)和一27kbp的短片段組成,其中短片段由長7~8.5kbp的反向重復(fù)序列夾心8~9kbp的短獨特序列(US)組成[4]。US區(qū)包含gG、gD、gI和 gE等基因[5]。FHV-1的基因結(jié)構(gòu)模式圖[1]如下:

    1.3 培養(yǎng) 本病毒對貓紅細胞有凝集和吸附特性。FHV-1能在貓胚的腎、肺以及睪丸細胞培養(yǎng)物內(nèi)良好增殖和傳代。病毒增殖迅速,細胞致病性強,接種12h就開始出現(xiàn)CPE,24hCPE達50%,CPE呈分散性病灶,細胞圓縮,胞漿呈線狀,合胞體形成。36h達高峰,病變細胞培養(yǎng)物往往葡萄串狀,48h細胞全部脫落[3]。感染細胞因融合而產(chǎn)生多核巨細胞,核內(nèi)有大量橢圓形嗜酸性包涵體、正常傳代時,一般在接種后2~4d可達收獲程度。貓鼻氣管炎病毒在瓊脂覆蓋層下能形成蝕斑。其他異種動物細胞能較好增值病毒的只有兔腎細胞一種,不感染雞胚和雞胚成纖維細胞,可對人、猴和牛源細胞發(fā)生頓挫型感染,并形成包涵體,但難以傳代。

    1.4 血清型和變異 最早的研究發(fā)現(xiàn)這些毒株的特性相同,都屬于一個血清型。交叉中和試驗證明本病毒與貓細小病毒、牛鼻氣管炎病毒、偽狂犬病病毒、貓杯狀病毒以及單純摘疹病毒等都不呈現(xiàn)交叉反應(yīng)[2]。但隨后的研究發(fā)現(xiàn)了FHV-1存在一些新的基因型。1992年Horimoto等進行了9個毒株的同源性分析,發(fā)現(xiàn)致弱的F2疫苗株缺乏一種分子量為36kDa的蛋白質(zhì),并且MluI限制性酶的切割模式和野毒株有明顯的不同[6]。1995年Maeda等發(fā)現(xiàn)所有的分離株可以通過M1uI消化的方法分為3個血清型:C7301,F(xiàn)2和C7805型[7,8]。2005年Hamano等報道SalI酶切可以作為FHV-1的基因標志進行FHV-1野毒分離株的鑒別[9]。1998年Fujita等發(fā)現(xiàn)FHV-1不同毒株之間可以發(fā)生體外基因重組,重組頻率從10.1%到21.5%不等[10]。

    1.5 抵抗力 FHV-1對外界因素的抵抗力很弱,離開宿主后只能存活數(shù)天。對酸和脂溶劑敏感,在-60℃下只能活存3個月,在56℃下經(jīng)4~5min滅活。

    2 流行病學(xué)

    (1)貓是本病的自然宿主,其它的貓科動物也可以感染,曾有幼齡印度豹感染引起皮膚潰瘍的報道[11]。但也有從犬中分離到貓皰疹病毒I型的報道[12]。本病成年和幼體貓均易發(fā)生,特別是幼仔感染后,嚴重的會引起死亡。仔貓通常在4~6周齡,因其母源抗體水平下降易感。(2)病貓是主要的傳染源。病毒在鼻、咽喉、氣管和支氣管以及舌、結(jié)膜等的上皮細胞內(nèi)增殖并經(jīng)鼻、眼、咽等的分泌物排出。急性感染貓由其唾液和淚液大量散毒可達數(shù)周:持續(xù)帶毒貓無明顯癥狀,呈應(yīng)激性間歇性小量散毒;近年來的研究證明,自然康復(fù)或人工接種耐過貓,能長期帶毒和排毒,成為危險的傳染源。本病很可能象很多皰疹病毒那樣,具有潛伏感染的性質(zhì)。孕貓感染后可能發(fā)生垂直感染并致死胎兒。(3)貓傳染性鼻氣管炎主要是通過直接接觸,或通過含病毒的飛沫而傳播,呈現(xiàn)高度的接觸傳染性。FHV-1通過易感貓的口、鼻直接接觸傳播。懷孕貓感染可將FHV-1傳染給胎兒。發(fā)情期可因交配感染。(4)FHV-1全世界皆有流行。群居時,貓感染FHV-1后普遍發(fā)病較重,這與管理不善、FHV-1帶毒貓的存在有直接關(guān)系。因此,合理的管理、消毒和對病貓的適當隔離都能很好地預(yù)防FHV-1的感染與傳播。

    3 癥狀

    (1)本病潛伏期很短,約2~5d,取決于貓的年齡、免疫狀況以及品種和可能的其他末知因素。FHV-1在略低于正常體溫時復(fù)制增殖最快[13]。貓感染本病后,病毒能在病貓的鼻腔、咽喉、氣管、結(jié)膜和舌的上皮細胞內(nèi)繁殖,并隨其分泌物排到體外。因此,F(xiàn)HV-1感染多局限于眼、口、上呼吸道等淺表組織。(2)本病傳播迅速,常突然發(fā)病,病貓的臨床表現(xiàn)多種多樣。病貓或者呈亞臨床表現(xiàn),體溫正?;騼H有輕微發(fā)熱而無任何其他癥狀;或者明顯發(fā)病。仔貓較成年貓癥狀嚴重。斷乳仔貓或易感成年貓感染FHV-1后均表現(xiàn)出典型癥狀,病貓體溫升高,達40℃左右,精神沉郁,食欲減少,呈明顯的上部呼吸道感染癥。不時打噴嚏,眼鼻分泌物增多、流眼淚,鼻分泌物增多、發(fā)熱和厭食等。同時出現(xiàn)鼻卡他性炎癥和結(jié)膜炎,繼之精神沉郁,食欲減退。鼻液和眼淚初期透明,病勢嚴重后即變?yōu)檎骋耗撔浴S捎诜置谖锎碳ぃ?、鼻周圍的被毛常脫落。舌及硬腭出現(xiàn)潰瘍的貓,因口腔劇痛,可致過度流涎。由于感染貓免疫能力不同,病程長短不一,一般在數(shù)周內(nèi)得以控制和恢復(fù)?;疾∽胸埣s半數(shù)死亡,如合并細菌感染,死亡率更高。臨床癥狀經(jīng)一周后逐漸緩和并痊愈。部分患貓可轉(zhuǎn)為慢性,出現(xiàn)咳嗽、鼻竇炎和呼吸困難等癥狀。極少有下呼吸道或肺感染的報道,即使發(fā)生也是繼發(fā)細菌感染的結(jié)果。(3)皰疹性角膜炎為FHV-1感染的示病性癥狀。典型損害是出現(xiàn)普遍嚴重的樹枝狀潰瘍。繼發(fā)細菌感染時可致潰瘍加深,甚至角膜穿孔。潰瘍修復(fù)過程中,結(jié)締組織形成,甚至可導(dǎo)致角膜和結(jié)膜粘連。感染進一步擴散,導(dǎo)致全眼球炎,造成永久性失明。局部使用皮質(zhì)類固醇時,可致角膜剝離[13]。(4)急性感染FHV-1臨床治愈的貓大部分轉(zhuǎn)為慢性帶毒者,再次感染FHV-1時,表現(xiàn)為間歇性角膜結(jié)膜炎或輕微鼻炎。慢性帶毒者一般不表現(xiàn)癥狀,難于鑒別,在應(yīng)激或使用皮質(zhì)類固醇藥物時發(fā)生間歇排毒。個別病貓可發(fā)生病毒血癥,導(dǎo)致全身組織感染。生殖系統(tǒng)感染FHV-1時,可致陰道炎和子宮頸炎,并發(fā)生短期不孕。孕貓感染FHV-1時,缺乏典型的上呼吸道癥狀,但可能造成死胎或流產(chǎn),即使順利生產(chǎn),幼仔多伴有嗜睡,呼吸道癥狀,體格衰弱,極易死亡。

    4 病理變化

    病變主要在呼吸道。初期,算腔和鼻甲骨黏膜呈彌漫性充血、潰瘍甚至扭曲變形。喉頭和氣管也呈現(xiàn)類似變化。數(shù)日后在鼻腔和鼻甲骨黏膜出現(xiàn)壞死灶甚至溶骨性病變。扁桃體和頸部淋巴結(jié)腫大,散在不等數(shù)量的出血點。慢除病例可見鼻竇炎[13]。感染后2~5d,典型核內(nèi)包涵體即出現(xiàn)于呼吸道黏膜細胞,其中以鼻中隔,鼻甲骨和扁桃體黏膜細胞中的包涵體最多。

    5 診斷

    由于上呼吸道感染可由杯狀病毒、衣原體、支原體等多種病原引起,因此,單憑上呼吸道癥狀很難對FHV-1感染確診。但角膜炎和角膜潰瘍具有一定的示病特征。

    5.1 病原學(xué)診斷 病毒分離分離病毒是最準確可靠的診斷方法。病毒能在病貓鼻咽部黏膜和結(jié)膜持續(xù)存在30d以上,是采取檢樣最理想的部位。出現(xiàn)臨床癥狀9d后,在肝、肺、脾、腎等實質(zhì)臟器內(nèi)也能檢出病毒。最容易分離病毒的檢樣是鼻咽部和結(jié)膜拭子,將其置入含高濃度抗菌素的營養(yǎng)液內(nèi)經(jīng)擠壓后取出,將混懸液于4℃感作2一4h后,接種貓?zhí)ツI原代或繼代細飽培養(yǎng)物,37℃吸附2h.更換新維持液后后置于37 C培養(yǎng),逐日觀察有無細胞病變出現(xiàn)直至一周。無細胞病變時,應(yīng)連續(xù)傳代二代用已知的貓鼻氣管炎病毒免疫血清,對新分離病毒作中和試驗,即可達到鑒定病毒的日的。有報道激素處理可以提高病毒的檢出率[14]。

    5.2 血清學(xué)診斷 對結(jié)膜、鼻黏膜刮片或活檢組織片進行組織學(xué)或免疫熒光檢測,可發(fā)現(xiàn)典型的核內(nèi)皰疹病毒包涵體確診。應(yīng)用中和試驗檢測病貓急性期和恢復(fù)后雙份血清的中和抗體效價,具有回顧性診斷意義,多數(shù)病貓在感染后3周抗休效價最高,隨后迅速下降。

    5.3 分子生物學(xué)診斷 應(yīng)用PCR檢測急性和慢性FHV-1感染,也有較高的特異性和敏感性。

    6 防治

    (1)FHV-1的預(yù)防除了合理的管理、消毒和對病貓的適當隔離等預(yù)防措施外,對易感貓進行免疫是最重要的預(yù)防方法。FHV-1疫苗不能完全阻止病毒感染,但可以防止疾病發(fā)生,減少病毒排出[15]?,F(xiàn)階段所使用的疫苗主要包括活疫苗和滅活苗兩類。滅活疫苗需同時使用佐劑。仔貓一般在斷乳期接種,免疫2次,間隔3~4周。免疫效果一般可維持4~5年。但對群居貓或受FHV-1感染威脅的貓,再次免疫間隔需要適當縮短。(2)國內(nèi)外已有弱毒疫苗供應(yīng),可以單獨使用也可與貓杯狀病毒結(jié)合成二聯(lián)苗,或與貓泛自細胞減少癥病毒、貓肺炎衣原體結(jié)合成多聯(lián)苗使用。一般進行肌肉注射,幼貓注射兩次,間隔3周,成貓每年注射1次。(3)本病的治療常采用抗菌藥物,防止繼發(fā)性感染,并配合對癥治療。對患貓眼、鼻的周圍應(yīng)經(jīng)常擦拭,避免分泌物刺激。對眼分泌物較多的貓,可使用氯霉素、氧四環(huán)素或氯四環(huán)素眼膏,但應(yīng)避免使用皮質(zhì)類固醇。局部噴霧可軟化分泌物,避免結(jié)痂,便于清除。鼻部黏膜嚴重充血時,可短期使用收斂藥物,以改善通氣。(4)當出現(xiàn)皰疹性角膜炎時,需使用抗皰疹的藥物如皰疹凈等,4~6次/d??诜亟M人α-干擾素或貓干擾素可作為輔助的抗病毒治療措施。(5)繼發(fā)的慢性鼻竇炎治療比較困難,但在抗生素治療后會有所緩解,停藥后極易復(fù)發(fā)。癥狀嚴重時,可結(jié)合使用抗生素和收斂藥物,減少充血,緩解癥狀。大多數(shù)貓,慢性鼻竇炎一旦發(fā)生,將伴其一生,完全恢復(fù),幾近無望。(6)對不能飲食的貓,需及時靜脈補液,以維持水代謝平衡,并使眼、鼻分泌物不致過于粘稠。應(yīng)給病貓?zhí)峁┛煽谒绍浀氖澄?。厭?d以上的病貓,應(yīng)強迫進食,給予營養(yǎng)支持。

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    S858.28

    B

    1007-1733(2013)09-0080-03

    2013–06–26)

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