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    雞大腸桿菌體外耐藥性試驗(yàn)

    2013-06-05 15:23:59劉明然山東省臨沂市畜牧局動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所276004
    山東畜牧獸醫(yī) 2013年5期
    關(guān)鍵詞:氟苯尼米卡氯霉素

    劉明然 (山東省臨沂市畜牧局動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所 276004)

    雞大腸桿菌體外耐藥性試驗(yàn)

    劉明然 (山東省臨沂市畜牧局動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所 276004)

    本文就臨沂地區(qū)雞大腸桿菌體外耐藥性情況進(jìn)行了試驗(yàn),通過(guò)15種常用抗生素的藥敏試驗(yàn),以質(zhì)控菌ATCC25922為質(zhì)量控制,篩選出臨沂地區(qū)雞大腸桿菌病敏感度較高的藥物是頭孢菌素類(lèi)、阿米卡星、氟苯尼考等,為臨沂地區(qū)雞大腸桿菌病的防治提供了依據(jù)。

    大腸桿菌病 耐藥 藥敏試驗(yàn)

    隨著臨沂地區(qū)養(yǎng)雞業(yè)的持續(xù)發(fā)展,特別是集約化程度的加深和雞群新品種的增多,雞大腸桿菌病的流行日趨嚴(yán)重,給養(yǎng)殖戶(hù)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失[1]。實(shí)際生產(chǎn)中對(duì)該病的防治多采用藥物,為了給臨床篩選有效的抗生素提供科學(xué)依據(jù),避免盲目用藥,本試驗(yàn)對(duì)分離自臨沂地區(qū)的45株雞源致病性大腸桿菌做了體外耐藥性測(cè)定。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    1.1.1 菌株 從臨沂地區(qū)疑似大腸桿菌病的病死雞體內(nèi)分離純化,并經(jīng)生化鑒定和病源性測(cè)定的致病性大腸桿菌,篩選出45株進(jìn)行體外耐藥性測(cè)定,編號(hào)為L(zhǎng)Y1-LY45。

    1.1.2 儀器和設(shè)備 生化培養(yǎng)箱、高壓滅菌鍋、顯微鏡、超凈工作臺(tái)、冰箱、常用玻璃器材等,由臨沂市檢測(cè)中心提供。營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基、麥康凱瓊脂培養(yǎng)基、伊紅美藍(lán)瓊脂、SS瓊脂培養(yǎng)基、等培養(yǎng)基,葡萄糖、乳糖、麥芽糖、甘露醇、蔗糖等細(xì)菌微量生化反應(yīng)管,均購(gòu)自上海市醫(yī)學(xué)化驗(yàn)所試劑廠(chǎng)及杭州天和微生物試劑有限公司。藥敏質(zhì)控菌株ATCC25922購(gòu)自中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所。

    1.1.3 藥敏試紙 氨芐青霉素(AMP,氨)、阿莫西林(AMX,阿)、諾氟沙星(NOR,諾)、氧氟沙星(OFL,氧)、環(huán)丙沙星(CIP,環(huán))、阿米卡星(AMK,阿)、慶大霉素(GM,慶)、卡那霉素(KM,卡)、鏈霉素(SM,鏈)、新霉素(NM,新)、氟苯尼考(FLO,氟)、氯霉素(CMP,氯)、頭孢拉啶(CED,拉啶)、頭孢唑啉(CFZ,唑啉)、頭孢噻肟(FTX,噻肟)均購(gòu)于杭州天和微生物試劑有限公司。

    1.2 方法

    無(wú)菌條件下,將大腸桿菌分別劃線(xiàn)接種于營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上,37℃培養(yǎng)18h后,挑取單菌于0.85%生理鹽水中,震蕩混勻后與麥?zhǔn)蠘?biāo)準(zhǔn)比濁管比濁,使接種菌液濃度為1×109個(gè)/ml。用滅菌的涂布器蘸取菌液后涂布整個(gè)培養(yǎng)基表面,反復(fù)數(shù)次,每次將平板旋轉(zhuǎn)60度,最后沿平皿周邊繞兩圈,保證涂布均勻。待平板上的水分被瓊脂完全吸收后開(kāi)始貼紙片。用尖嘴鑷子將藥敏紙片平放于平板上,并輕壓使其緊貼在平板表面,藥敏紙片一經(jīng)放置不要移動(dòng),兩紙片中心相距不少于24mm,紙片與平皿邊緣不少于15mm[2]。藥敏試驗(yàn)判斷標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表1。

    表1 每片含藥量判定標(biāo)準(zhǔn)-抑菌圈直徑 (mm)

    2 結(jié)果

    具體結(jié)果見(jiàn)表2。

    表2 45株雞大腸桿菌對(duì)15種藥敏試驗(yàn)結(jié)果

    ?

    從表中可以看出,臨沂地區(qū)雞大腸桿菌敏感度較高的藥物是頭孢噻肟、頭孢唑啉、頭孢拉啶、氟苯尼考和阿米卡星,中度敏感的有慶大霉素、氧氟沙星、卡那霉素和諾氟沙星,而氨芐青霉素、阿莫西林、氯霉素、環(huán)丙沙星、鏈霉素、新霉素、敏感度較低。

    3 討論

    通過(guò)15種常用抗生素的藥敏試驗(yàn),以質(zhì)控菌ATCC25922為質(zhì)量控制,篩選出臨沂地區(qū)大腸桿菌病敏感度較高的藥物是頭孢菌素類(lèi)、阿米卡星、氟苯尼考等,其中以頭孢類(lèi)藥物敏感度最高。阿米卡星與氟苯尼考敏感度較相關(guān)報(bào)道有明顯下降[3-7],尤其是氟苯尼考,作為一種氯霉素類(lèi)的獸用廣譜抗菌藥,抗菌活性高于氯霉素及甲颯霉素,尤其對(duì)一些耐氯霉素及甲諷霉素的細(xì)菌仍然表現(xiàn)出較高的抗菌活性,因此,在動(dòng)物的疾病防治上尤其是食品動(dòng)物,具有廣闊的應(yīng)用前景[8]。但在此次藥敏試驗(yàn)中,氟苯尼考敏感率僅為64.4%,遠(yuǎn)低于頭孢類(lèi)藥物,臨沂地區(qū)的雞養(yǎng)殖場(chǎng)戶(hù)在實(shí)際生產(chǎn)中應(yīng)高度重視,盡量降低對(duì)氟苯尼考的使用,避免因藥物耐藥而失去最佳治療時(shí)間,造成經(jīng)濟(jì)損失。

    [l] 揮時(shí)鋒, 鄭明球, 潘震寰. 雞大腸桿菌病病原的分離、鑒定及特性[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào), 1998, 11(1): 90-97.

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    S852.61+2

    A

    1007-1733(2013)05-0015-02

    2013–03–22)

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