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    奶牛同期排卵定時(shí)輸精技術(shù)的研究進(jìn)展

    2013-06-05 15:23:53胡路鋒劉賢俠楊恒高樹王海濤柳振國(guó)
    草食家畜 2013年3期
    關(guān)鍵詞:情期受胎率輸精

    胡路鋒,劉賢俠*,楊恒,高樹,王海濤,柳振國(guó)

    (1.石河子大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,新疆石河子832003;2.新疆天康畜牧生物技術(shù)股份有限公司,新疆 烏魯木齊830032)

    奶牛同期排卵定時(shí)輸精技術(shù)的研究進(jìn)展

    胡路鋒1,劉賢俠1*,楊恒1,高樹1,王海濤2,柳振國(guó)2

    (1.石河子大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,新疆石河子832003;2.新疆天康畜牧生物技術(shù)股份有限公司,新疆 烏魯木齊830032)

    同期排卵定時(shí)輸精技術(shù)目前已經(jīng)在奶牛生產(chǎn)中應(yīng)用,本文分析了該技術(shù)的原理及國(guó)內(nèi)外的研究進(jìn)展,根據(jù)我國(guó)奶牛業(yè)的養(yǎng)殖現(xiàn)狀,提出了今后的研究方向。

    奶牛;同期化排卵;定時(shí)輸精

    近年來隨著奶牛業(yè)的發(fā)展,奶牛單產(chǎn)水平的逐步提高,奶牛的繁殖受胎變的越來越困難,產(chǎn)犢間隔延長(zhǎng),部分牛場(chǎng)超過450 d,嚴(yán)重影響了奶牛場(chǎng)的經(jīng)濟(jì)效益。目前同期排卵定時(shí)輸精技術(shù)(Timed Artificial Insemination,TAI)已成為規(guī)?;?chǎng)繁殖管理中重要內(nèi)容之一。TAI是指使一群奶牛在同一時(shí)期內(nèi)發(fā)情并排卵,不需要觀察發(fā)情就能進(jìn)行人工授精的技術(shù),它是改進(jìn)的同期發(fā)情技術(shù),具有效果可靠,使用面廣,效率更高的優(yōu)點(diǎn),有利于大型規(guī)模牧場(chǎng)采用。但是受多種因素的影響,我國(guó)各地使用該技術(shù)的效果不一,使用方法、對(duì)象及操作還存在許多問題。本文總結(jié)了近年來國(guó)內(nèi)外該技術(shù)應(yīng)用的進(jìn)展供參考。

    1 TAI原理

    TAI技術(shù)以促性腺激素釋放激素(GnRH)為基礎(chǔ),結(jié)合前列腺素(PG)、P4、雌激素(E2)、馬(人)絨毛膜促性腺激素(eCG、HCG)等一起使用,最終使母牛同期化排卵,進(jìn)行集中TAI。目前一般程序?yàn)榈谝淮巫⑸銰nRH,誘導(dǎo)任何一次卵泡發(fā)育波中的卵泡排卵并形成黃體,GnRH注射在促進(jìn)前一波卵泡排卵后又促進(jìn)新一輪卵泡發(fā)育波的出現(xiàn),7 d后注射PG溶解黃體,此時(shí)卵巢上存在一個(gè)來自第一次GnRH注射后產(chǎn)生的優(yōu)勢(shì)卵泡,該優(yōu)勢(shì)卵泡由于黃體溶解將繼續(xù)發(fā)育,使母牛進(jìn)入發(fā)情期,間隔2 d,在優(yōu)勢(shì)卵泡發(fā)育接近成熟時(shí)對(duì)母牛第二次注射GnRH以誘導(dǎo)卵泡排卵。最后在第二次GnRH注射后一定時(shí)間對(duì)母牛輸精,這一技術(shù)在GnRH誘發(fā)排卵之前就已經(jīng)調(diào)整了卵泡的成熟和黃體的退化,從而無需發(fā)情鑒定就可TAI。

    2 TAI技術(shù)方案及效果

    2.1 國(guó)內(nèi)研究現(xiàn)狀

    2.1.1 使用傳統(tǒng)常規(guī)方案的研究

    滕勇[1]利用一次PG法,二次PG法和GnRH-PG-GnRH法誘導(dǎo)奶牛同期發(fā)情這些方法均要在觀察發(fā)情后配種,受胎率分別為31.25%,41.94%和85.71%。GnRH-PG-GnRH法的受胎率明顯高于其他兩種方法。李啟業(yè)等[2]用LHRH-A3對(duì)奶牛進(jìn)行誘導(dǎo)發(fā)情,受胎率為87.5%。姚國(guó)良[3]采用Ovsynch程序(即對(duì)母牛先用GnRH處理,7 d后注射PG,48 h后再注射一次GnRH,第2次注射GnRH后18~20 h輸精),分別對(duì)乏情奶牛、卵巢靜止奶牛及正常發(fā)情奶牛進(jìn)行試驗(yàn),顯示乏情奶牛情期受胎率為74%,高于常規(guī)配種49.8%的受胎率;卵巢靜止奶牛的治療有效率為97.2%,情期受胎率為64%;產(chǎn)后正常發(fā)情奶牛應(yīng)用定時(shí)輸精程序處理后,其情期受胎率分別提高了21%和25.3%。劉念銳等[4]選擇產(chǎn)后80 d左右,長(zhǎng)期不發(fā)情,直腸檢查卵巢多為靜止、持久黃體、卵巢囊腫等狀況奶牛119頭,采用Ovsynch程序處理,得到37%的妊娠率,高于常規(guī)處理牛群25%的妊娠率。阿布力孜等[5]使用GnRH和PG處理,經(jīng)產(chǎn)牛的受胎率為71.4%;后備牛的受胎率為75.0%,二者之間無顯著差異。凌明湖等[6]對(duì)產(chǎn)后32~144 d乏情奶牛和屢配不孕奶牛定時(shí)輸精,結(jié)果乏情奶牛第一情期受胎率為37.5%、下一情期受胎率為50%,分別比該場(chǎng)2008年的實(shí)際生產(chǎn)水平高7.5%和6.1%。屢配不孕奶牛第一情期受胎率為37.5%、下一情期受胎率為60%,分別比該場(chǎng)2008年的實(shí)際生產(chǎn)水平高7.5%和16.1%。

    2.1.2 使用常規(guī)方案與孕酮陰道栓(CIDR)相結(jié)合方案的研究

    高慶華等[7]利用孕激素海綿栓-孕馬血清(PMSG)-PG方案(圖1)即先用孕激素通過陰道栓處理7 d,結(jié)束時(shí)注射PG,結(jié)果同期發(fā)情率達(dá)到75%,48 h同期率達(dá)到62.15%,受胎率達(dá)到44.14%。黃開華等[8]利用GnRH—PG—GnRH法及增加孕酮緩釋劑的方法,都得到了約50%的受胎率,結(jié)果表明1胎牛效果最好,達(dá)55%,5胎及5胎以上牛只有20%左右的受胎率。

    圖1

    2.2 國(guó)外研究現(xiàn)狀

    2.2.1 使用常規(guī)方案的研究

    為了確定TAI的最佳時(shí)機(jī),Pursley等[9]比較了GnRH二次處理后第0 h、8 h、16 h、24 h、32 h輸精的受胎率,結(jié)果表明,GnRH二次處理后第16 h受胎率(44%)最高,第32 h受胎率最低。這可能是第32 h實(shí)施TAI時(shí)已發(fā)生排卵,待精子獲能后,卵子的受精能力已降低,因此TAI在二次處理后第16 h實(shí)施最好。Geary等[10]做了Ovsynch和CO-Synch方案的對(duì)比研究,CO-Synch方案進(jìn)行了少許改進(jìn),與Ovsynch方案的激素注射程序完全相同,但是牛在第9 d注射GnRH時(shí)就TAI,結(jié)果Ovsynch方案牛的妊娠率為57%,明顯高于使用CO-Synch方案牛49%的妊娠率,可能是由于用Ovsynch方案處理的母牛輸精時(shí)間與排卵時(shí)間更接近的緣故。

    Martinez等[11]在注射GnRH后,觀察第一個(gè)卵泡活動(dòng)波的優(yōu)勢(shì)卵泡排卵之后的第3 d、第6 d和第9 d誘導(dǎo)母牛卵泡波出現(xiàn)的能力,發(fā)現(xiàn)只有那些對(duì)處理發(fā)生反應(yīng)的母??梢哉T導(dǎo)出現(xiàn)新的卵泡波,并且在處理后的第7 d有74%的奶牛存在一個(gè)優(yōu)勢(shì)卵泡,其中85%的優(yōu)勢(shì)卵泡大于9 mm并有排卵能力,說明奶牛在GnRH處理后7 d出現(xiàn)了優(yōu)勢(shì)卵泡。

    Moreira等[12]認(rèn)為TAI理想的處理階段應(yīng)該是母牛處于發(fā)情周期的5~10 d。因?yàn)樵诎l(fā)情早期,自發(fā)性排卵已經(jīng)發(fā)生而潛在的優(yōu)勢(shì)卵泡太小,對(duì)注射GnRH的反應(yīng)不足以誘導(dǎo)排卵,因此在第二次注射GnRH時(shí),優(yōu)勢(shì)卵泡可能已經(jīng)退化,退化的優(yōu)勢(shì)卵泡不發(fā)生排卵,即使排卵最終受精率也比較低,因此奶牛在發(fā)情早期應(yīng)用Ovsynch程序的妊娠率可能很低。

    Brusveen等[13]對(duì)一牛群集中注射GnRH,7 d后注射PG,然后分別按以下方案處理(圖2):(1)注射PG后48 h注射GnRH同時(shí)進(jìn)行TAI(Cosynch-48);(2)注射PG后56 h注射GnRH,然后在16 h之后TAI(Cosynch-56);(3)注射PG后72 h注射GnRH同時(shí)進(jìn)行TAI(Cosynch-72),在人工授精后31~33 d利用超聲進(jìn)行妊娠診斷,52~54 d再次進(jìn)行妊娠診斷。Cosynch-48妊娠率為29.2%,Cosynch-72妊娠率為25.4%,Cosynch-56的妊娠率最高,達(dá)到38.6%。

    圖2

    Ahujaa、Stevenson、Bartolome等[14-16]在各自的研究中,使用常規(guī)的Ovsynch方案都得到了50%左右的受胎率。Burns等[17]研究了TAI方案中用HCG替換GnRH的同期化排卵效果(圖3)。結(jié)果表明,不同劑量的HCG與GnRH在排卵反應(yīng)方面的效果相近,在一定情況下可以代替GnRH。

    圖3

    2.2.2 使用常規(guī)方案與孕酮陰道栓相結(jié)合方案的研究

    Evaluation of micro environment and comfort of civil aviation cabin in China

    Geary[18]采用CO-Synch方案得到52%的妊娠率,與Ovsynch方案54%的妊娠率相比,差異不顯著,當(dāng)把CIDR加入到這個(gè)方案中時(shí)(圖4),妊娠率從48﹪提高到59%。

    圖4

    Mialot等[19]在實(shí)驗(yàn)中采用PRID-PGF2α-GnRH(圖5)和PRID-PGF2α-PMSG(圖6)方案,受胎率分別為44.7%和53.8%。

    圖5

    圖6

    Larson等[20]為了研究發(fā)情鑒定對(duì)TAI的影響,及在以GnRH為基礎(chǔ)的方案中增加CIDR能否提高生殖力,采用5種方案進(jìn)行試驗(yàn)。(1)對(duì)照組先埋栓7 d,去栓同時(shí)給予PG,注射PG后觀察發(fā)情并人工授精。如果沒有觀察到發(fā)情,則在84 h注射GnRH并TAI;(2)GnRH處理后7 d注射PG,接著在60 h后第二次注射GnRH并TAI;(3)在第2種方案基礎(chǔ)上增加CIDR,即在第一次注射GnRH與PG之間;(4)GnRH處理后7 d注射PG,然后觀察發(fā)情并人工授精,如果沒有觀察到發(fā)情,則在84 h注射GnRH并TAI;(5)第4種方案增加CIDR,在第一次注射GnRH與PG之間。結(jié)果第5種方案的妊娠率為58%,第3種方案的妊娠率為54%,第4種方案的妊娠率為53﹪,對(duì)照組的妊娠率為53%,而第2種方案僅為44%。

    Busch等[21]改變常規(guī)TAI程序中CIDR的處理方式(圖7),即在GnRH處理前23 d置入CIDR,14 d后撤栓,實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組分別于注射PG后72 h、54 h第二次注射GnRH并TAI。結(jié)果實(shí)驗(yàn)組的情期受胎率為62%,高于對(duì)照組的47%。該研究表明提前用CIDR處理或延長(zhǎng)處理時(shí)間,能夠提高母牛受胎率。

    圖7

    Small等[22]研究了在降低孕酮?jiǎng)┝壳闆r下CIDR和eCG的使用效果(圖8),結(jié)果表明:低劑量的孕酮有增加大卵泡的直徑和響應(yīng)GnRH的排卵等作用,但它并不能提高TAI的受胎率,所以經(jīng)產(chǎn)牛一般不需使用CIDR,但對(duì)一些乏情牛可以選擇使用;而在第7 d注射PG的同時(shí)注射eCG,可促進(jìn)卵泡發(fā)育,提高初產(chǎn)牛的受胎率,但對(duì)經(jīng)產(chǎn)牛無明顯作用。

    圖8

    Bridges等[23]對(duì)“CO-Synch+CIDR”方案進(jìn)行了改進(jìn),即在注射GnRH后5 d用PG處理,12 h后第二次注射PG,在第二次注射PG 60 h后TAI。結(jié)果母牛受胎率提高了9.1%~13.3%,但由于該方案改變因素較多,究竟是哪種因素導(dǎo)致了受胎率的提高還有待研究。

    3 今后研究的方向及改進(jìn)措施

    3.1 研究不同地區(qū)氣候及管理?xiàng)l件下奶牛排卵規(guī)律

    奶牛卵泡的發(fā)育是個(gè)復(fù)雜的生理過程,卵泡波主要與血液中FSH濃度有關(guān),隨著卵泡的生長(zhǎng),F(xiàn)SH濃度逐漸下降。此時(shí),LH脈沖性釋放可以促進(jìn)卵泡的繼續(xù)生長(zhǎng)以及E2的產(chǎn)生。隨著優(yōu)勢(shì)卵泡的生長(zhǎng),E2分泌也加強(qiáng),當(dāng)血液中有足夠的E2來誘導(dǎo)出現(xiàn)LH峰時(shí),引起了優(yōu)勢(shì)卵泡排卵[24]。通過采集血液進(jìn)行分析可以判斷母牛發(fā)情周期及其卵泡的生長(zhǎng)狀態(tài)。但是常規(guī)的采血需要多次保定,并且對(duì)牛的應(yīng)激也較大,而應(yīng)用連續(xù)遙控采血裝置可以解決這個(gè)難題,國(guó)內(nèi)對(duì)該裝置應(yīng)用于奶牛TAI排卵時(shí)間的研究尚未見報(bào)道。國(guó)外用近紅外線裝置測(cè)量后軀和臀部溫度差變化等研究發(fā)情和排卵規(guī)律,因此這些方面還有待研究。

    3.2 應(yīng)用B超監(jiān)測(cè)確定合適的輸精時(shí)間

    在使用激素處理后,母牛的黃體、卵泡都會(huì)發(fā)生相應(yīng)的變化,使用B超檢查,可以相對(duì)準(zhǔn)確判斷此時(shí)黃體和卵泡的狀態(tài),以便決定是否適合輸精。McArt等[25]對(duì)比研究了普通TAI方案和與超聲結(jié)合的TAI方案對(duì)奶牛繁殖力的影響。結(jié)果表明,使用超聲檢測(cè)的方案能夠提高奶牛的繁殖力,并且在牛群中運(yùn)用超聲檢測(cè)還可提高發(fā)情檢測(cè)率,使奶牛產(chǎn)犢間隔縮短,減少了直腸觸摸和激素注射的次數(shù),同時(shí)降低了生產(chǎn)成本。這些方面國(guó)內(nèi)應(yīng)深入研究。

    3.3 與發(fā)情鑒定結(jié)合,根據(jù)不同地域飼養(yǎng)方式,分析出集中發(fā)情時(shí)間分布規(guī)律,以提高受胎率

    Larson等[20]在激素處理前10 d開始收集待處理牛的血清樣品,以確定該牛所處的發(fā)情周期階段。研究中發(fā)現(xiàn),同樣處理?xiàng)l件下,進(jìn)行發(fā)情鑒定后再TAI母牛的受胎率更高。但是進(jìn)行發(fā)情鑒定又增加了工作量,與TAI程序的目的相悖。所以我們需要在不增加工作量的情況下進(jìn)行發(fā)情鑒定。在Walsh等[26]的研究中就選擇了計(jì)步器作為判斷母牛是否發(fā)情,因?yàn)樵谂怕亚?2~16 h,母?;顒?dòng)量會(huì)逐漸增加,從16 h開始突然增加,并持續(xù)發(fā)情。此外,不同規(guī)模的牛場(chǎng)和不同飼養(yǎng)條件下,應(yīng)根據(jù)飼養(yǎng)方式、牛的品種、環(huán)境條件的不同,研究不同地域條件下TAI中輸精的合適時(shí)間。TAI基本程序適用于產(chǎn)后70 d不發(fā)情或初檢空懷牛,第2次注射GnRH前可以先直腸檢查或B超檢查鑒定卵泡,若無卵泡則視為無效,體況差的或患病牛不宜使用,第2次注射GnRH后配種時(shí)間有一定的變化,要以當(dāng)?shù)氐呐R床研究規(guī)律為準(zhǔn)。

    3.4 TAI前預(yù)處理提高情期受胎率

    在TAI前進(jìn)行預(yù)處理可以促進(jìn)子宮復(fù)舊,恢復(fù)其正常功能,也就間接地調(diào)節(jié)了卵巢的功能與活性。尤其對(duì)于那些因?yàn)橛^察不到位等人為原因造成的產(chǎn)后發(fā)情率低,而牛群的子宮、卵泡、體況尚可的情況下,使用預(yù)處理TAI方案能夠產(chǎn)生明顯的經(jīng)濟(jì)效益。預(yù)處理方案一般選擇PG處理,即在分娩后39 d注射PG,14 d后再注射一次。第2次注射PG,牛開始表現(xiàn)發(fā)情時(shí)進(jìn)行配種。第2次注射PG的12~14 d之后,沒有觀察到牛發(fā)情,就可使用同期化排卵技術(shù)。使用PG預(yù)處理不但能夠調(diào)節(jié)卵巢的正常功能,促進(jìn)優(yōu)勢(shì)卵泡發(fā)育、成熟、排卵,同時(shí)還能在一定程度上起到凈化子宮作用,減少了子宮疾病的發(fā)生。張明輝等[27]應(yīng)用PG結(jié)合GnRH的預(yù)同步定時(shí)輸精程序,在奶牛產(chǎn)后35~40 d開始處理,奶牛產(chǎn)后80 d的參配率和情期受胎率分別達(dá)到92.6%和46.7%,產(chǎn)后80 d和產(chǎn)后180 d總受胎率分別達(dá)到43.3%和93.5%,預(yù)處理方案適用于產(chǎn)后70 d發(fā)情率較差的大中型牧場(chǎng),能夠提高產(chǎn)后75 d參配率,取得良好效果。因此預(yù)處理方案可以在規(guī)模化奶牛場(chǎng)中推廣應(yīng)用。

    3.5 重視配后保胎管理可提高受胎率

    奶牛胚胎死亡經(jīng)常發(fā)生于妊娠早期,據(jù)報(bào)道[28],奶牛1個(gè)月內(nèi)的早期胚胎死亡率可達(dá)38%,高產(chǎn)奶牛更高。適當(dāng)?shù)臓I(yíng)養(yǎng)水平和良好的飼養(yǎng)管理可以減少胚胎早期死亡。高樹等[29]認(rèn)為可根據(jù)臨床實(shí)際情況在配后5~7 d、15~17 d分別對(duì)高產(chǎn)奶牛采取保胎措施,每次注射黃體酮100 mg或HCG 1 500~2 000 IU。也可用LH保胎。鐘壽坤[30]使用LH對(duì)青年牛處理,使流產(chǎn)率下降50%多,效果明顯。在使用藥物或激素保胎同時(shí),還應(yīng)加強(qiáng)妊娠母牛的管理,防止其他外部因素造成的流產(chǎn)。

    3.6 調(diào)查分析牛場(chǎng)繁殖存在的主因,提高飼養(yǎng)管理水平

    在生產(chǎn)中,動(dòng)物的繁殖機(jī)能受很多因素的影響,同樣品種、年齡、體況、卵巢發(fā)育狀態(tài)及地區(qū)、氣候等因素都會(huì)影響TAI的處理效果,因此要調(diào)查分析出牛場(chǎng)繁殖問題的主要原因,尤其要做好奶牛圍產(chǎn)期的保健、繁殖機(jī)能監(jiān)控和飼養(yǎng)管理。奶牛夏季炎熱天氣對(duì)其應(yīng)激較強(qiáng),在夏季處理效果可能較差。因此需要注意奶牛的防暑降溫。日糧也要平衡,不能造成奶牛過肥或過瘦,或者一些微量元素缺乏,這些都會(huì)影響奶牛繁殖性能。

    4 小結(jié)

    TAI技術(shù)的最大價(jià)值在于提供了一種有效的奶牛群體繁殖調(diào)控手段,減少了空懷時(shí)間,縮短了產(chǎn)犢間隔,簡(jiǎn)化了操作流程更利于大群的操作。在實(shí)際生產(chǎn)中,為了使TAI程序獲得較高的受胎率還應(yīng)提高奶牛的飼養(yǎng)管理水平,優(yōu)化激素藥物的處理方案、注意工作的細(xì)節(jié)問題(包括注射藥物是否過期、注射針頭的長(zhǎng)度、牛的體況、注射方式以及注射的時(shí)間),也應(yīng)注意繁殖資料的記錄和分析,培訓(xùn)提高TAI程序?qū)嵤┤藛T的理論和技術(shù)素質(zhì),逐步完善規(guī)范化的操作并具體落實(shí),注重營(yíng)養(yǎng)及環(huán)境等飼養(yǎng)管理因素對(duì)受胎率的影響,TAI技術(shù)的應(yīng)用才會(huì)效果更好。

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    Study on Ovulation-Synchronization Timed Insemination in Dairy Cows

    HU Lu-feng1,LIU Xian-xia1*,YANG Heng1,GAO Shu1,WANG Hai-tao2,LIU Zhen-guo2
    (1.College of Animal Science,Shihezi University,Shihezi 832003,China; 2.Xinjiang Tiankang Animal Husbandry Biotechnology Limited Liability Company,Urumqi 830032,China)

    The Synchronization of ovulation-timed insemination has been used in dairy farms.In our review, the principle of the technology and relative research progress at home and abroad were analyzed throughly. Meantime,according to our nation’s current situation in dairy industry,the direction of our future research was indicated in the end.

    dairy cows;synchronization of ovulation;timed artificial insemination

    S814.4

    A

    1003-6377(2013)03-0001-07

    2013-02-11

    國(guó)家科技支撐計(jì)劃子課題“奶牛標(biāo)準(zhǔn)化規(guī)模養(yǎng)殖飼草料高效利用和管理技術(shù)集成與示范”(2012BAD43B01);石河子大學(xué)科技服務(wù)團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目“規(guī)?;膛?chǎng)規(guī)范養(yǎng)殖技術(shù)應(yīng)用與推廣”(kjfwtd2011-03)

    胡路鋒(1988-),男,在讀碩士,研究方向:動(dòng)物生殖調(diào)控與產(chǎn)科疾病。

    劉賢俠(1970-),男,副教授,主要從事獸醫(yī)外產(chǎn)科學(xué)的教學(xué)和科研工作。

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