趙厚坤,梁延海,劉官久
(大興安嶺地區(qū)農(nóng)業(yè)林業(yè)科學(xué)研究院,黑龍江 大興安嶺 165000)
大興安嶺東部林區(qū)的地勢(shì)西高東低、中高南北均低,這是由于大興安嶺山脈自北向南穿越,區(qū)域最高峰伊勒呼里山脈自西向東橫跨大興安嶺林區(qū)中部,在呼源林場(chǎng)至塔源林場(chǎng)之間形成了海拔最高區(qū)域,據(jù)此,本地習(xí)慣把大興安嶺東部林區(qū)分為了“嶺南”“嶺北”“嶺東”。其氣候條件、植被類(lèi)型、無(wú)霜期都有明顯的差異。這種自然差異也體現(xiàn)出了不同野生黑木耳(Auricularia auricula)種源遺傳性狀的不同,為黑木耳人工栽培菌種的選育提供了資源條件。
1.1.1 供試菌株 在大興安嶺地區(qū)加格達(dá)奇、松嶺林業(yè)局、十八站林業(yè)局、韓家園林業(yè)局和塔河縣5個(gè)采集點(diǎn),采集野生優(yōu)良黑木耳子實(shí)體,組織分離得到菌株12個(gè);黑29菌株從黑龍江省微生物研究所引進(jìn)。
1.1.2 供試培養(yǎng)基
母種培養(yǎng)基:馬鈴薯200g、葡萄糖20g、瓊脂20g、磷酸二氫鉀3g、硫酸鎂1.5g,水1 000mL;
原種培養(yǎng)基:木屑78.5%、麥麩20%、石膏1%、石灰0.5%,含水率60%;
栽培袋培養(yǎng)料配方:木屑83.5%、麥麩15%、石膏1%、石灰0.5%,含水率62%;
1.2.1 菌絲體生長(zhǎng)狀況 將分離得到的黑木耳新菌株,通過(guò)2次提純后,選擇20~24℃、25~28℃和29~32℃3個(gè)溫度梯度進(jìn)行培養(yǎng),以期獲得低溫品種。定期詳細(xì)觀察不同菌株間的菌絲體長(zhǎng)勢(shì)、長(zhǎng)速、整齊度和色澤等情況,根據(jù)培養(yǎng)性狀進(jìn)行初步的篩選。使用主要質(zhì)量因子賦值方法,判別菌株的優(yōu)劣,進(jìn)行逐級(jí)淘汰。
1.2.2 原種制作 在馬鈴薯完全培養(yǎng)基上進(jìn)行菌絲階段的培養(yǎng)觀測(cè)。
工藝流程:篩料→拌料→裝袋→滅菌→冷卻→接種→培養(yǎng)。
培養(yǎng)料攪拌均勻后,聚丙烯菌袋作為容器,121℃滅菌2h,冷卻后,在無(wú)菌環(huán)境下接種,移入消過(guò)毒的培菌室培養(yǎng)。初期溫度可控制在26~28℃,并根據(jù)菌絲的長(zhǎng)勢(shì)逐步降溫。菌種不可高溫,以防老化。
1.2.3 栽培袋制作 工藝流程:篩料→拌料→裝袋→滅菌→冷卻→接種→培養(yǎng)。
栽培袋的規(guī)格為16.5cm×33cm,拌料均勻,裝袋緊實(shí),每袋裝料1.2~1.3kg,常壓鍋爐滅菌8~10h,冷卻至28℃,在無(wú)菌環(huán)境下接入菌種。接種后將栽培袋移入消過(guò)毒的培菌室內(nèi)進(jìn)行避光培菌。培菌初期溫度可控制在26~28℃,中期可控制在22~24℃,后期可控制在18~20℃,經(jīng)過(guò)30d左右,菌絲長(zhǎng)滿(mǎn)菌袋,40d菌絲完成生理后熟,進(jìn)行割口下地。
1.2.4 下地催耳 做床、撒白灰、澆水、鋪地膜,用石灰水或0.3%高錳酸鉀溶液進(jìn)行菌袋消毒,割120個(gè)小孔密擺,在袋上覆蓋塑料布和草簾,增溫保濕,13d左右出現(xiàn)耳芽,撤掉塑料布和草簾,分床,進(jìn)入澆水管理期。
1.2.5 澆水管理 采取早晚低溫時(shí)澆水,每次澆水要澆透,使耳片充分展開(kāi)。禁止中午高溫時(shí)段間歇性澆水,防止造成菌袋污染。
1.2.6 采收 耳片長(zhǎng)至8成熟,孢子尚未彈射時(shí)進(jìn)行采收,每個(gè)品種隨機(jī)選取3個(gè)大樣方,每個(gè)樣方50袋,記錄產(chǎn)量。
黑木耳菌株主要因子賦值見(jiàn)表1。
表1 黑木耳菌株主要質(zhì)量因子賦值
根據(jù)實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)及環(huán)境條件對(duì)菌絲生長(zhǎng)的影響度和菌種質(zhì)量的常規(guī)判別標(biāo)準(zhǔn)確定了下列判別式,以確定菌株淘汰的標(biāo)準(zhǔn)。
A=t×h×s/w×d
式中:A為質(zhì)量指數(shù);t為適宜溫度;h為外觀質(zhì)量;d為鎖狀聯(lián)合;s為菌絲生長(zhǎng)速度;w為污染率。
當(dāng)A值≥100時(shí),我們視為優(yōu)質(zhì)菌株,進(jìn)行保留;當(dāng)A值<100時(shí),我們視為淘汰菌株。
按照這一方法,為了提高試驗(yàn)效率,淘汰了60%的菌株,特別是重點(diǎn)淘汰抗雜菌能力弱和無(wú)鎖狀聯(lián)合的菌株。篩選出興安1號(hào)(十八站)、kyz3(科研站)、hjy1(韓家園)和興科6(古源)4個(gè)供試驗(yàn)栽培的野生菌株。
不同菌株菌絲體在22℃條件下的生長(zhǎng)情況見(jiàn)表2。
表2 不同菌株菌絲體在22℃條件下的生長(zhǎng)情況
由表2可知,興科6、hjy1在同樣條件下,菌絲長(zhǎng)速快于其他3個(gè)菌株,但菌絲體長(zhǎng)勢(shì)弱于其他3個(gè)菌株。
不同黑木耳菌株平均單袋產(chǎn)量的比較情況見(jiàn)表3。
表3 不同黑木耳菌株平均單袋產(chǎn)量比較
從表3可以看出,興安1號(hào)產(chǎn)量最高,平均為638.4g(干質(zhì)量47.4g),與其他菌株相比較,有顯著差異;興科6性狀方面較好,但產(chǎn)量不如對(duì)照菌株黑29。興安1號(hào)、hjy1和黑29干濕比較低,說(shuō)明子實(shí)體在生長(zhǎng)過(guò)程中干物質(zhì)積累較多,口感較好,但hjy1產(chǎn)量低于興安1號(hào)。
黑木耳興安1號(hào)的菌絲體,較常規(guī)品種在低溫條件下正常生長(zhǎng),且長(zhǎng)速和產(chǎn)量并不降低,產(chǎn)品質(zhì)量和售價(jià)都比常規(guī)品種有一定的提高。
黑木耳興安1號(hào)是選自大興安嶺地區(qū)的當(dāng)?shù)匾吧Z化品種,具有性狀好、產(chǎn)量高、品質(zhì)佳等優(yōu)點(diǎn),適合寒溫帶地區(qū)推廣應(yīng)用。