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    江蘇省連云港市肺結(jié)核患者耐藥狀況分析

    2013-05-14 06:02:38王前時金艷孟爾旺宋紅煥邵燕楊丹丹陸偉屈燕
    中國防癆雜志 2013年12期
    關(guān)鍵詞:順位連云港市抗結(jié)核

    王前 時金艷 孟爾旺 宋紅煥 邵燕 楊丹丹 陸偉 屈燕

    結(jié)核病是全世界面臨的重大的公共衛(wèi)生問題之一,據(jù)世界衛(wèi)生組織估計,全球每年約有870萬例新發(fā)肺結(jié)核患者[1]。中國是世界22個結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國家之一,每年新發(fā)結(jié)核病患者數(shù)僅次于印度,位居世界第二位[1]。伴隨著耐藥結(jié)核病的出現(xiàn),結(jié)核病的控制工作面臨巨大的挑戰(zhàn),我國的形勢尤為嚴(yán)峻,據(jù)2008年全國結(jié)核病耐藥基線調(diào)查結(jié)果顯示,我國涂陽肺結(jié)核患者的任意耐藥率為37.79%,耐多藥率和廣泛耐多藥率分別為8.32%和0.68%[2]。由于中國幅員遼闊,不同地區(qū)結(jié)核病患者的耐藥率差別較大,了解不同地區(qū)結(jié)核病患者耐藥狀況對于制定有效的結(jié)核病預(yù)防控制策略具有重要意義。本研究選取2011年江蘇省連云港市涂陽肺結(jié)核患者進(jìn)行結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng),并對獲得的藥物敏感性試驗結(jié)果進(jìn)行總結(jié),分析江蘇省連云港市涂陽肺結(jié)核患者的耐藥狀況。

    資料和方法

    一、患者來源

    連續(xù)納入2011年1—9月連云港市各區(qū)(縣)疾病預(yù)防控制中心和結(jié)核病定點醫(yī)院確診的痰涂片陽性肺結(jié)核患者522例,其中初治患者396例,復(fù)治患者126例。并收集患者的年齡、性別及抗結(jié)核藥物治療情況等基本信息。由縣級結(jié)核病防治機(jī)構(gòu)將涂片陽性患者的3份痰標(biāo)本在留取標(biāo)本3 d內(nèi)送往連云港市第四人民醫(yī)院進(jìn)行痰培養(yǎng)。初治患者定義為從未使用過抗結(jié)核藥物或使用抗結(jié)核藥物≤1個月者;復(fù)治患者定義為曾經(jīng)接受過抗結(jié)核藥物治療至少1個月以上者,包括復(fù)發(fā)、初治失敗和返回的患者。

    二、一般情況

    本研究共納入522例涂陽肺結(jié)核患者,在對上述患者標(biāo)本的實驗室檢查中,培養(yǎng)陽性499例,培養(yǎng)陰性23例,涂陽培陰率為4.4%(23/522)。培養(yǎng)陽性菌株在連云港市第四人民醫(yī)院進(jìn)行菌種鑒定和抗結(jié)核藥物敏感性檢測,其中非結(jié)核分枝桿菌占4.0%(20/499),結(jié)核分枝桿菌占96.0%(479/499)。本研究僅對479例(株)結(jié)核分枝桿菌的耐藥性進(jìn)行統(tǒng)計分析。

    在479例涂陽肺結(jié)核患者中,初治患者363例(75.8%)、復(fù)治患者116例(24.2%);男341例(71.2%)、女138例(28.8%);患者平均年齡為(47.6±16.4)歲,其中最低年齡16歲,最高年齡89歲。

    三、實驗試劑

    本實驗使用的分枝桿菌酸性羅氏培養(yǎng)基和含藥羅氏培養(yǎng)基均統(tǒng)一采購自珠海貝索生物技術(shù)有限公司。

    四、實驗方法

    涂片、培養(yǎng)和菌種鑒定方法按照文獻(xiàn)[3]的要求進(jìn)行。連云港市結(jié)核病防治所實驗室采用簡單法進(jìn)行分枝桿菌固體培養(yǎng)。使用N-乙酰半胱氨酸和氫氧化鈉溶液消化2份陽性級別較高的標(biāo)本。消化液接種于酸性羅氏培養(yǎng)基中,待4~8周后刮取菌落按照文獻(xiàn)[3]要求進(jìn)行傳統(tǒng)藥敏試驗和菌種鑒定。

    藥物敏感性試驗采用WHO推薦的比例法進(jìn)行,培養(yǎng)基藥物濃度分別為異煙肼(INH或H,0.2 μg/ml),利福平(RFP或R,40 μg/ml),乙胺丁醇(EMB或E,2 μg/ml),鏈霉素(S,4 μg/ml),卡那霉素(Km,30 μg/ml)和氧氟沙星(Ofx,2 μg/ml)。結(jié)核分枝桿菌對藥物的敏感度結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)如下:耐藥百分比=(含藥培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)/對照培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù))×100%。如果耐藥百分比<1%,則認(rèn)為受試菌對該抗結(jié)核藥物敏感;如果耐藥百分比>1%,則認(rèn)為受試菌對該抗結(jié)核藥物耐藥。

    五、耐藥性定義

    任意耐藥:對1種或1種以上抗結(jié)核藥物耐藥;單耐藥,僅對1種抗結(jié)核藥物耐藥;耐多藥(MDR),至少對異煙肼和利福平同時耐藥。廣泛耐藥(XDR):除對異煙肼和利福平同時耐藥之外,同時對任意一種氟喹諾酮類藥物及對3種二線抗結(jié)核藥物注射劑(Km和丁胺卡那霉素、卷曲霉素)中的至少一種耐藥。

    六、統(tǒng)計學(xué)分析

    采用SPSS 15.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析,計數(shù)資料的組間比較采用卡方檢驗和Fisher精確概率法,P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

    結(jié) 果

    一、肺結(jié)核患者耐藥類型

    479株菌株中,任意耐藥的菌株為151株(31.5%),其中初治患者和復(fù)治患者任意耐藥率分別為20.9%(76/363)和64.7%(75/116),復(fù)治患者任意耐藥率顯著高于初治患者(χ2=77.84,P<0.001)。此外,初治患者中單耐藥率(11.6%)與復(fù)治患者(11.2%)相近,兩者比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.011,P=1.000),而復(fù)治患者耐2種藥物(18.1%)、3種藥物(17.2%)及3種藥物以上(18.1%)的比例均顯著高于初治患者(分別為3.6%、1.7%和4.1%),P值均小于0.001 (表1)。

    表1 初治、復(fù)治肺結(jié)核患者的耐藥譜

    注表中括號外數(shù)值為耐藥例數(shù),括號內(nèi)數(shù)值為耐藥率(%)

    二、耐藥順位

    6種抗結(jié)核藥物的耐藥率順位從高到低依次為:INH(21.1%)、S(18.8%)、RFP(15.0%)、 EMB(10.0%)、Ofx(8.4%)和Km(2.1%)。初治患者中耐藥順位有所不同,耐藥率順位依次為:S(12.7%)、INH(11.3%)、RFP(6.9%)、Ofx(5.2%)、EMB(4.4%)、Km(0.8%)。復(fù)治患者中耐藥率順位依次為:INH(51.7%)、RFP(40.5%)、S(37.9%)、EMB(27.6%)、Ofx(18.1%)和Km(6.0%)。復(fù)治患者對6種抗結(jié)核藥物的耐藥率均明顯高于初治患者,P值均<0.05(表2)。此外,本研究中檢測出MDR患者59例(12.3%,59/479),其中初治患者21例,復(fù)治患者38例,初治和復(fù)治患者M(jìn)DR率分別為5.8%和32.8%,兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.001)(表2)。

    三、不同性別、年齡組患者耐藥情況

    在男性患者中,對RFP、INH、EMB、S、Ofx、Km的耐藥率及MDR、XDR率分別為15.0%、19.9%、8.8%、18.5%、8.8%、1.8%、11.4%和0.6%;在女性患者中,對應(yīng)耐藥率分別為17.4%、23.9%、13.0%、19.6%、7.2%、2.9%、14.5%和1.4%,兩者對各種藥物耐藥率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。在各年齡組中,僅INH和S各組耐藥率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),其余差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)(表3)。

    表2 初治、復(fù)治肺結(jié)核患者對抗結(jié)核藥物耐藥率的統(tǒng)計分析

    注表中括號外數(shù)值為耐藥例數(shù),括號內(nèi)數(shù)值為耐藥率(%)

    表3 不同性別和年齡對抗結(jié)核藥物耐藥率的統(tǒng)計分析

    注表中括號外數(shù)值為耐藥例數(shù),括號內(nèi)數(shù)值為耐藥率(%)

    討 論

    本研究表明江蘇省連云港市涂陽肺結(jié)核患者耐藥疫情比較嚴(yán)重,其中初治患者和復(fù)治患者耐藥率分別為20.9%和64.7%。2008—2010年在我國多個省份進(jìn)行的耐藥監(jiān)測結(jié)果顯示:初治患者耐藥率為15.4%~42.1%,復(fù)治患者耐藥率為27.5%~67.5%,其中在江蘇省的周邊省(直轄市)中,浙江省、山東省和上海市初治患者耐藥率分別為14.8%、17.6%和15.4%,復(fù)治患者耐藥率分別為59.3%、50.0%和27.5%[4-7]。在江蘇省內(nèi)多個地市進(jìn)行的研究表明,鎮(zhèn)江市初治患者和復(fù)治患者耐藥率分別為17.29%和56.75%[8],而蘇州市初治患者和復(fù)治患者耐藥率分別為25.3%和45.6%[9]。本研究中復(fù)治患者耐藥率高于江蘇省周邊省(直轄市)和省內(nèi)部分地區(qū)耐藥率,提示應(yīng)進(jìn)一步加強(qiáng)現(xiàn)代結(jié)核病控制策略,特別是在復(fù)治人群中。與上述任意耐藥情況相類似,本研究中發(fā)現(xiàn)連云港市初治患者中耐多藥率與全國平均水平相近,但是復(fù)治患者中耐多藥率明顯高于全國平均水平(25.6%)[2,9]。

    本研究中6種抗結(jié)核藥物的總耐藥率順位從高到低為INH、S、RFP、EMB、Ofx和Km。但是對于初治患者和復(fù)治患者,耐藥率順位有所不同,其中初治患者中S耐藥率最高,而復(fù)治患者中INH耐藥率最高,該結(jié)果與江蘇省鎮(zhèn)江市耐藥監(jiān)測結(jié)果相同,而與天津等地結(jié)果不同[8,10-12]。對于初治患者中S耐藥發(fā)生頻率最高可能是由于標(biāo)準(zhǔn)抗結(jié)核治療前的不規(guī)范使用S治療結(jié)核病或與其他病原微生物感染有關(guān),而復(fù)治患者中INH耐藥率最高,可能與結(jié)核分枝桿菌對INH的自然耐藥突變率較高有關(guān)。上述結(jié)果提示應(yīng)進(jìn)一步加強(qiáng)DOTS策略,不斷提高患者的依從性,使患者能夠完成整個督導(dǎo)化療過程,降低復(fù)治患者耐藥性的發(fā)生頻率。

    在患者耐藥譜分析中,本研究發(fā)現(xiàn)連云港市初治耐藥患者以單耐藥為主,而復(fù)治患者中則以多耐藥為主,說明連云港市初治患者的耐藥情況處于可控狀態(tài),但是復(fù)治患者耐藥情況卻不容樂觀,復(fù)治患者耐2種藥物以上者超過50%。由于二線抗結(jié)核藥物的療效較差且不良反應(yīng)嚴(yán)重,因此選擇適宜復(fù)治耐藥患者的化療方案難度增大,這部分多耐藥患者很有可能最終發(fā)展為耐多藥結(jié)核病患者。因此,加強(qiáng)對初治患者的管理,對于提高治愈率,降低耐藥率具有重要意義。此外,對于復(fù)治患者,應(yīng)當(dāng)在條件允許時,開展傳統(tǒng)藥敏試驗,特別是二線藥物的藥敏試驗,其結(jié)果對制定復(fù)治患者合理的化療方案具有重要意義。根據(jù)結(jié)核病防治“十二五”規(guī)劃,至2015年前,我國100%的地市級結(jié)核病實驗室將具備開展藥敏試驗的能力。實驗室能力的進(jìn)一步強(qiáng)化,對于規(guī)范耐藥肺結(jié)核患者的治療將起到至關(guān)重要的作用。

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