結(jié)核特異性抗原γ—干擾素釋放試驗(yàn)在診斷結(jié)核分枝桿菌感染的臨床研究

張青

【摘 要】目的：探討結(jié)核特異性抗原γ-干擾素釋放試驗(yàn)在診斷患者結(jié)核分枝桿菌感染的臨床應(yīng)用價(jià)值。方法：選取我所2011年3月-2012年10月確診的活動(dòng)性結(jié)核病患者58例，隱性結(jié)核組25例和健康對照組32例作為研究對象，進(jìn)行結(jié)核抗體檢測、結(jié)核菌素皮膚試驗(yàn)（TST）和γ-干擾素釋放試驗(yàn)（IGRA），比較分析三種不同方法檢測的陽性率。結(jié)果：在活動(dòng)性結(jié)核組中，IGRA的敏感性為89.667%，特異性為97.69%，結(jié)核抗體檢測、TST和IGRA檢測的陽性率分別為89.66%、53.45%和70.69 %，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，IGRA與其他兩種檢測方法比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）；在健康對照組和隱性結(jié)核組中的γ-干擾素釋放試驗(yàn)檢出率分別為3.13%和8%。結(jié)論：IGRA對結(jié)核分枝桿菌感染的診斷敏感、特異，是一種快速診斷結(jié)核感染的方法，且可對潛伏性結(jié)核感染患者起到輔助診斷作用。

【關(guān)鍵詞】結(jié)核分枝桿菌；γ-干擾素釋放試驗(yàn)；臨床研究

結(jié)核病是一種慢性傳染性疾病，在我國發(fā)病率極高，隨著人們生活水平的提高，衛(wèi)生狀況的改善，結(jié)核病群防群治的宣傳、兒童卡介苗的普遍接種預(yù)防和國家對結(jié)核病的免費(fèi)優(yōu)惠政策，結(jié)核病的發(fā)病率和死亡率有所下降，但因艾滋病、免疫抑制劑的使用、酗酒、人口流動(dòng)和貧困等原因，使結(jié)核病的發(fā)病率仍然較高[1]。據(jù)世衛(wèi)組織報(bào)道，我國每年新發(fā)病人100萬。目前我國有5.5億人感染結(jié)核，在一年里平均可以傳染10至15人[2]。因此，結(jié)核病的早期診斷、早期正規(guī)全程治療尤為重要，我所應(yīng)用IGRA檢測結(jié)核分支桿菌感染結(jié)核患者的早期診斷靈敏度高、特異性強(qiáng)，為臨床提供診斷依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院呼吸內(nèi)科2011年3月-2012年10月確診的活動(dòng)性結(jié)核病患者58例，其中結(jié)核性胸膜炎32例，肺結(jié)核26例，男19例，女13例，年齡范圍19-56歲；將我院25名醫(yī)護(hù)人員作為隱性結(jié)核組，男11例，女14例，年齡范圍24-57歲，將32名新兵體檢者作為健康對照組，男23名，女9名，年齡范圍18-25歲。以上研究對象經(jīng)檢測HIV均為陰性，均未使用免疫抑制劑。

1. 2 檢測方法與試劑（1）結(jié)核分枝桿菌干擾素試劑盒購自北京萬泰生物技術(shù)有限公司，結(jié)核分枝桿菌DNA采用熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)（FPCR）檢測，試劑盒購于北京普爾普樂生物技術(shù)有限公司；（2）結(jié)核抗體檢測膠體金法，試劑盒購于上海榮盛生物藥業(yè)有限公司；（3）結(jié)核菌素皮膚過敏試驗(yàn)，結(jié)核菌素為北京高科生命科學(xué)技術(shù)公司，PPDRT23 制劑，20個(gè)國際結(jié)素單位/mL。以上檢測方法均嚴(yán)格按照各自說明書進(jìn)行操作。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 用SPSS17. 0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，采用Χ2檢驗(yàn)， P<0. 05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 活動(dòng)性結(jié)核組的檢測結(jié)果 IGRA與結(jié)核抗體和TST的結(jié)果比較，IGRA檢測陽性率明顯比其他兩組陽性率高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=18.68，P<0.01，χ2=6.56，P<0.05）.見表1.

2.2 潛伏性結(jié)核感染檢測結(jié)果的比較 對隱性結(jié)核組和健康對照組進(jìn)行3種不同方法的檢測，IGRA的 陽 性 率 明 顯 低 于 結(jié) 核 抗體檢測和 TST，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）.見表2.

3 討論

我國結(jié)核病的疫情仍然嚴(yán)峻，嚴(yán)重危害著人類的健康，及早采取診斷、規(guī)范治療尤為重要。臨床上診斷結(jié)核采用的主要方法是根據(jù)臨床表現(xiàn)、影像學(xué)和病原學(xué)檢測，而臨床表現(xiàn)和影像學(xué)只能發(fā)現(xiàn)疑似結(jié)核，要進(jìn)一步確診還得需要病原學(xué)檢測，目前病原學(xué)的主要檢測方法有痰涂片分析、結(jié)核抗體檢測、TST、結(jié)核桿菌基因擴(kuò)增和結(jié)核桿菌培養(yǎng)等，以前3種方法診斷簡單、易操作、時(shí)間較短，已被廣泛應(yīng)用?，F(xiàn)在采用IGRA診斷結(jié)核在臨床上更具有特異性。

細(xì)胞介導(dǎo)免疫反應(yīng)是結(jié)核菌感染的主要免疫反應(yīng)，其作為細(xì)胞介導(dǎo)反應(yīng)的一部分，T淋巴細(xì)胞會(huì)被結(jié)核菌抗原致敏，而這些抗原再次受刺激時(shí)，致效應(yīng)T淋巴細(xì)胞活化，產(chǎn)生細(xì)胞因子γ干擾素[4]。而IGRA正好通過加入結(jié)核特異性抗原ESAT26和CFP210，在全血中通過抗原遞呈細(xì)胞，刺激特異性Th細(xì)胞產(chǎn)生IFN-γ，在37 ℃體外培養(yǎng)16～24h，然后檢測培養(yǎng)液中的IFN-γ含量，以此來判定體內(nèi)結(jié)核特異性T細(xì)胞應(yīng)答的強(qiáng)弱[3]，從而能夠間接判斷出結(jié)核分枝桿菌在體內(nèi)的感染狀況。

我們研究結(jié)果顯示，在活動(dòng)性結(jié)核組中，IGRA的敏感性為89.66%，特異性為97.69%，臨床許多資料也證實(shí)這一點(diǎn)[3-5]。IGRA檢測、結(jié)核抗體檢測和TST的陽性率分別為89.66%、53.45%和70.69%，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，IGRA與其他2種檢測方法比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05），證明IGRA應(yīng)用于檢測結(jié)核分枝桿菌感染操作簡便、檢測快速，是一種具有敏感性高、特異性強(qiáng)的診斷檢測方法。在健康研究組和隱性結(jié)核組中的γ-干擾素釋放試驗(yàn)檢出率分別為3.13%和8%， 結(jié)核抗體檢測和TST的陽性率明顯高于IGRA。但臨床資料分析顯示，結(jié)核抗體檢測和TST 不便于使隱性感染和發(fā)病患者區(qū)分開來[5]。雖然TST 的陽性率較高，但其容易受卡介苗或非結(jié)核分支桿菌感染等影響而出現(xiàn)假陽性[6]。而IGRA對隱性結(jié)核感染者的診斷和作為觀察指標(biāo)，可預(yù)測發(fā)展為活動(dòng)性結(jié)核發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。

總之，目前我國結(jié)核病發(fā)病仍然增高的趨勢下，為臨床及早診斷、早期足量全程治療提供依據(jù)，IGRA操作簡單易行，快速準(zhǔn)確，且對潛伏期結(jié)核感染者診斷起到輔助提示作用，值得推廣應(yīng)用的一種方法。

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