唐仁杰 鄒凱等
【摘要】 目的 研究葵花籽油對實(shí)驗(yàn)性胃粘膜損傷的保護(hù)作用。方法 制備小鼠吲哚美辛型胃粘膜損傷模型,測定胃粘膜損傷指數(shù)。結(jié)果 各實(shí)驗(yàn)組與對照組相比,粘膜損傷抑制率在吲哚美辛組分別為35.57%、48.08%和60.71%。各組差異均具有高度顯著性(P<0.01)。結(jié)論 葵花籽油對實(shí)驗(yàn)性胃粘膜損傷具有修復(fù)和保護(hù)作用。
【關(guān)鍵詞】 葵花籽油;胃粘膜損傷;吲哚美辛
doi:10.3969/j.issn.1004-7484(s).2013.08.155 文章編號(hào):1004-7484(2013)-08-4246-02
亞油酸(Linoleic acid,LA)是一種人體必需的多不飽和脂肪酸,是前列腺素E(Prostaglandin E,PGE)合成的前體物質(zhì),其在體內(nèi)作用十分廣泛[1]。近年來發(fā)現(xiàn),西方國家消化性潰瘍發(fā)生率下降與飲食中多不飽和脂肪酸攝入增加有關(guān)。Hinsdale等早已指出,前列腺素E缺乏是消化性潰瘍發(fā)生的重要因素之一,這正被多數(shù)臨床工作者所證實(shí)。葵花籽油中亞油酸含量在植物油中是最多的,含量在70%左右,基于此,本實(shí)驗(yàn)擬檢測葵花籽油對實(shí)驗(yàn)性胃粘膜損傷的實(shí)際作用效果,并與未進(jìn)行葵花籽油灌胃的小鼠作比較,從而為葵花籽油對實(shí)驗(yàn)性胃粘膜損傷的保護(hù)作用提供研究基礎(chǔ)。
1 資料與方法
1.1 材料
1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 昆明種小鼠(24±2)g,雌雄各半,川北醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心(川北醫(yī)學(xué)院準(zhǔn)字第01號(hào))提供。
1.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器 研缽、灌胃針、手術(shù)剪、解剖刀等(川北醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)室提供),顯微鏡測微尺(廣州明美光電技術(shù)有限公司),光學(xué)顯微鏡(上海滬三光學(xué)儀器廠),2S83-1內(nèi)切式組織勻漿機(jī)(浙西機(jī)械廠),AT225十萬分之一電子天平(瑞士METTLER公司)。
1.1.3 藥品試劑 葵花籽油購自新疆北屯油脂化工有限責(zé)任公司,品牌:金屯,含量為100%,生產(chǎn)許可證編號(hào)QS:654302010173;吲哚美辛(indomethacin):重慶科瑞制藥(集團(tuán))有限公司,批號(hào)511002;雷尼替?。≧anitidine):中諾藥業(yè)(石家莊)有限公司,批號(hào)120601;生理鹽水(NS):太極西南藥業(yè)股份有限公司,120920。
1.2 方法
1.2.1 預(yù)實(shí)驗(yàn) 隨機(jī)取12只小鼠,分為3組,按人劑量轉(zhuǎn)換為小鼠劑量,分別按轉(zhuǎn)換后劑量ig給藥(消炎痛),對照組ig給等量生理鹽水。給藥時(shí)間每隔5小時(shí),每組小鼠ig葵花籽油0.1ml/只,記錄24小時(shí)內(nèi)小鼠胃粘膜變化數(shù)據(jù)。預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,按人劑量轉(zhuǎn)換為小鼠劑量后,給藥組與對照組相比,有較明顯實(shí)驗(yàn)效果,遂可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
1.2.2 正式實(shí)驗(yàn) 分組與給藥昆明種小鼠60只,小鼠實(shí)驗(yàn)前禁食24小時(shí),自由飲水。隨機(jī)等分為3組,各組設(shè)實(shí)驗(yàn)組和對照組,通過預(yù)實(shí)驗(yàn),將ig消炎痛溶液量定為20mg/kg,然后分別灌胃葵花籽油,每次0.1ml。Ⅰ組在第6h灌胃葵花籽油1次;Ⅱ組在第6h和第12h分別灌胃葵花籽油各一次;Ⅲ組在第6h、第12h和第24h分別灌胃葵花籽油各一次。各對照組與實(shí)驗(yàn)組在相同時(shí)間灌胃生理鹽水0.1ml/次,所有小鼠給藥和NS前禁食5h,各組在末次灌胃48小時(shí)后處死動(dòng)物[2]。取出全胃觀察胃粘膜損傷程度。Ran陽性藥對照組100mg/kg。藥物均用NS配制,空白對照組、模型對照組給予NS,給藥容積0.1ml/10k。
1.2.3 觀察指標(biāo)和方法 小鼠胃粘膜損傷面積的測定:動(dòng)物處死后,取出全胃,并向胃內(nèi)注入10%甲醛2ml,置于同濃度甲醛中充分固定15min后,沿胃大彎剪開胃,用NS洗去胃上內(nèi)容物,展開并置于雙目體式鏡下觀察胃出血性病灶,并用測微尺計(jì)算胃粘膜損傷面積,以每只小鼠胃粘膜損傷面積(㎜2)的總和作為其損傷指數(shù),并計(jì)算胃粘膜損傷抑制率。胃粘膜損傷程度計(jì)算參照Guth等的標(biāo)準(zhǔn)改良評(píng)分,即依照粘膜損傷的程度計(jì)算,≤1㎜為1分,>1而<2㎜為2分,>2而≤3㎜為3分,依此類推,損傷寬度>1㎜時(shí),分?jǐn)?shù)乘以2,最后以全胃病灶分?jǐn)?shù)總和作為該動(dòng)物胃粘膜損傷指數(shù),并計(jì)算抑制率。
1.2.4 數(shù)據(jù)處理 數(shù)據(jù)以χ±s表示,組間數(shù)據(jù)采用t檢驗(yàn)。
2 結(jié) 果
2.1 葵花籽油對消炎痛致小鼠胃粘膜損傷的影響 小鼠灌胃給予消炎痛20mg/kg,由表1可見,各實(shí)驗(yàn)組胃粘膜損傷與對照組比較,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,t檢驗(yàn),P<0.01,差異具有高度顯著性,表明葵花籽油對小鼠胃粘膜損傷的模型具有明顯的保護(hù)作用。
通過實(shí)驗(yàn)標(biāo)本的觀察和數(shù)據(jù)分析,各實(shí)驗(yàn)組小鼠胃粘膜除少數(shù)動(dòng)物損傷較輕外,大多數(shù)無明顯粘膜糜爛和出血灶,僅在部分新鮮標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)幽門處粘膜充血腫脹。各對照組胃粘膜損傷較重,可見散在出血點(diǎn),嚴(yán)重?fù)p傷處,多數(shù)沿小血管走行分布,少數(shù)伴有深紅色凝血塊,胃粘膜皺襞粗糙,并偶見有粘膜皺襞變平、缺如,或有凹凸不連續(xù)。粘膜糜爛呈輕、中、重度,范圍較廣,有少數(shù)動(dòng)物損傷處已形成潰瘍面,浸潤至粘膜肌層,未見穿孔。此外,在解剖小鼠中,還觀察到損傷極重的動(dòng)物,其胃粘膜大面積壞死,胃腸道可見多處出血,甚至食道賁門處發(fā)現(xiàn)糜爛脫落。在實(shí)驗(yàn)進(jìn)行中,隨著ig葵花籽油和NS次數(shù)的增多,胃粘膜損傷逐漸減輕,各實(shí)驗(yàn)組損傷指數(shù)明顯低于對照組,在表1的Ⅱ、Ⅲ組給葵花籽油2次和3次的小鼠,多數(shù)胃粘膜只有點(diǎn)狀出血,或見小面積的粘膜糜爛等損傷。從而表明葵花籽油能促進(jìn)吲哚美辛引起小鼠胃粘膜損傷的修復(fù),并隨著給葵花籽油次數(shù)的增加,損傷的修復(fù)、愈合和保護(hù)作用越顯著。
3 討 論
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,消炎痛不僅抑制前列腺素生成,破壞胃粘膜屏障,還會(huì)顯著刺激胃酸分泌,加劇胃損害[3]。而富含LA的葵花籽油具有防止胃粘膜損傷作用,其機(jī)理可能與促進(jìn)胃內(nèi)PG合成有關(guān)。由于PG既有抗胃酸分泌,又有細(xì)胞保護(hù)作用。所以是一種較為理想的抗?jié)兯幬铩T跉W美多數(shù)國家早已被批準(zhǔn)在臨床上使用。消炎痛損傷胃粘膜引起出血和潰瘍的原因主要有兩種,一是直接侵害胃粘膜;二是影響胃的天然防御機(jī)制,阻斷前列腺素合成酶的作用,使胃粘膜內(nèi)源性前列腺素的生物合成減少,耗竭組織內(nèi)前列腺素的儲(chǔ)存,導(dǎo)致前列腺素的含量明顯降低,從而抑制了胃粘膜血液流動(dòng)和粘液的產(chǎn)生,使粘膜缺血,粘液含量減少,粘膜屏障作用降低,引起損傷[4]。
葵花籽油以其豐富的營養(yǎng)價(jià)值,深受人們喜愛,在國外被譽(yù)為保健佳品,高級(jí)營養(yǎng)油或健康油等,其豐富的亞油酸,使其在食用油家族中,特點(diǎn)鮮明。本研究通過應(yīng)用小鼠消炎痛型胃粘膜損傷模型證實(shí),葵花籽油確實(shí)具有較顯著的胃粘膜保護(hù)作用。因此,通過葵花籽油配對上述動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)研究,將會(huì)為人們在飲食習(xí)慣方面提供一些參考,使生活品質(zhì)得到進(jìn)一步提高。近年來,高益槐教授的專著也闡述了中藥對消化系統(tǒng)疾病能有效治療作用[5],為我國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)走向世界做出了巨大貢獻(xiàn),同時(shí),也為我們的研究提供了更廣闊的思路。
我們認(rèn)為:
3.1 葵花籽油中的亞油酸可通過轉(zhuǎn)化使前列腺素的含量升高,從而使受損傷的胃粘膜得到修復(fù)、愈合和保護(hù)。
3.2 葵花籽油入胃后,附著于粘膜損傷處,發(fā)揮粘膜屏障作用,防止胃酸及食物的不良刺激,從而有利于胃粘膜損傷的修復(fù)。但其抗損傷具體機(jī)制及其轉(zhuǎn)化為前列腺素具體時(shí)間和消失時(shí)間還需進(jìn)一步探討。通過本次實(shí)驗(yàn),可以設(shè)想,了解胃粘膜中LA含量的變化將有助于潰瘍病的治療和預(yù)防,對降低消化性潰瘍的發(fā)病率及復(fù)發(fā)率可能會(huì)起到一定的作用。
參考文獻(xiàn)
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