組織激肽釋放酶與缺血性腦卒中嚴(yán)重程度的相關(guān)性研究

馮 忠，汪立松，王希佳

組織激肽釋放酶(tissue kallikrein，TK)是一類絲氨酸蛋白酶，是組織型激肽釋放酶-激肽/緩激肽系統(tǒng)中的一個(gè)關(guān)鍵酶[1]。研究表明TK具有保護(hù)心腦血管作用[2]。我國一項(xiàng)12家醫(yī)院聯(lián)合的多中心、長達(dá)5年隨訪的前瞻性研究表明，TK與腦卒中的新發(fā)及再發(fā)均呈負(fù)相關(guān)[3]。然而TK與缺血性腦卒中(cerebral ischemic stroke，CIS)嚴(yán)重程度有無關(guān)系的研究較少。本研究探討TK與CIS患者嚴(yán)重程度的關(guān)系，并進(jìn)一步探討TK在臨床中的應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2009年5月—2012年5月在我院神經(jīng)內(nèi)科就診的324例CIS患者為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)CIS診斷參照《各類腦血管病診斷要點(diǎn)》[4]，均經(jīng)顱腦CT或MRI檢查明確診斷；(2)發(fā)病至就診時(shí)間<72 h；(3)未經(jīng)任何治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：腎功能不全、心源性腦梗死、嚴(yán)重炎性疾病、自身免疫性疾病、血液病、腫瘤及其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病者。根據(jù)美國國立衛(wèi)生研究院卒中量表評分(NIHSS)將患者分為兩組，其中NIHSS≤12分組238例，男136例、女102例，年齡43～73歲、平均(62.8±6.2)歲，病程1～62 h、平均(12.5±2.2)h，使用血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑(ACEI)62例(26.05%)；NIHSS>12分組86例，男51例、女35例，年齡41～74歲、平均(63.1±6.4)歲，病程1～57 h、平均(12.2±1.9)h，使用ACEI 20例(23.26%)。兩組性別、年齡及使用ACEI比例具有均衡性。

1.2 方法 詳細(xì)記錄符合入選標(biāo)準(zhǔn)患者的姓名、年齡、性別、病史、個(gè)人史、NIHSS等情況。測量體質(zhì)量、身高，計(jì)算體質(zhì)指數(shù)。兩組患者均禁食12 h后清晨空腹采血，測定其血脂、肝腎功能及TK水平。其中血脂、肝腎功能采用奧林巴斯全自動生化分析儀檢測；TK采用生物素-親和素雙抗體夾心ELISA法檢測，具體方法參照張琴等[5]研究。

2 結(jié)果

2.1 不同程度CIS患者影響因素的單因素分析 NIHSS>12分組TK水平低于NIHSS≤12分組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；NIHSS>12分組膽固醇、三酰甘油水平高于NIHSS≤12分組，差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；兩組的年齡、男性比例、高血壓史發(fā)生率、糖尿病史發(fā)生率、吸煙率、飲酒率及體質(zhì)指數(shù)比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05，見表1)。

2.2 NIHSS與CIS影響因素的相關(guān)性分析 NIHSS與TK呈負(fù)相關(guān)(r=-0.425，P=0.038)；NIHSS與膽固醇(r=0.356，P<0.01)、三酰甘油(r=0.277，P<0.01)均呈正相關(guān)。

2.3 CIS嚴(yán)重程度影響因素的多元回歸分析 以NIHSS為應(yīng)變量，TK、膽固醇、三酰甘油水平為自變量，進(jìn)行多元線性回歸分析，結(jié)果顯示TK水平與CIS嚴(yán)重程度呈負(fù)相關(guān)；膽固醇、三酰甘油水平與CIS嚴(yán)重程度呈正相關(guān)(見表2)。

表1 不同程度CIS患者影響因素的單因素分析

注：NIHSS=美國國立衛(wèi)生研究院卒中量表評分，TK=組織激肽釋放酶；*為χ2值

表2 CIS嚴(yán)重程度影響因素的多元回歸分析

Table2 The multiple regression analysis on influencing factor of severity of CIS

變量b標(biāo)準(zhǔn)誤b't值P值TK-0.7350.954-0.596-0.8610.021膽固醇1.1021.3531.1123.2210.036三酰甘油1.1161.5211.2314.2160.042

3 討論

我國每年有150萬～200萬新發(fā)腦卒中病例，發(fā)病率為(116～219)/10萬人口，年腦卒中死亡率為(58～142)/10萬人口。目前我國有腦血管病患者700余萬人，其中約70%為CIS，加強(qiáng)腦卒中患者的臨床研究是具有重要臨床意義的課題。盡管目前研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)CIS與高血壓、糖尿病、脂代謝紊亂、肥胖、吸煙、飲酒、性別等因素有關(guān)，然而這些因素只能解釋部分患者，因此，尋找新的CIS發(fā)病相關(guān)指標(biāo)具有重要的臨床意義。已有大量基礎(chǔ)研究證實(shí)TK具有神經(jīng)保護(hù)作用[6]，然而其與CIS嚴(yán)重程度有無關(guān)系尚缺乏研究。

NIHSS是包括15個(gè)項(xiàng)目的神經(jīng)功能檢查量表，包含每個(gè)主要腦動脈病變可能出現(xiàn)的神經(jīng)系統(tǒng)檢查項(xiàng)目(如視野評測大腦后動脈梗死)，可反應(yīng)腦卒中神經(jīng)功能障礙嚴(yán)重程度[7]。本研究提示，NIHSS>12分組TK水平低于NIHSS≤12分組，為排除混雜因素影響，進(jìn)一步進(jìn)行相關(guān)分析和多元回歸分析，均顯示TK水平與NIHSS呈負(fù)相關(guān)，表明TK水平可以反映CIS患者的病情嚴(yán)重程度，這是本研究的新發(fā)現(xiàn)。TK是1930年由Kraut等在胰腺中發(fā)現(xiàn)高濃度此物質(zhì)，命名為“Kallikrein”。近30年來，隨著分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用，發(fā)現(xiàn)激肽釋放酶——激肽系統(tǒng)(kallikrein kinin system，KKS)作為一個(gè)復(fù)雜的內(nèi)源性多酶系統(tǒng)，參與調(diào)控心血管、腎臟、神經(jīng)系統(tǒng)等的生理功能，與腦卒中、心臟病、腎病、炎癥反應(yīng)、癌癥等疾病的發(fā)生有著密切關(guān)系?；A(chǔ)研究表明組織型激肽釋放酶——激肽/緩激肽系統(tǒng)具有抗血管損傷和預(yù)防腦卒中的作用[6]。TK可以減少局灶性腦缺血大鼠模型缺血誘導(dǎo)的神經(jīng)缺陷和腦梗死體積，抑制神經(jīng)細(xì)胞凋亡[1]。在高血壓大鼠發(fā)生腦梗死24 h后給予TK的治療仍然能夠促進(jìn)成神經(jīng)細(xì)胞的增殖、遷移和選擇性分化[8]。這些研究均提示了KKS可能具有腦卒中的防護(hù)作用。然而，TK與CIS患者病情嚴(yán)重程度是否相關(guān)既往報(bào)道較少。TK與CIS患者病情嚴(yán)重程度有關(guān)的可能原因在于[1-3，6，8]：(1)TK可以擴(kuò)張腦動脈，改善缺血腦組織的血供和氧供；(2)TK可促進(jìn)缺血腦新血管和神經(jīng)形成；(3)TK可促進(jìn)神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞遷移，抑制細(xì)胞凋亡，減少炎癥細(xì)胞浸潤；(4)TK可拮抗血管損傷，抑制動脈肥厚；(5)TK可以抑制氧化應(yīng)激、細(xì)胞凋亡和炎癥反應(yīng)。Zhang等[3]對1 268例腦卒中患者進(jìn)行長達(dá)5年的隨訪，發(fā)現(xiàn)TK不僅與腦卒中發(fā)生有關(guān)，且與二次卒中顯著相關(guān)，認(rèn)為是腦卒中的保護(hù)因子，本研究與其結(jié)論相似，但本研究重在探討TK與CIS嚴(yán)重程度的關(guān)系。與既往研究[9-11]相似，本研究也發(fā)現(xiàn)膽固醇、三酰甘油水平與CIS患者病情嚴(yán)重程度相關(guān)。姬莉等[12]研究表明腦卒中急性期血糖水平越高，其病情越嚴(yán)重。但本研究并未發(fā)現(xiàn)CIS患者病情嚴(yán)重程度與糖尿病有關(guān)，可能與本研究入組患者并非全部為急性期患者有關(guān)。

綜上所述，本研究提示CIS患者TK水平下降，TK水平越低，CIS病情越嚴(yán)重。然而，本研究為單中心研究，病例數(shù)不多，尚需大樣本、多中心研究進(jìn)一步證實(shí)。

1 Wang YD，Lu RY，Huang XX，et al.Human tissue kallikrein promoted activation of the ipsilesional sensorimotor cortex after acute cerebral infarction[J].Eur Neurol，2011，65(4)：208-214.

2 Liu L，Zhang R，Liu K，et al.Tissue kallikrein alleviates glutamate-induced neurotoxicity by activating ERK1[J].J Neurosci Res，2009，87(16)：3576-3590.

3 Zhang Q，Ding H，Yan J，et al.Plasma tissue kallikrein level is negatively associated with incident and recurrent stroke：a multicenter case-control study in China[J].Ann Neurol，2011，70(2)：265-273.

4 章永強(qiáng)，袁芬芬，應(yīng)小衛(wèi)，等.血尿酸和膽紅素及血脂水平與缺血性腦卒中的相關(guān)關(guān)系研究[J].中國全科醫(yī)學(xué)，2011，14(4)：1178-1180.

5 張琴，冉曉，汪道文.社區(qū)人群中血漿人組織激肽釋放酶含量與血脂的關(guān)系[J].中國分子心臟病學(xué)雜志，2010，10(1)：57-60.

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