MicroRNAs在消化道疾病中的作用研究進(jìn)展

于蘭，楊云生

MicroRNAs(miRNAs)是一類長度為18～24個(gè)核苷酸的非編碼單鏈小分子RNA，廣泛存在于植物和動(dòng)物中，主要參與基因轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)控。目前研究發(fā)現(xiàn)miRNAs通過與靶基因3'非翻譯區(qū)(3'UTR)的完全或不完全配對，降解靶基因mRNA或抑制其翻譯，從而影響細(xì)胞和組織的功能[1]。繼1993年在果蠅中發(fā)現(xiàn)第一個(gè)miRNA以來，miRNAs被發(fā)現(xiàn)廣泛存在于各個(gè)物種中，截止到2013年3月，發(fā)現(xiàn)的miRNAs總數(shù)已達(dá)21 264種，其中成熟的人類miRNAs已達(dá)2216種(www.mirbase.org)。大量研究表明，miRNAs參與了包括細(xì)胞分裂、增殖、分化，個(gè)體發(fā)育以及代謝等許多重要的生物學(xué)過程[2]。miRNAs的差異表達(dá)不僅可能與消化道腫瘤的發(fā)生、復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移及預(yù)后有關(guān)，在一些消化道良性疾病如腸易激綜合征及炎癥性腸病等的發(fā)生發(fā)展中也起著重要作用。本文主要探討miRNAs在消化道疾病方面的作用研究進(jìn)展，并探討值得關(guān)注的研究方向。

1 miRNAs的形成及調(diào)控機(jī)制

miRNAs由具有發(fā)夾結(jié)構(gòu)的70～90個(gè)堿基的單鏈RNA前體經(jīng)過Dicer酶加工后形成。成熟miRNA的生物合成過程包括：經(jīng)RNA聚合酶Ⅱ起始轉(zhuǎn)錄為原始miRNA；經(jīng)RNA酶Ⅲ Drosha和DGCR8剪切為約65個(gè)核苷酸的pre-miRNA；由胞核運(yùn)送至胞質(zhì)后被RNA酶Ⅲ Dicer進(jìn)一步剪切為21～23個(gè)核苷酸的雙鏈mtRNA。雙鏈miRNA分子被解鏈后，單鏈miRNA進(jìn)入核糖蛋白復(fù)合體miRNP(RISC)，之后再通過與靶基因3'UTR互補(bǔ)配對，指導(dǎo)miRNA復(fù)合體對靶基因mRNA進(jìn)行切割或翻譯抑制[3]。目前研究表明，每個(gè)miRNA可通過多個(gè)結(jié)合位點(diǎn)調(diào)節(jié)多個(gè)靶mRNAs，每個(gè)基因也受到多個(gè)miRNAs的調(diào)控[4]。miRNAs的表達(dá)模式具有高度保守性、時(shí)序性和組織特異性，在不同組織、不同發(fā)育階段中表達(dá)水平有顯著差異，是調(diào)控其他功能基因表達(dá)的重要分子。

2 miRNAs在消化道疾病中的作用

2.1 miRNAs與食管癌 食管癌分為食管腺癌(esophageal adenocarcinoma，EAC)和食管鱗狀細(xì)胞癌(esophageal squamous cancer，ESCC)。Barrett食管(Barrett's sesophagus，BE)是公認(rèn)的EAC的癌前病變，研究發(fā)現(xiàn)BE患者發(fā)生EAC的概率是正常人的30倍[5]。目前研究表明在正常食管、BE及EAC的發(fā)展過程中存在不同的miRNAs表達(dá)譜。Feber等[6]的研究指出miR-21、miR-192、miR-193、miR-194在正常食管、BE和EAC組織中表達(dá)依次升高。Yang等[7]的研究也指出在BE發(fā)展為EAC的過程中存在miRNAs的差異表達(dá)，其中從低級別不典型增生到高級別不典型增生的過程中miR-200a*、miR-513、miR-125b、miR-101和miR-197表達(dá)升高，miR-23b、miR-20b、miR-181b、miR-203、miR-193b、miR-636表達(dá)降低，在高級別不典型增生到EAC的過程中7種miRNAs表達(dá)降低，包括let-7b、let-7a、let-7c、miR-345、miR-494和miR-193a。有報(bào)道指出miR-196a在正常食管組織-不典型增生-EAC的過程中表達(dá)依次增加，且驗(yàn)證了其通過調(diào)控靶基因ANXA1、SPRR2C、S1009和KRT5調(diào)控EAC細(xì)胞的凋亡。

miRNAs不僅和EAC患者的疾病程度相關(guān)，也和患者的預(yù)后相關(guān)。Mathe等[8]和Feber等[9]的研究指出，EAC細(xì)胞中miR-99b、miR-199a升高且和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。另一項(xiàng)研究指出miR-30e、miR200a與EAC患者的生存率相關(guān)，且miR-30e表達(dá)升高的患者術(shù)后復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)增加了2.5倍，該研究還指出miR-126升高也與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)[10]。Hummel等[11]的研究指出，EAC組織中miR-21升高，且和局部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，并指出miR-148和EAC的分化呈負(fù)相關(guān)，miR-148的過表達(dá)提高了EAC細(xì)胞對順鉑和5-氟尿嘧啶的敏感性。上述研究結(jié)果提示miRNAs不僅可以作為診斷EAC的分子學(xué)標(biāo)志，還有可能為進(jìn)一步的靶向治療提供分子學(xué)基礎(chǔ)。

ESCC是食管癌中最常見的病理類型，目前的研究表明ESCC中存在多種miRNAs差異表達(dá)。Feber等[12]的研究指出miR-21、miR-93、miR-192、miR-194在ESCC組織中表達(dá)升高。另一項(xiàng)研究也證實(shí)miR-21、miR205在ESCC中表達(dá)升高，且miR-21的過表達(dá)通過抑制靶基因PTEN、PDCD4促進(jìn)食管鱗癌細(xì)胞的生長[13]。Ogawa等[14]的研究指出miR-23a、miR-26a、miR-27b、miR-96、miR-128b和miR-129在ESCC中升高且和預(yù)后相關(guān)，其中miR-129升高的患者術(shù)后預(yù)后較差。研究表明，miR-203和miR-205在ESCC中降低，miR-27b、miR-125b、miR-100在ESCC及EAC中均降低[15]。另外還有研究證實(shí)miR-203、miR210在ESCC中表達(dá)下調(diào)，且miR-203和原癌基因ΔNP63、miR-210和原癌基因FGFRL1之間存在靶向調(diào)控關(guān)系，ΔNP63和FGFRL1的表達(dá)上調(diào)可促進(jìn)食管鱗癌細(xì)胞的增殖[16]。

miRNAs的差異表達(dá)與ESCC患者的轉(zhuǎn)移和預(yù)后相關(guān)。Hamano等[17]的研究指出，miR-21和miR-200c與ESCC患者的預(yù)后相關(guān)，癌旁食管黏膜中miR-21升高的患者預(yù)后較差，同時(shí)該研究還發(fā)現(xiàn)miR-200c通過抑制其靶基因PPP2R1B降低ESCC患者對化療藥物的敏感性。Akagi等[18]的研究也證實(shí)ESCC組織中miR-21的表達(dá)升高并與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。miR-103、miR-107、miR-296在ESCC中的過表達(dá)與患者的預(yù)后呈負(fù)相關(guān)，并且miR-296和化療藥物耐藥相關(guān)[19]。研究表明，ESCC組織中miR-143和miR-145表達(dá)下調(diào)并與腫瘤的轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān)，Kano等[20]的研究進(jìn)一步證實(shí)miR-145的靶基因?yàn)镕SCN，該基因表達(dá)升高可抑制腫瘤細(xì)胞的生長和侵襲，從而起到保護(hù)作用，此外，miR-145還與ESCC患者的生存率呈負(fù)相關(guān)。

2.2 miRNAs與胃癌 胃癌是一種多基因疾病，其發(fā)生發(fā)展是一個(gè)多步驟參與、多種相關(guān)基因失活的結(jié)果。一些miRNAs具有促細(xì)胞增殖、抑制細(xì)胞凋亡的作用。目前研究較多且作用機(jī)制較明確的是miR-21，其與胃癌的發(fā)生、發(fā)展以及預(yù)后有著密切聯(lián)系。目前研究發(fā)現(xiàn)，人類胃癌組織中miR-21呈明顯的高表達(dá)，且miR-21在幽門螺桿菌(Hp)感染的胃黏膜中也存在明顯高表達(dá)[21]，提示胃癌組織中miR-21的高表達(dá)可能部分與Hp感染有關(guān)。miR-21的過度表達(dá)可明顯增強(qiáng)人類胃癌AGS細(xì)胞系的增殖和侵襲力，而通過抑制劑沉默miR-21可導(dǎo)致細(xì)胞增殖明顯減少，凋亡明顯增加。目前的研究表明，凋亡相關(guān)基因PDCD4是miR-21的靶基因，miR-21通過對PDCD4基因的翻譯抑制實(shí)現(xiàn)其致癌作用[22]。Jin等[23]的研究表明，胃癌組織中miR-192和miR-215表達(dá)明顯上調(diào)。胃癌中miR-372表達(dá)上調(diào)，并通過降低靶基因LASTS2的表達(dá)來調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖和凋亡[24]。Zhang等[25]的研究發(fā)現(xiàn)胃癌中miR-650表達(dá)上調(diào)，并抑制其靶基因ING4的表達(dá)，促進(jìn)了腫瘤的發(fā)生，為胃癌的分子靶基因治療提供了可能的分子基礎(chǔ)。此外miR-106表達(dá)上調(diào)在胃癌細(xì)胞系中得到了證實(shí)，其水平與腫瘤分期、大小、分化程度、淋巴結(jié)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、侵襲等密切相關(guān)。

miRNAs既可作為致癌基因也可作為抑癌基因在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮作用。Guo等[26]的研究發(fā)現(xiàn)miRNA-331-3p可直接作用于細(xì)胞周期相關(guān)因子E2F1，導(dǎo)致人類胃癌細(xì)胞生長停滯，故有可能作為一個(gè)有潛力的抑癌基因，在胃癌治療中發(fā)揮作用。miR-141是miR-200家族的成員，已被報(bào)道與多種人類惡性疾病相關(guān)。研究表明，miR-141在胃癌組織中表達(dá)明顯降低，而miR-141及其前體過表達(dá)可顯著抑制胃癌細(xì)胞的增殖，提示在胃癌的發(fā)生機(jī)制中miR-141可能作為抑癌基因發(fā)揮對細(xì)胞增殖的抑制作用[27]。研究發(fā)現(xiàn)，在胃癌組織中低表達(dá)的miR-622可通過靶向調(diào)控生長抑制因子ING1促進(jìn)胃癌細(xì)胞的侵襲與腫瘤的轉(zhuǎn)移[28]。

2.3 miRNAs與腸易激綜合征 腸易激綜合征(irritable bowel syndrome，IBS)是以腹痛或腹部不適，伴有大便性狀改變和排便習(xí)慣改變?yōu)樘卣鞯墓δ苄阅c道疾病，是消化科的常見病。目前關(guān)于miRNAs在IBS發(fā)病機(jī)制中作用的研究很少。2008年，Kapeller等[29]首先報(bào)道了miRNA通過調(diào)節(jié)5-HT受體基因的表達(dá)參與腹瀉型腸易激綜合征(IBS-D)的發(fā)生。真正闡明miRNA如何通過調(diào)控基因表達(dá)參與IBS發(fā)生的是2009年Zhou等[30]的研究。該研究發(fā)現(xiàn)，與健康人群相比，腸道通透性升高的IBS-D患者外周血微泡、小腸和結(jié)腸黏膜組織中的miR-29a表達(dá)均升高，體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)證實(shí)谷氨酰胺合成酶基因(GLUL)是miR-29a的靶基因，miR-29a通過負(fù)調(diào)節(jié)谷氨酰胺合成酶的表達(dá)而導(dǎo)致谷氨酰胺合成減少，從而增加腸道黏膜通透性，進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)表明沉默miR-29a或補(bǔ)充谷氨酰胺均可改善腸道細(xì)胞的通透性，從而為IBS-D的治療提供了新的靶標(biāo)。以上研究提示miRNAs可通過調(diào)節(jié)IBS病理生理過程中某些基因的表達(dá)從而參與其發(fā)生，所以，尋找IBS相關(guān)的miRNAs可能為其診斷和治療提供有力工具。

2.4 miRNAs與炎癥性腸病 炎癥性腸病(inflammatory bowel disease，IBD)主要包括潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis，UC)和克羅恩病(Crohn's disease，CD)，是一類以結(jié)直腸黏膜及黏膜下層非特異性炎癥為特征的疾病。miRNAs可通過影響下游炎癥因子的分泌或參與免疫系統(tǒng)的發(fā)育和分化過程，參與慢性炎癥反應(yīng)的發(fā)生和發(fā)展。近年研究發(fā)現(xiàn)，IBD患者腸黏膜組織、血液、糞便中均存在多種miRNAs表達(dá)異常，且與疾病活動(dòng)度、病變部位等相關(guān)。2008年，Wu等[31]通過miRNAs芯片首次報(bào)道了UC、CD、IBS患者結(jié)腸黏膜中miRNAs的表達(dá)情況，并與正常人結(jié)腸黏膜進(jìn)行比較，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在活動(dòng)性UC患者結(jié)腸黏膜中miR-192、miR-375、miR-422b表達(dá)明顯下降，miR-16、miR-21、miR-23a、miR-24、miR-29a、miR-126、miR-195和let-7f表達(dá)明顯上升。體外研究還發(fā)現(xiàn)，TNF-α可誘導(dǎo)miR-192表達(dá)下降，并使其靶基因——巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-2α(MIP-2α)表達(dá)上調(diào)，促進(jìn)炎癥過程的發(fā)生。該研究小組進(jìn)一步比較了活動(dòng)性UC和非活動(dòng)性UC患者外周血中的miRNAs，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，miR-199a-5p、miR-28-5p、miR-151-5p、miR-340*和miRplus-E1271在活動(dòng)性UC患者外周血中表達(dá)升高，miR-103-2*、miR-532-3p、miR-362-3p在活動(dòng)性和非活動(dòng)性UC中均升高，而miR-505*表達(dá)均下降。miRNAs在靜止期IBD患者中仍有變化，表明其在IBD病程的各階段均發(fā)揮重要作用[32]。

2010年先后有3項(xiàng)研究報(bào)道了IBD患者結(jié)腸黏膜中miRNAs的差異表達(dá)，但未進(jìn)行相應(yīng)的功能分析[33-35]。Takagi等[33]研究發(fā)現(xiàn)miR-21和miR-155在活動(dòng)性UC患者結(jié)腸黏膜中表達(dá)明顯升高。既往對其他疾病的研究發(fā)現(xiàn)，miR-21可作為診斷早期癌癥的標(biāo)志物，miR-155在炎癥、免疫反應(yīng)中發(fā)揮重要作用。因此研究者推測在活動(dòng)性UC中，miR-21和miR-155可能參與了腸道黏膜的炎癥和免疫反應(yīng)。Wu等[34]用miRNAs芯片檢測了結(jié)腸CD及回腸末端CD中467個(gè)miRNAs的表達(dá)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)5種miRNAs(miR-19b、miR-629、miR-23b、miR-106a、miR191)在結(jié)腸CD中明顯升高，4種miRNAs(miR-16、miR-21、miR-223、miR-594)在回腸末端CD中升高。Fasseu等[35]應(yīng)用RT-PCR法對UC和CD患者結(jié)腸黏膜進(jìn)行了miRNAs檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)8種miRNAs(miR-26a、miR-29a、miR-29b、miR-30c、miR-126*、miR-127-3p、miR-196a和miR-324-3p)在UC和CD中均升高。以上結(jié)果表明miRNAs在IBD的各亞型中表達(dá)存在明顯差異，可能通過影響炎癥相關(guān)基因的表達(dá)參與IBD的發(fā)生。

近年來還有一些研究著眼于IBD患者結(jié)腸黏膜中miRNAs與其相應(yīng)的靶基因之間的關(guān)系。Bian等[36]研究發(fā)現(xiàn)UC患者及硫酸葡聚糖鈉鹽(dextran sulphate sodium，DSS)誘導(dǎo)的小鼠急性UC模型中，結(jié)腸黏膜miR-150明顯升高，轉(zhuǎn)錄因子c-Myb明顯降低，并進(jìn)一步證實(shí)了c-Myb為miR-150的靶基因，miR-150通過負(fù)調(diào)控c-Myb減少抗凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá)，從而誘導(dǎo)結(jié)腸上皮凋亡。Nguyen等[37]證實(shí)CD結(jié)腸黏膜中miR-7降低，CD98升高，并進(jìn)一步證實(shí)CD98為miR-7的靶基因，CD98的分泌失調(diào)會引起腸道上皮細(xì)胞的增殖和分化異常。Pekow等[38]證實(shí)在UC患者結(jié)腸黏膜中miR-143表達(dá)下調(diào)且與原癌基因K-RAS存在負(fù)性調(diào)控關(guān)系，由此推測miR-143在IBD患者炎癥發(fā)生及腫瘤形成方面起到了重要的調(diào)控作用。這些研究為闡明IBD的發(fā)病機(jī)制提供了新的病理生理學(xué)機(jī)制，同時(shí)也為未來治療提供了新的靶點(diǎn)。

2.5 miRNAs與大腸癌 miRNAs的表達(dá)異常會導(dǎo)致靶基因表達(dá)發(fā)生改變，進(jìn)而引起相應(yīng)蛋白質(zhì)的差異表達(dá)，據(jù)統(tǒng)計(jì)miRNAs調(diào)控了超過30%的蛋白質(zhì)基因編碼[39]。研究表明，miRNAs參與了細(xì)胞分化、增殖和凋亡等病理生理過程，miRNAs的表達(dá)下調(diào)會導(dǎo)致相應(yīng)的原癌基因表達(dá)上調(diào)，同樣其表達(dá)上調(diào)會導(dǎo)致相應(yīng)的抑癌基因表達(dá)下調(diào)。2002年Calin等[40]首次報(bào)道了miRNAs和腫瘤之間的聯(lián)系，他們發(fā)現(xiàn)miRNAs頻繁地出現(xiàn)在腫瘤相關(guān)基因區(qū)域或脆性位點(diǎn)上，起到類似癌基因或抑癌基因的作用。2003年Michael等[41]首次報(bào)道了人結(jié)直腸癌組織和正常黏膜中miRNAs的差異表達(dá)，他們發(fā)現(xiàn)與正常黏膜組織相比，結(jié)直腸癌組織中miR-143和miR-145表達(dá)下調(diào)，將miR-143和miR-145轉(zhuǎn)染入癌細(xì)胞后，癌細(xì)胞的生長可受到明顯抑制。上述實(shí)驗(yàn)表明，這兩種miRNAs是參與結(jié)腸腫瘤發(fā)生的重要因子，具有類似于抑癌基因的作用。此后有關(guān)結(jié)直腸癌中miRNAs的表達(dá)成為研究熱點(diǎn)，僅2012年P(guān)ubMed上收錄的相關(guān)報(bào)道已達(dá)到100余篇，這些研究大部分集中在結(jié)直腸癌中miRNAs的差異表達(dá)，以及miRNAs通過調(diào)控相應(yīng)靶基因在結(jié)直腸癌中所起的作用這兩方面。

目前的研究表明，在結(jié)腸癌患者的組織、血漿及糞便中存在多種miRNAs表達(dá)異常，表達(dá)上調(diào)的有170余種，其中有關(guān)miR-21、miR-31、miR-92、miR-135b、miR-221、miR-222的報(bào)道較多，表達(dá)下調(diào)的有127余種，其中有關(guān)miR-145、miR-143、miR-1、miR-195的報(bào)道較多[42]。

Wang等[43]的研究表明，miR-21在結(jié)腸癌患者血漿中升高且在其他腫瘤如乳腺癌、食管癌、胃癌、肺癌中也升高。在最近的一項(xiàng)報(bào)道中，研究人員對380種miRNAs進(jìn)行了分析，發(fā)現(xiàn)只有miR-21可以作為區(qū)分結(jié)腸癌患者和正常人的血清標(biāo)志物，具有90%的靈敏度和高特異性[44]。miR-31在結(jié)直腸癌組織中表達(dá)上調(diào)，且其表達(dá)水平與患者的臨床分期有關(guān)[45]。Ng等[46]對大腸癌患者進(jìn)行了95種miRNAs芯片分析，結(jié)果顯示，5種miRNAs(miR-17-3P、miR-92、miR-95、miR-135b、miR-222)在大腸癌患者組織和血漿中表達(dá)均增強(qiáng)，進(jìn)一步RT-PCR證實(shí)其中miR-17-3p和miR-92的升高最為明顯，其中10例大腸癌患者術(shù)后miR-17-3p和miR-92的血漿水平明顯降低。對另一組90例大腸癌、20例胃癌、20例炎癥性腸病和50例健康對照的血漿樣本進(jìn)一步驗(yàn)證，結(jié)果提示根據(jù)miR-92的表達(dá)水平可以區(qū)分大腸癌和胃癌、炎癥性腸病及正常人，敏感性89%，特異性70%。此后的研究也證實(shí)miR-92a及miR-21在大腸癌患者的糞便中表達(dá)明顯升高，根據(jù)糞便中miR-92a表達(dá)水平診斷結(jié)直腸癌的敏感性為72%，特異性為73%，且miR-92a和KARS基因突變相關(guān)[47-48]。因此，miR-92可能成為檢測大腸癌的無創(chuàng)性分子診斷標(biāo)志物。同時(shí)也有研究證實(shí)結(jié)腸癌患者糞便中miR-143、miR-145表達(dá)下調(diào)，因此檢測糞便中兩者的濃度可作為鑒別腫瘤和正常人的無創(chuàng)生物學(xué)指標(biāo)[49]。Faltejskova等[50]對大腸癌組織及癌旁組織進(jìn)行了667種miRNAs芯片分析，結(jié)果顯示其中42種miRNAs存在差異表達(dá)，進(jìn)一步RT-PCR證實(shí)其中miR-215、miR-375、miR-378和miR-422a明顯下調(diào)，且miR-215及miR-422a與臨床分期相關(guān)。Wang等[51]的研究指出，結(jié)腸癌患者血漿中有22種miRNAs表達(dá)下調(diào)，其中miR-601和miR-760較正常人低，兩者聯(lián)合檢測診斷結(jié)腸癌的敏感性為83.3%，特異性為69.1%。上述研究表明miRNAs有望成為診斷大腸癌的生物學(xué)指標(biāo)。

此外，還有一些研究著重于探討miRNAs與其相應(yīng)的靶基因在大腸癌中的作用機(jī)制。目前一些miRNAs與其靶基因在結(jié)直腸癌中的靶向調(diào)控關(guān)系已經(jīng)得到了明確驗(yàn)證，如miR-21和其靶基因PETN、PDCD4、SPRY2，miR-135b和其靶基因APC，miR-101和其靶基因COX-2等。但這僅僅是miRNAs復(fù)雜而龐大家族中的極小部分，大部分miRNAs在腫瘤發(fā)生及發(fā)展中的作用還有待于進(jìn)一步研究。

近兩年越來越多的miRNAs與靶基因的靶向調(diào)控關(guān)系在結(jié)直腸癌組織中得到了驗(yàn)證。Sun等[52]在結(jié)腸癌組織中檢測到miR-31表達(dá)上調(diào)，并進(jìn)一步證實(shí)其靶基因是p21蛋白活化子(RASA1)。miR-31通過抑制RASA1的翻譯激活RAS信號通路，從而促進(jìn)結(jié)直腸癌細(xì)胞的生長及腫瘤發(fā)生。Tsuchida等[53]在結(jié)腸癌組織中發(fā)現(xiàn)miR-92表達(dá)上調(diào)，并證實(shí)促凋亡蛋白Bim是其靶基因，miR-92a通過抑制Bim的合成，阻止或減慢癌細(xì)胞凋亡。Sun等[54]報(bào)道m(xù)iR-221在結(jié)腸癌組織中表達(dá)上調(diào)，而細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制因子(CDKI)的表達(dá)下調(diào)，體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)miR-221通過抑制CDKI的表達(dá)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞由G0/G1期進(jìn)入S期，從而促進(jìn)腫瘤增殖。研究發(fā)現(xiàn)，結(jié)腸癌患者腫瘤組織及血漿中miR-145均降低，體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)癌基因N-RAS為其靶基因，miR-145的表達(dá)下調(diào)引起N-RAS升高，從而促進(jìn)癌細(xì)胞增殖[55]。另一項(xiàng)研究對結(jié)腸癌組織中miR-16的表達(dá)進(jìn)行檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)67%的結(jié)腸癌組織中miR-16表達(dá)下調(diào)并與組織分化程度相關(guān)，體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)凋亡抑制基因survivin為其靶基因，miR-16的降低引起survivin基因表達(dá)上調(diào)從而抑制結(jié)腸癌細(xì)胞凋亡，促進(jìn)結(jié)腸癌細(xì)胞的增殖[56]。以上研究結(jié)果表明，在大腸癌組織中存在著多種miRNAs的表達(dá)異常，人為地干預(yù)某種miRNA的表達(dá)可能觸發(fā)腫瘤的形成或凋亡。

3 展 望

目前，miRNAs在疾病發(fā)生發(fā)展過程中的作用，尤其是在炎癥及腫瘤發(fā)生過程中的作用正逐漸受到重視。越來越多的研究著眼于尋找與疾病相關(guān)的miRNAs，明確其靶基因和相關(guān)的作用機(jī)制，并在此基礎(chǔ)上開發(fā)相應(yīng)的治療藥物，因此miRNAs在疾病的診斷和治療中擁有廣闊的應(yīng)用前景。目前仍有很多miRNAs未被發(fā)現(xiàn)，已知的miRNAs所執(zhí)行的功能尚不完全明確，每種miRNA都可調(diào)節(jié)多種靶基因，此外，在疾病的發(fā)生發(fā)展過程中miRNAs如何選擇性地作用于某一種或某幾種靶基因更有待于進(jìn)一步探索。

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