色譜法檢測(cè)動(dòng)物源食品中喹諾酮類(lèi)藥物殘留研究進(jìn)展

李佩佩，郭遠(yuǎn)明，陳雪昌*，張小軍，梅光明，龍 舉

(浙江省海洋水產(chǎn)研究所，浙江省海水增養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，浙江 舟山 316100)

色譜法檢測(cè)動(dòng)物源食品中喹諾酮類(lèi)藥物殘留研究進(jìn)展

李佩佩，郭遠(yuǎn)明，陳雪昌*，張小軍，梅光明，龍 舉

(浙江省海洋水產(chǎn)研究所，浙江省海水增養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，浙江 舟山 316100)

喹諾酮類(lèi)藥物是一類(lèi)廣譜高效抗菌藥物，廣泛應(yīng)用于畜禽和水產(chǎn)養(yǎng)殖。喹諾酮類(lèi)藥物在動(dòng)物源食品中的殘留會(huì)對(duì)人體健康造成危害。目前動(dòng)物組織中喹諾酮類(lèi)藥物殘留檢測(cè)方法有很多，其中高效液相色譜(HPLC)和高效液相串聯(lián)質(zhì)譜法(HPLC-MS-MS)是主要方法。色譜法檢測(cè)喹諾酮類(lèi)藥物的一般步驟為樣品提取、凈化、濃縮，進(jìn)HPLC柱或HPLC-MS-MS柱定量檢測(cè)。本文對(duì)色譜法檢測(cè)動(dòng)物源食品中喹諾酮類(lèi)藥物殘留研究做簡(jiǎn)要綜述，以期為食品中喹諾酮類(lèi)的多殘留檢測(cè)提供一定的參考。

喹諾酮類(lèi)；殘留；檢測(cè)；動(dòng)物源食品；高效液相色譜；質(zhì)譜

喹諾酮類(lèi)(quinolones，QNs)是一大類(lèi)具有1,4-二氫-4-氧代喹啉-3-羧酸結(jié)構(gòu)的人工合成抗菌藥物，對(duì)革蘭氏陰性菌和陽(yáng)性菌有抑制作用，因具有高效低毒、抗菌譜廣、價(jià)格低廉、與其他抗菌藥物無(wú)交叉耐藥性等優(yōu)點(diǎn)而廣泛用于臨床診療、動(dòng)物疾病預(yù)防及促生長(zhǎng)[1]。QNs在動(dòng)物源食品中的過(guò)量或不當(dāng)使用會(huì)引起食用者產(chǎn)生潛在“三致”(致癌、致畸、致突變)作用，誘導(dǎo)致病菌產(chǎn)生耐藥性，從而威脅人類(lèi)健康[2]，因此許多國(guó)家和組織都限制其使用并制訂出相應(yīng)的最高殘留限量(MRLs)：歐盟規(guī)定動(dòng)物肌肉、肝臟和腎臟中達(dá)氟沙星、二氟沙星、恩諾沙星(環(huán)丙沙星與恩諾沙星量之和)、麻保沙星、沙拉沙星等的MRLs為0.01～1.9mg/kg；美國(guó)禁止在食用動(dòng)物養(yǎng)殖中使用FQNs；我國(guó)于2002年規(guī)定了環(huán)丙沙星、單諾沙星、恩諾沙星、沙拉沙星、二氟沙星、惡喹酸和氟甲喹等7種QNs藥物在動(dòng)物肌肉組織中的最高殘留限量為10～500μg/kg。

QNs的多殘留分析是當(dāng)今研究的熱點(diǎn)。Carlucci[3]綜述了1998年以前關(guān)于QNs殘留研究的近250篇文獻(xiàn)，Hernández-Arteseros等[4]總結(jié)了2001年以前的100多篇文獻(xiàn)，Andreu等[5]總結(jié)比較了2002—2006年食品和環(huán)境中QNs類(lèi)殘留的前處理和測(cè)定方法。國(guó)內(nèi)最早的報(bào)道為1994年邱銀生等[6]對(duì)豬和雞的肝、腎和肌肉中的煙酸諾氟沙星殘留研究。目前QNs的檢測(cè)方法主要有高效液相色譜法(HPLC)[7]、高效液相-串聯(lián)質(zhì)譜法(HPLC-MS-MS)[8-9]、酶聯(lián)免疫法(ELISA)[10]、微生物法[11-12]、高效毛細(xì)管電泳分析法[13-14]等。酶聯(lián)免疫法可能造成樣品假陽(yáng)性，不適合作殘留確證，適用于大量樣品的快速篩選；微生物法檢測(cè)限過(guò)高，特異性不強(qiáng)；高效毛細(xì)管電泳分析法的檢測(cè)限也較高；HPLC法特異性強(qiáng)、定量準(zhǔn)確，缺點(diǎn)是測(cè)定種類(lèi)少、不能作定性分析、檢出限難以進(jìn)一步降低；HPLCMS-MS法靈敏度高、檢測(cè)限低、測(cè)定種類(lèi)多、集高效分離和結(jié)構(gòu)鑒定于一體，該儀器在我國(guó)檢測(cè)機(jī)構(gòu)中的配置也較為普遍，已成為復(fù)雜混合物中痕量組分定性和定量的有力工具，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中近一半方法為液質(zhì)方法。色譜法檢測(cè)QNs殘留包括樣品前處理和色譜測(cè)定2大步驟，本文從這兩方面總結(jié)動(dòng)物源食品中QNs殘留的色譜測(cè)定有關(guān)內(nèi)容。

1 樣品提取

1.1 提取溶劑

QNs為極性化合物，易溶于極性和水溶性有機(jī)溶劑、稀酸和堿溶液，不溶于非極性溶劑。動(dòng)物源食品中QNs的提取劑大致可歸納為4種[15-16]：1)水不溶性有機(jī)溶劑，如二氯甲烷和三氯甲烷；2)強(qiáng)極性有機(jī)溶劑，如乙腈、甲醇、乙醇、丙酮和乙酸乙酯；3)水溶性有機(jī)溶劑和酸、堿的混合液，如鹽酸/磷酸/乙酸/三氯乙酸/氨水-乙腈、乙酸/三氯乙酸-甲醇等；4)緩沖溶液，如磷酸和檸檬酸緩沖溶液等。

早期QNs殘留提取常用乙酸乙脂、二氯甲烷、三氯甲烷[17-19]。由于乙酸乙脂和二氯甲烷對(duì)人體和環(huán)境有較大危害，釋放藥物能力差，現(xiàn)已不常用。目前酸性喹諾酮大多用堿性溶液提取，含哌嗪基的喹諾酮(PQs)一般用pH值接近于7的溶液提取，如劉麗貞等[20]用丙酮和0.1mol/L氫氧化鈉體積比為10:1來(lái)提取魚(yú)肉中的諾氟沙星、環(huán)丙沙星和恩諾沙星殘留。

直接提取試劑首選乙腈，其溶解強(qiáng)度大、黏度系數(shù)低，可有效沉淀蛋白。甲醇、丙酮因蛋白沉淀效果差、提取液雜質(zhì)含量高而不常用。生物樣品大多含有一定水分，有機(jī)溶劑提取時(shí)一般加入無(wú)水Na2SO4來(lái)促進(jìn)鹽析和提高回收率。乙腈、甲醇中混入少量的磷酸、鹽酸、乙酸、三氯乙酸、氫氧化鈉、氨水等對(duì)QNs具有良好的組織滲透性、脫蛋白質(zhì)和釋放藥物作用，可大幅度提高回收率，是QNs殘留分析常用的提取方法。用酸化乙腈提取時(shí)一般也加入5～30g的無(wú)水Na2SO4(以5g樣品計(jì))。Bailac等[21]曾比較了二氯甲烷和酸化乙腈V(0.3%磷酸):V(乙腈)=25:75 2種提取劑對(duì)雞肉中QNs的提取效果，發(fā)現(xiàn)雖然使用二氯甲烷提取的樣品雜質(zhì)少，但使用酸化乙腈提取的樣品分析時(shí)間短，檢出限低。有機(jī)溶劑中添加酸或堿的濃度、種類(lèi)和比例對(duì)樣品提取效率均有較大影響。施冰等[22]分析魚(yú)肉等組織時(shí)研究了乙腈和0.1%甲酸的比例對(duì)去除蛋白效果的影響：當(dāng)乙腈含量低于50%時(shí)，蛋白質(zhì)不易沉淀，提取液離心無(wú)法澄清；乙腈含量提高，去除蛋白的能力增強(qiáng)；乙腈和0.1%甲酸體積比為80:20時(shí)的提取效果好于乙腈和冰乙酸體積比為100:1時(shí)。劉莉莉[23]考察了不同配比的磷酸-乙腈對(duì)草魚(yú)體內(nèi)蛋白去除和QNs提取效果的影響，最終確定磷酸和乙腈體積比為25:75時(shí)為最佳條件。Posyniak等[24]研究了不同比例的乙腈-三氯乙酸(TCA)對(duì)雞肉中恩諾沙星、環(huán)丙沙星、二氟沙星、沙拉沙星4種藥物的提取效率，研究表明5% TCA和乙腈的比例為8:2或7:3時(shí)，4種QNs的回收率最高(高于80%)，9:1時(shí)最低(低于75%)；保持TCA和乙腈的比例為8:2不變，研究了不同濃度的TCA溶液對(duì)脫蛋白的效果，最后確定10% TCA和乙腈比例為8:2時(shí)，具有最好的回收率和脫蛋白效果。

很多研究者也使用緩沖溶液作為提取劑。如董琳琳等[25]用不同pH值的磷酸二氫鉀緩沖溶液勻漿提取了雞的肌肉、皮脂、肝和腎4種組織中的4種QNs殘留；趙思俊等[26]用pH7.0的0.01mol/L的磷酸鹽緩沖液提取雞肉和豬肉中的7種QNs殘留；劉媛[27]、林玲[28]等分別用pH7.0的磷酸鹽緩沖液提取了禽蛋中的QNs殘留。

1.2 提取量和提取方式

提取時(shí)一般取1～5g樣品，每1g樣品約需用5～10mL的提取液，多次重復(fù)提取。提取過(guò)程采用高速勻質(zhì)、機(jī)械振蕩或超聲。Hermo等[29]引進(jìn)微波輔助提取(MAE)技術(shù)提取豬肉中的QNs，提取后的樣品比常規(guī)方法含有的干擾物質(zhì)更少，且快速簡(jiǎn)單，適用于分析大量樣品。

2 樣品凈化

目前QNs的凈化方法主要為液-液萃取(LLE)和固相萃取(SPE)，具體實(shí)驗(yàn)中需依據(jù)樣品基質(zhì)和提取溶劑選擇適宜的凈化方法。

LLE是凈化QNs的基本方法。調(diào)節(jié)pH值使QNs在兩相間分配，或利用不互溶的溶劑對(duì)雜質(zhì)和待測(cè)組分溶解性的差別進(jìn)行分配。乙腈作為提取劑時(shí)一般用極性較小的正己烷除脂。由于乙腈和正己烷有一定的互溶性而影響回收率，有時(shí)也用乙腈飽和的正己烷[30]。為達(dá)到更好的除雜效果，研究者在提取液旋蒸干用乙腈溶解后再在離心管中加1～2mL的正己烷通過(guò)漩渦混合進(jìn)行小體積的液-液分配[31]。LLE由于存在操作費(fèi)時(shí)、消耗高純?nèi)軇┒嘁约皹悠芬兹榛炔蛔阋阎鸩奖籗PE代替。

SPE消耗溶劑少、不產(chǎn)生乳化現(xiàn)象，是凈化QNs最常用的方法，約占QNs凈化方法的70%，主要用于極性溶劑和緩沖溶液提取QNs之后。QNs常用的SPE柱主要為硅膠鍵合C18或C8的反相柱和硅膠鍵合苯磺酸基或丙酸基等基團(tuán)的離子交換柱(如SCX、PRS、MPC)，聚合物基質(zhì)的SPE柱使得SPE技術(shù)應(yīng)用更為廣泛，如 HLB柱和ENV柱[32]。Bailac等[33]比較了Oasis HLB、Oasis MAX 和SDB-RPS 3種SPE柱對(duì)雞肉樣品的凈化效果，實(shí)驗(yàn)表明經(jīng)Oasis MAX柱凈化的樣品中環(huán)丙沙星的回收率低于25%，經(jīng)HLB 柱凈化后的樣品譜圖中達(dá)氟沙星目標(biāo)峰處有雜質(zhì)干擾，因此在這3種柱回收率都較高的情況下選擇了SDB-RPS柱作為凈化柱。趙思俊[16]將制備的免疫親和柱應(yīng)用在13種QNs的凈化上并取得了較好的效果。對(duì)于同一種SPE柱，上樣液和淋洗液的體積以及洗脫液的強(qiáng)度對(duì)回收率均有影響；不同品牌的同種SPE柱對(duì)回收率也有影響[25]。反相柱的淋洗液通常使用水、含有較低濃度有機(jī)溶劑(如甲醇、乙腈)或弱酸性的水溶液，洗脫液常用純甲醇(或乙腈)以及甲醇(或乙腈)比例大于75%以上的酸或堿性溶液。離子交換柱的淋洗液一般使用緩沖溶液，洗脫液常用含有高濃度有機(jī)溶劑的酸或堿性溶液，如甲醇-NH3·OH[34]、乙腈-2%～4%的三氟乙酸水溶液[32-33]。對(duì)于雜質(zhì)含量較多的動(dòng)物組織，有研究者還采用兩步SPE凈化或者先正己烷除脂再SPE凈化的方法[35]。SPE方法的缺點(diǎn)是SPE柱價(jià)格相對(duì)昂貴、結(jié)果重現(xiàn)性差、目標(biāo)化合物的回收率和精密度比LLE低[36]。

目前，基質(zhì)固相分散萃取、超臨界流體萃取、固相微萃取、加速溶劑萃取和分子印跡固相萃取等較新的方法也應(yīng)用到QNs殘留分析中?；|(zhì)固相分散技術(shù)適用于萃取對(duì)固體、半固體和高黏稠的生物樣品中的分析物。如喬鳳霞等[37]采用基質(zhì)固相分散-HPLC法分析了牛奶、蜂蜜中的多種QNs。蜂蜜的檢出限為0.125μg/kg；申京宇等[38]等利用超臨界流體萃取-HPLC法檢測(cè)了雞肉中的4種QNs。

3 樣品濃縮

樣品凈化后的濃縮方法通常為真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)和氮?dú)馑〈蹈伞．?dāng)樣品量大于10mL時(shí)前者比較簡(jiǎn)便快速。旋蒸過(guò)程中易產(chǎn)生爆沸、蒸干后溶解不充分會(huì)導(dǎo)致回收率比氮吹低。劉莉莉[23]比較了旋蒸溫度為45、50、55℃對(duì)回收率的影響，發(fā)現(xiàn)溫度對(duì)回收率變化的影響不大。

4 HPLC法檢測(cè)

4.1 色譜柱的選擇

QNs的叔胺基和羧基官能團(tuán)在水中解離會(huì)導(dǎo)致色譜柱填料表面殘留的硅醇基(硅羥基)和金屬雜質(zhì)通過(guò)氫鍵或離子交換作用強(qiáng)烈吸附QNs，造成色譜峰拖尾、峰形異常和分離度下降等現(xiàn)象，因此QNs殘留分析多采用以高純硅膠為基質(zhì)并經(jīng)端基封閉處理的色譜柱，如C18、C8柱、苯基柱。非硅膠基質(zhì)的聚合物柱也有應(yīng)用。一般柱的規(guī)格為(250mm×4.6mm，5μm)；UPLC的柱填料粒徑小于2μm。

4.2 流動(dòng)相的選擇

流動(dòng)相一般由有機(jī)試劑、酸性溶液、離子對(duì)試劑(如三乙胺或四丁基溴化銨)三部分組成。QNs藥物具有可質(zhì)子化的氮原子和離解的羥基，經(jīng)反相色譜柱測(cè)定時(shí)會(huì)出現(xiàn)峰拖尾現(xiàn)象，加入離子對(duì)試劑可改善QNs的峰形和提高分離度。有研究發(fā)現(xiàn)三乙胺作為離子對(duì)試劑不能有效地分離氧氟沙星和諾氟沙星[39]。流動(dòng)相的pH值對(duì)QNs的分離和保留也有顯著影響：QNs是酸堿兩性化合物，其解離狀態(tài)和在流動(dòng)相中的溶解性隨pH值變化；硅膠鍵合固定相表面殘余硅醇基的解離程度與流動(dòng)相pH值也有關(guān)[40]，pH＞3即完全解離。而當(dāng)pH值過(guò)低(＜2.0)時(shí)個(gè)別QNs不能有效分離[16]，在流動(dòng)相比例不變的情況下，過(guò)低的pH值會(huì)導(dǎo)致QNs的保留時(shí)間延長(zhǎng)，且低酸度也會(huì)影響色譜系統(tǒng)壽命，因此流動(dòng)相的pH值一般調(diào)節(jié)為2.0～3.0。我國(guó)農(nóng)業(yè)部標(biāo)準(zhǔn)[41]中測(cè)定3種QNs采用的流動(dòng)相為乙腈和四丁基溴化銨溶液(磷酸調(diào)pH值為3.0)體積比為5:95，很多文獻(xiàn)中也使用此流動(dòng)相。此外，乙腈-磷酸(三乙胺調(diào)節(jié)pH值)也有應(yīng)用。磷酸鹽、檸檬酸鹽與乙腈混合時(shí)易產(chǎn)生結(jié)晶而引起色譜管路堵塞，且靈敏度也較低，故研究者對(duì)流動(dòng)相做了改進(jìn)：以甲酸或乙酸來(lái)代替緩沖鹽，如趙思俊等[26]用0.1%甲酸-甲醇作為流動(dòng)相檢測(cè)動(dòng)物肌肉組織中7種QNs；乙腈-甲醇-水(或弱酸)作為流動(dòng)相也可使分離更快速和靈敏[20]，如V(乙腈):V(甲醇):V(0.1%三氟乙酸)＝20:8:72。當(dāng)測(cè)定的QNs種類(lèi)較多時(shí)，采用梯度條件洗脫、程序波長(zhǎng)熒光檢測(cè)器檢測(cè)可提高分離效果和靈敏度。

4.3 流速和柱溫

流速和柱溫對(duì)保留時(shí)間和峰型都有影響。增大流速和升高柱溫會(huì)縮短保留時(shí)間，使峰型更加尖銳，但流速太大、柱溫太高會(huì)損害色譜柱，造成峰重疊，因此需要根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)情況確定合適的流速和柱溫。柱溫一般選擇30～40℃，流速為0.8～1.0mL/min。

4.4 檢測(cè)器的選擇

QNs具有較強(qiáng)的紫外吸收和熒光性質(zhì)，動(dòng)物組織中QNs殘留既可用紫外也可用熒光檢測(cè)器檢測(cè)。

4.4.1 紫外檢測(cè)(UV)

UV應(yīng)用不多，檢測(cè)波長(zhǎng)通常為254～280nm，主要用于檢測(cè)體液和飼料中的QNs。陳輝華等[42]用UV同時(shí)測(cè)定了魚(yú)肉中的5種FQs(沙拉沙星、恩諾沙星、達(dá)氟沙星、環(huán)丙沙星、單氟沙星)。二極管陣列檢測(cè)器(DAD)也有應(yīng)用，孟勇等[40]應(yīng)用反相高效液相色譜法配二極管陣列檢測(cè)器在波長(zhǎng)279nm處測(cè)定了中華絨螯蟹肝臟中諾氟沙星、環(huán)丙沙星和恩諾沙星的殘留量。Cinquina等[43]分析了羊奶中的恩諾沙星及其代謝物環(huán)丙沙星，奶樣用磷酸鹽緩沖液提取，C18SPE柱純化，在277nm波長(zhǎng)處用HPLCDAD分析，定量檢出限為20μg/kg。

4.4.2 熒光檢測(cè)

熒光檢測(cè)器較UV靈敏度高2～3個(gè)數(shù)量級(jí)，因此絕大多數(shù)QNs殘留分析使用熒光檢測(cè)器。QNs分子結(jié)構(gòu)復(fù)雜、熒光特性各異。含有哌嗪環(huán)的QNs(絕大部分的FQs，如諾氟沙星、環(huán)丙沙星、恩諾沙星、二氟沙星等)和不含哌嗪環(huán)的QNs(如噁喹酸、氟甲喹等)具有不同的熒光光譜特性，前者激發(fā)波長(zhǎng)(λEx)一般采用285、280、278、297nm，對(duì)應(yīng)的發(fā)射波長(zhǎng)(λEm)為460、450、446～465、515nm；后者(λEx)為320nm，(λEm)為365nm。使用熒光檢測(cè)法進(jìn)行QNs多殘留檢測(cè)時(shí)采用程序波長(zhǎng)檢測(cè)法可提高檢測(cè)靈敏度和選擇性。

4.5 檢測(cè)限

近幾年來(lái)分析較多的動(dòng)物源食品是肌肉組織，其次是肝、腎、皮膚、脂肪。由于檢測(cè)的靶組織、QNs種類(lèi)以及樣品前處理和檢測(cè)條件不同，動(dòng)物源食品中QNs殘留的檢測(cè)限也各有不同。目前水產(chǎn)品中HPLC法檢測(cè)QNs的檢出限一般為0.2～10μg/kg。檢測(cè)限較低的研究有：Schneider等[44]等用HPLC-FLU法測(cè)定了雞肉中的多種QNs殘留，其中達(dá)氟沙星、環(huán)丙沙星和恩諾沙星、二氟沙星、沙拉沙星的檢測(cè)限分別為0.5、1.0、2.0、5.0μg/kg。劉慧慧等[45]對(duì)魚(yú)肉中恩諾沙星、環(huán)丙沙星、沙拉沙星和二氟沙星進(jìn)行了檢測(cè)，其檢測(cè)限分別是1.0、0.3、0.2、0.2μg/kg。趙思俊等[26]對(duì)雞肉和豬肉中環(huán)丙沙星、單諾沙星等7種QNs進(jìn)行了檢測(cè)，檢出限為0.1～0.3μg/kg，定量限為0.3～1.0μg/kg。劉波靜[46]分析了雞肉、脂肪、雞肝和雞腎中的氧氟沙星、諾氟沙星、環(huán)丙沙星和恩諾沙星，檢測(cè)限均為0.92μg/kg。李娟[15]同時(shí)檢測(cè)了牛肉、豬肉、豬肝和豬腎4種組織中的QNs殘留，最低檢測(cè)限和定量限在牛肉中分別為0.2～6.5μg/kg和0.7～21.6μg/kg，在豬肉中為0.2～6.0μg/kg和0.8～20.0μg/kg，在豬肝中為0.3～10.0μg/kg和1.2～33.3μg/kg，在豬腎中為0.3～8.2μg/kg和0.9～27.2μg/kg。

5 HPLC-MS-MS檢測(cè)

目前約60%的QNs檢測(cè)使用HPLC-MS-MS。Hermo等[32]研究發(fā)現(xiàn)使用MS測(cè)定的QNs檢出限比LC-UV低35倍。李雅麗等[47]等研究發(fā)現(xiàn)MS的檢測(cè)靈敏度比熒光檢測(cè)器高5～10倍。由于采用MS分析，不能使用難于氣化的磷酸鹽等緩沖液流動(dòng)相體系，因此HPLC-MS-MS的流動(dòng)相多為0.1%的甲酸(或三氟乙酸或乙酸銨)溶液-乙腈(或甲醇、0.1%甲酸乙腈、0.1%甲酸甲醇)。因測(cè)定藥物種類(lèi)多，為達(dá)到不同藥物的最佳檢測(cè)條件，流動(dòng)相均采用梯度洗脫程序。一般使用電噴霧離子源(ESI)和多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式(MRM)。Toussaint等[48]用LC-MS-MS對(duì)豬腎臟中的11種QNs同時(shí)定量和確證，檢測(cè)限均小于或等于50μg/kg；Bailac等[21]檢測(cè)了雞肉中的7種QNs，檢測(cè)限為0.15～0.5μg/kg；Johnston等[49]用LC-MS-MS同時(shí)分析了鮭魚(yú)、對(duì)蝦和鮑魚(yú)中的8種喹諾酮和氟喹諾類(lèi)藥物的殘留量，所有分析樣品在12min內(nèi)出峰，檢測(cè)限為1～3μg/kg；岳振峰等[50]測(cè)定了雞肉、雞肝、魚(yú)肉中的16種QNs，所有藥物在9min內(nèi)全部出峰，測(cè)定低限均為10μg/kg。李雅麗等[47]等建立了雞和魚(yú)肌肉組織中19種QNs的HPLC-ESIMS-MS檢測(cè)法，檢出限為0.3μg/kg。田媛等[51]等用內(nèi)標(biāo)法測(cè)定了雞蛋中氟喹諾酮類(lèi)藥物殘留，定量限為1μg/kg。黃優(yōu)生等[52]建立了快速測(cè)定魚(yú)肉中4種氟喹諾酮類(lèi)藥物殘留的HPLC-MS法，檢出限為0.1～0.4μg/kg，定量限為0.3～1.0μg/kg。魏伯平等[53]采用RP-HPLC-MS-MS法同時(shí)測(cè)定了雞肉中7種QNs，檢測(cè)限為0.25～1.07μg/kg。施冰等[22]建立了鰻魚(yú)、蝦、魚(yú)肉中7種氟喹諾酮類(lèi)藥殘的LC-ESI-MS-MS定量檢測(cè)和確證方法，定量限為1.8～9.6μg/kg。HPLC-MS-MS法還可實(shí)現(xiàn)包括QNs類(lèi)藥物在內(nèi)的多種藥物的同時(shí)測(cè)定。如李峰格等[54]利用分散固相萃取-超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)測(cè)定了雞肝中12種磺胺類(lèi)、19種喹諾酮類(lèi)和8種苯并咪唑類(lèi)藥物及其代謝物殘留，39種藥物的檢出限均為5μg/kg。

6 結(jié) 語(yǔ)

HPLC和HPLC-MS-MS法是測(cè)定QNs的主要方法，在具體實(shí)驗(yàn)中需根據(jù)所測(cè)靶動(dòng)物和QNs的種類(lèi)以及檢測(cè)要求選擇適宜的前處理和色譜條件。未來(lái)HPLC-MS-MS法的發(fā)展方向是在定量檢測(cè)藥物的同時(shí)能提供物質(zhì)的結(jié)構(gòu)信息以及對(duì)未知藥物給予確證。

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Chromatographic Detection of Quinolones Residues in Animal Tissues

LI Pei-pei，GUO Yuan-ming，CHEN Xue-chang*，ZHANG Xiao-jun，MEI Guang-ming，LONG Ju
(Zhejiang Province Key Laboratory of Mariculture and Enhancement, Marine Fishery Research Institute of Zhejiang, Zhoushan 316100, China)

Quinolones is a kind of antibacterial agents with broad-spectrum antibacterial capability. It is widely applied in animal and aquaculture. The residues of quinolones in animal-derived foods can be dangerous for human health. HPLC (high performance liquid chromatography) and HPLC-MS-MS are major methods to analyze quinolones residues. The general steps of HPLC and HPLC-MS-MS for quinolones detection including sample extraction, purification, condensation and final quantitative detection have been reviewed in this paper.

quinolones；residues；detection；animal-derived food；HPLC；MS

TS207.3；O657

A

1002-6630(2013)03-0303-05

2012-01-05

浙江省重點(diǎn)科技創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目(2010R50028)；浙江省科技計(jì)劃項(xiàng)目(20120F30021)

李佩佩(1986—)，女，碩士，研究方向?yàn)樗a(chǎn)品藥物殘留檢測(cè)。E-mail：liwanzhao999@163.com

*通信作者：陳雪昌(1970—)，男，高級(jí)工程師，碩士，研究方向?yàn)樗a(chǎn)品質(zhì)量安全。E-mail：13567679178@163.com