冰凍紅細(xì)胞的制備方法及臨床應(yīng)用

李玉秋 時卉麗 孫曉紅 程菲 趙紅

隨著臨床成分血的廣泛開展，稀有血型血液的臨床用量也逐年增加，特別是急診搶救和產(chǎn)婦大出血，短時間內(nèi)緊急需要的血液比較多。我中心應(yīng)用ACP215全自動細(xì)胞處理儀制備冰凍紅細(xì)胞和冰凍解凍去甘油紅細(xì)胞，2010年全年冰凍紅細(xì)胞304 U，解凍紅細(xì)胞145 U。

1 材料與方法

1．1 材料 去白懸浮紅細(xì)胞(2 U/袋)，甘油(57%，160 ml，北京博德桑特輸血器材公司);9%NaCl(80 ml，北京博德桑特輸血器材公司);0．9%NaCl(1 000 ml，山東威高集團(tuán)醫(yī)用高分子制品股份有限公司);羥乙基淀粉40氯化鈉注射液(500 ml，山東齊都藥業(yè)有限公司);MAP紅細(xì)胞保存液(山東威高集團(tuán)醫(yī)用高分子制品股份有限公司);轉(zhuǎn)移袋(200 ml，山東威高集團(tuán)醫(yī)用高分子制品股份有限公司);冰凍轉(zhuǎn)移袋(500 ml，山東威高集團(tuán)醫(yī)用高分子制品股份有限公司)，全自動細(xì)胞處理系統(tǒng)配套的甘油化耗材(REF225)和去甘油化耗材(REF235)(美國血液技術(shù)公司)。所有耗材均在有效期內(nèi)使用。

1．2 主要設(shè)備 全自動細(xì)胞處理系統(tǒng)(美國血液技術(shù)公司)，－80℃(三洋冰箱)。RC12BP大容量低溫離心機(jī)(美國Kendro公司);37℃電熱恒溫冰箱(天津市泰斯特儀器有限公司)，全自動無菌管對接機(jī)(日本Terumo公司)。

1．3 紅細(xì)胞甘油化 2～6℃保存6 d內(nèi)的去白懸浮紅細(xì)胞與200 ml轉(zhuǎn)移袋用無菌接口機(jī)連接，2 500 r/min速度離心12 min，將離心后的血液輕輕放入分離夾中，使上清液全部流入200 ml轉(zhuǎn)移袋中，用卡子卡住轉(zhuǎn)移袋，熱合封口，把余下的紅細(xì)胞與冰凍轉(zhuǎn)移袋進(jìn)行連接，倒置血袋，使血袋中的血液緩慢、自然地流入袋中。啟動ACP215型全自動細(xì)胞處理系統(tǒng)，安裝甘油化管路，血袋固定在振蕩器上，設(shè)定甘油化程序后，即自動加入57%甘油，邊加邊震蕩，操作完畢，靜置30 min，將甘油化血液以3 034 r/min速度離心5 min，在用分漿夾分離出多余的甘油，紅細(xì)胞比積控制在75% ～80%，并棄去轉(zhuǎn)移袋，甘油化紅細(xì)胞平放于盒中，于－80℃冰箱冰凍保存。

1．4 紅細(xì)胞去甘油化 冰凍紅細(xì)胞以－80℃冰箱取出后迅速放入37℃水浴箱內(nèi)，不斷搖動使血袋加速融化，用無菌接口機(jī)將冰凍紅細(xì)胞與去甘油化管路連接，啟動ACP215全自動細(xì)胞處理系統(tǒng)，設(shè)定去甘油化程序，開始稀釋和洗滌操作制備冰凍解凍去甘油紅細(xì)胞。

2 病例分析

2．1 患者1，男56歲，2011年10月9日入院，診斷腹部閉合性損傷，失血性休克，急癥手術(shù)，手術(shù)診斷肝破裂，腹膜后血腫，腸系膜破裂，失血性休克，當(dāng)天緊急輸注去甘油化紅細(xì)胞10 U，10月10日血常規(guī)檢測。RBC 3．5×1012/L PLT 45×109/L WBC 6．8 ×109/L HGB 118 g/L HCT 35．4%。查:PT 21s，PA 47%，INR 1．68，F(xiàn)IB 1．87 g/L，10 月 11 日又輸注去甘油化紅細(xì)胞4 U，再次檢測 PLT 45×109/L，RBC 2．5×1012/L HGB 81 g/L WBC 4．5×109/L HCT 24．4%，10月12日再次輸注去甘油化紅細(xì)胞4 U。

2．2 患者2，女，25歲，2011年10月13日入院，孕足月胎膜早破，胎兒窘迫，急癥剖宮手術(shù)，查 PT 38．66，S APTT 101 FIB 0．17HGB 60 g/L。來院途中出血1 000 ml(2 h內(nèi))，血常規(guī)檢查:WBC 33．5 ×109/L，NEUT 94．4%，HCT 14．9%PCT 116 ×109，HGB 50 g/L，緊急輸血去甘油化紅細(xì)胞4 U，10月14日查體:PT 17．5 s，PA 62%，F(xiàn)IB 2．19 g/L，APTT 34．2。血常規(guī):WBC 35．8 ×109/L，NEUT 93．7%，HGB 61 g/L，HCT 18．2，PLT 67×109/L。

3 討論

冰凍紅細(xì)胞是借助冰凍保護(hù)劑(甘油)低溫保護(hù)的紅細(xì)胞。主要用于稀有血型和自身血的長期保存［1］。ACP215紅細(xì)胞處理儀是一種全自動多功能的密閉系統(tǒng)，擁有震蕩混合平臺及連續(xù)流動洗滌系統(tǒng)，可用于紅細(xì)胞的甘油化及去甘油化，其中去甘油洗滌需40～50 min(人工操作則需數(shù)小時)?？梢?，ACP215紅細(xì)胞處理儀洗滌的速度快，全程時間明顯縮短，提供目測的游離血紅蛋白檢測卡可及時觀察洗滌的效果，洗滌過程完全封閉，減少污染，洗滌效果明顯，洗滌后血液檢測的指標(biāo)達(dá)到國家規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)［2］。

臨床使用冰凍紅細(xì)胞時需洗滌去甘油，經(jīng)過洗滌的去甘油紅細(xì)胞去除了細(xì)胞的代謝產(chǎn)物和抗凝劑，減少輸血中的不良反應(yīng)，是較為理想的血液制品［3］。通過本文上述兩個病例我們看到，冰凍紅細(xì)胞的輸注極大地改善和緩解了患者的癥狀，達(dá)到了治療的目的。

1 田兆嵩主編．臨床輸血學(xué)．第2版．廣州:廣東人民出版社，1988．241．

2 中華人民共和國衛(wèi)生部．全血及成份血質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)．中華人民共和國衛(wèi)生部血站基本標(biāo)準(zhǔn)．2000．

3 Lecak J，Young C，Hannon J，et al．Evaluation of red blood cells stored at 80 degrees C in excess of 10 years．Transfusion，2004，44:1306-1313．