野生動物感染布魯菌的研究進(jìn)展

孫泉云，夏爐明，盧 軍

（上海市動物疫病預(yù)防控制中心，上海201103）

布魯菌?。˙rucellosis）簡稱布病，是由布魯菌 （Brucella）引起的一種人獸共患的慢性傳染病，在許多國家和地區(qū)均有不同程度的發(fā)生和流行。本病原菌主要侵害動物生殖系統(tǒng)，以母畜發(fā)生流產(chǎn)和公畜發(fā)生睪丸炎為特征，臨床癥狀包括流產(chǎn)、早產(chǎn)、不孕、不育、胎盤滯留、睪丸炎、關(guān)節(jié)炎、神經(jīng)損傷和各種組織的局部病灶。

動物布魯菌根據(jù)其對宿主的偏好性和菌株致病性的區(qū)別，目前已經(jīng)鑒定9個種，其中6個為經(jīng)典種，這6個種根據(jù)它們的培養(yǎng)和一些生物學(xué)特性又可以劃分為18個亞型，包括羊種布魯菌（B.melitensis，也稱馬耳他布魯菌，主要感染綿羊和山羊種，包括1、2、3亞型），牛種布魯菌（B.abortus，也稱流產(chǎn)布魯菌，包括1、2、3、4、5、6、9亞型），豬種布魯菌（B.suis，包括1、2、3、4、5亞型，主要感染豬，馴鹿和野兔），犬種布魯菌（B.canis），綿羊種布魯菌（B.ovis）和沙林鼠布魯菌（B.neotomae）。其中致病譜最廣的是B.abortus、B.melitensis和B.suis，4個種對人具有致病性，即B.melitensis，B.abortus，B.suis和B.canis。后來又鑒定到3個新的種，田鼠種布魯菌（B.microti）、鯨種布魯菌 （B.cetacease）和鰭種布魯菌（B.pinnipediae），后2種又可合稱為海洋種（B.maris）。

野生動物的某些習(xí)性也決定了其布魯菌感染模式，如狼通過捕食羊和馴鹿而感染，狐貍?cè)∈沉鳟a(chǎn)胎兒感染。有些布魯菌種可在野生動物群中貯存，其宿主包括野豬、野牛、麋鹿、野兔等。B.abortus的貯存宿主包括野牛、野水牛、麋鹿、駱駝和野豬，B.ovis的宿主包括野羊和赤鹿，B.suis的宿主包括野豬、野兔和馴鹿，B.neotomae的宿主涵蓋嚙齒類動物。野兔感染B.suis后內(nèi)臟器官出現(xiàn)結(jié)節(jié)，尤其是生殖器官、皮下組織和肌肉。母馴鹿感染B.suis后可發(fā)生流產(chǎn)、胎盤滯留、子宮炎和乳房炎，公鹿則發(fā)生睪丸炎、關(guān)節(jié)炎和皮下膿腫。

野生動物的布魯菌病不但能影響其繁殖性能，而且可作為疫源傳播給家畜和人類。因此，了解和弄清野生動物布魯菌的感染狀況，有助于家畜布魯菌病的控制和凈化，從而保障人類的身心健康。

1 野豬布魯菌感染

野豬對B.suis的易感性要高于家豬，但許多病例均觀察不到明顯病變。Gennero M S等［1］在2000年-2004年間采用補(bǔ)體結(jié)合試驗（CFT）對意大利4 456頭野豬血樣進(jìn)行了抗體檢測，結(jié)果在不同年份分別檢出抗體陽性率為6%、2%、8%、10%和10%；對1 423頭野豬組織樣品（子宮、脾臟和睪丸）進(jìn)行了細(xì)菌分離和鑒定，結(jié)果共分離到134株布魯菌，其中70株歸屬B.suis生物1型，36株為生物2型，21株為B.melitensis生物3型，7株為未知型。Watarai M等［2］采用ELISA和試管凝集試驗（TAT），對捕獲的115頭日本野豬的血清樣品進(jìn)行了布魯菌抗體檢測，結(jié)果檢出9頭陽性，陽性率為7.8%。鑒于戶外家豬群暴發(fā)了布魯菌病，懷疑野豬是其傳染源，Melzer F等［3］采用ELISA和補(bǔ)體結(jié)合試驗（CFT）對德國5個聯(lián)邦州的野豬群進(jìn)行了布魯菌血清學(xué)監(jiān)測。共采集不同地區(qū)野豬血樣885頭份，結(jié)果不同地區(qū)間ELISA試驗檢出的陽性率為0～28.5%，而CFT試驗對應(yīng)檢出的陽性率為0～12.1%。Cvetnic Z等［4］在2003年-2004年間從克羅地亞捕獲的野豬群中隨機(jī)采集了424頭野豬血樣，檢測布魯菌感染情況，結(jié)果血清抗體陽性率達(dá)27.6%，從抗體呈陽性的93頭野豬中分離到7株布魯菌，分離率達(dá)7.5%，經(jīng)培養(yǎng)鑒定為B.suis生物2型和生物3型。Munos P M等［5］在1999年-2009年間，采用ELISA方法對來自西班牙伊比利亞地區(qū)的野豬群進(jìn)行了布魯菌感染狀況調(diào)查，共采集了4 454頭野豬血清樣品，結(jié)果不同地區(qū)間抗體陽性率達(dá)25%～46%。對分離到的104株布魯菌進(jìn)行了遺傳發(fā)生樹分析，均歸屬于B.suis生物2型，與家豬中分離到的布魯菌高度吻合。

2 野羊布魯菌感染

Muma J B等［6］在2003年、2004年和2008年捕獵季節(jié)在贊比亞捕獲到121頭驢羚，采用RBT、cELISA和FPA試驗檢測布魯菌血清抗體，結(jié)果總陽性率為21.6%，波動范圍為14.2%～29.1%。公母驢羚的陽性率無顯著差異，分別為21.7%和21.6%，三種不同方法間的檢測結(jié)果也基本一致。Kreeger T J等［7］發(fā)現(xiàn)9頭成年巖羊（5公，4母）因接觸麋鹿流產(chǎn)胎兒而感染了布魯菌，公羊表現(xiàn)的臨床癥狀為睪丸炎和附睪炎，母羊表現(xiàn)為流產(chǎn)、淋巴腺炎和胎盤炎。所有羊血清學(xué)檢測均為抗體陽性，經(jīng)對組織器官的細(xì)菌學(xué)檢查，分離菌株鑒定為B.abortus生物4型。

3 野鹿布魯菌感染

Etter R P等［8］在1998年-2002年間，連續(xù)4年對美國愛達(dá)荷州的麋鹿群進(jìn)行了布魯菌血清學(xué)監(jiān)測。結(jié)果在自由散放的麋鹿間檢出布魯菌抗體陽性率為2%～3%，而人工飼養(yǎng)的麋鹿抗體陽性率為12%～80%。選取部分血清抗體陽性的麋鹿實施安樂死，采集組織器官進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)和分子生物學(xué)鑒定，分離菌株為B.abortus生物1型和4型，但以4型居多。經(jīng)流行病學(xué)調(diào)查，發(fā)現(xiàn)血清抗體陽性的麋鹿群出現(xiàn)過臨床癥狀，包括流產(chǎn)（16%）、死產(chǎn)（8%）、產(chǎn)弱仔（4%）。Elisei C等［9］在巴西潘塔奈爾保護(hù)區(qū)采集了44頭野鹿的血樣，采用PCR進(jìn)行布魯菌病原學(xué)檢測。結(jié)果檢出9頭陽性，陽性率為20.4%。經(jīng)基因測序，證實與B.suis高度同源。

4 野牛布魯菌感染

感染野牛的布魯菌主要是B.abortus，其分布與該種菌在家牛中的分布近似，野牛感染后表現(xiàn)消瘦、跛行、關(guān)節(jié)炎等臨床癥狀。B.abortus可在家牛和野牛中雙向傳播，野牛被認(rèn)為是B.abortus的維持宿主。Rhyan J C等［10］在1995年-1999年間，對來自美國黃石國家公園的野牛血樣和流產(chǎn)胎兒等組織樣品進(jìn)行了血清學(xué)、細(xì)菌學(xué)和組織病理學(xué)檢查，結(jié)果35頭野牛血樣中26頭呈抗體陽性，從流產(chǎn)胎兒和胎盤中分離到的菌株經(jīng)鑒定為B.abortus生物1型和2型。Scurlock B M等［11］在1992年-2008年間，對美國懷俄明州西部的野牛群中捕獲321頭野牛進(jìn)行了布魯菌抗體跟蹤監(jiān)測，結(jié)果抗體陽性率達(dá)63.9%。Fyumagwa R D等［12］采用玫瑰紅平板凝集試驗和ELISA試驗對坦桑尼亞Serengeti生態(tài)保護(hù)區(qū)內(nèi)的水牛和黑尾牛羚進(jìn)行了布魯菌血清學(xué)監(jiān)測，共采集了205頭份血清樣品，結(jié)果水牛和黑尾牛羚的陽性率分別為24%和17%。

5 駱駝布魯菌感染

Abbas B等［13］調(diào)查發(fā)現(xiàn)，駱駝的布魯菌感染表現(xiàn)兩種模式，游牧散養(yǎng)的駱駝呈現(xiàn)低流行率（2%～5%），而集約化或半集約化飼養(yǎng)的駱駝則呈現(xiàn)高流行率（8%～15%），主要由不同生物型的B.abortus和B.melitensis引發(fā)感染。Musa M T等［14］對蘇丹的駱駝布魯菌病暴發(fā)病例進(jìn)行了流行病學(xué)調(diào)查，5頭發(fā)病駱駝經(jīng)血清學(xué)檢測均為陽性，其中3頭表現(xiàn)臨床病癥。隨后將其他貌似健康的駱駝送至屠宰場，又檢出6頭血清抗體陽性，其中5頭駱駝的頜下淋巴結(jié)出現(xiàn)特征病變。經(jīng)病原學(xué)檢測，感染的布魯菌為B.melitensis生物3型和B.abortus生物6型。

6 海洋動物布魯菌感染

自1996年英國Foster G等［15］發(fā)現(xiàn)了海洋種布魯菌（B.maris）以來，不同國家從世界上不同海域（南極、北歐、南北美海域等）的10余種鰭類和鯨類海洋哺乳動物（海豹、海豚、鯨魚等）分離到該種菌［16］。一般用B.maris可代表所有分離菌株，而鰭種布魯菌（B.pinnipediase）特指從鰭類（海豹、海獅和海象）分離到的菌株，鯨種布魯菌（B.cetaceae）專指鯨類（海豚、海鯨）中分離到的菌株。某些海洋動物感染后可出現(xiàn)相關(guān)病變，包括腦膜腦炎、皮下膿腫、胎盤炎、副睪炎、慢性膿性肉芽性睪丸炎、淋巴腺炎、乳房炎、腹膜炎、脊椎炎、矽化肺肉芽腫、肝膿腫、肝脾壞死等。Prenger-Berninghoff E等［16］對426頭普通海豹、298頭海豚、34頭灰海豹和10頭其它海洋哺乳動物的內(nèi)臟組織樣品進(jìn)行了布魯菌原學(xué)檢測，結(jié)果47頭普通海豹、2頭海豚和1頭灰海豹為陽性，并從中分離到91株布魯菌，肺臟中菌株的分離率最高。經(jīng)基因測序，證實絕大多數(shù)分離菌株為B.pinnipediae，2株為B.ovis。Jauniaux T P等［17］2008年發(fā)現(xiàn)1頭雌港灣鼠海豚死于比利時海灘，體形消瘦，經(jīng)解剖檢查生殖道和鰭表皮潰瘍，采集內(nèi)臟組織進(jìn)行免疫組化試驗、透射電鏡觀察和細(xì)菌學(xué)檢查，證實分離菌株為B.ceti。

7 其他動物布魯菌感染

Hubalek Z等［18］在1999年-2003年發(fā)現(xiàn)在捷克南部的野鼠中流行一種疫病，急性感染的臨床表現(xiàn)為高度水腫，有時伴發(fā)膿腫、關(guān)節(jié)炎、淋巴腺炎、睪丸炎和腹膜肉芽腫。經(jīng)對臨床組織樣品的分離鑒定，證實為布魯菌。Schiabritz-Loutsevitch N E等［19］發(fā)現(xiàn)1頭13歲的經(jīng)產(chǎn)狒狒和1頭8歲的初產(chǎn)狒狒于懷孕后3個月產(chǎn)下死胎，經(jīng)生化分析、PCR檢測和基因測序，證實分離菌株為布魯菌，但與現(xiàn)有的布魯菌表型特征不符，說明是一種新的亞種。Scholz H C等［20］從奧地利Gmund地區(qū)捕獲的赤狐頜下淋巴結(jié)中分離到2株革蘭陰性的短桿菌，經(jīng)分離培養(yǎng)和基因測序，鑒定為田鼠種布魯菌（B.microti）。赤狐感染可能是捕食了感染布魯菌的野鼠而致。O’Hara T M等［21］在2003年-2006年間，采用標(biāo)準(zhǔn)平板試驗（SPT）和抗原卡試驗（BBA）對美國北阿拉斯加的北極熊進(jìn)行了布魯菌特異性抗體的檢測，總陽性率為10.2%，平均年陽性率為6.8%～18.5%。

8 結(jié)語

布魯菌病是一種分布廣泛的全球性重要人獸共患傳染病，人間布魯菌病的發(fā)生主要取決于動物（包括家畜和野生動物）布魯菌疫源地的存在。而實施家畜布魯菌病的防控和凈化，必須依賴于野生動物布魯菌病的有效控制。由于目前對野生動物布魯菌病的流行狀況、感染機(jī)制等方面知之甚少，可能影響到對布魯菌病的整體防控和撲滅策略，因此必須關(guān)注和重視野生動物布魯菌病的流行病學(xué)調(diào)查和防控研究。

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