瘧疾患者骨髓片與血片瘧原蟲陽(yáng)性率比較

劉秋蓮，賴云英，張水生

(江西省人民醫(yī)院，江西南昌330006)

瘧疾患者骨髓片與血片瘧原蟲陽(yáng)性率比較

劉秋蓮，賴云英，張水生

(江西省人民醫(yī)院，江西南昌330006)

瘧疾；瘧原蟲；骨髓涂片；外周血涂片

惡性瘧疾是迄今為止全世界最為嚴(yán)重的熱帶蟲媒傳染病之一，也是WHO規(guī)定的國(guó)際間檢測(cè)傳染病之一。我國(guó)曾將瘧疾發(fā)病控制在較低水平[1]，近年來(lái)隨著赴非洲務(wù)工人員的增加，本地輸入性惡性瘧疾亦明顯增加。輸入性惡性瘧疾易誤診，如得不到及時(shí)治療，易轉(zhuǎn)為危重癥[2]。因此，及時(shí)、準(zhǔn)確的診斷對(duì)有效治療瘧疾及控制其流行具有重要意義[3]。檢出瘧原蟲是瘧疾明確診斷的最直接證據(jù)。目前最常用的是顯微鏡檢查法，現(xiàn)將我院近年收治的瘧疾患者骨髓片與血片顯微鏡檢查瘧原蟲陽(yáng)性率比較匯報(bào)如下。

1 材料與方法

1.1 材料2010年1月至2013年4月3例，臨床高度懷疑惡性瘧原蟲患者外周血和骨髓涂片各四張(均在患者發(fā)熱后用藥前采集)，瑞氏染色液由(臺(tái)資)珠海貝索生物技術(shù)有限公司提供。

1.2 載玻片的要求選擇優(yōu)質(zhì)推片，推片兩端邊緣整齊平滑每次使用時(shí)必須潔凈推片，以免推片粘有他人的成分而污染本次標(biāo)本，載玻片的厚薄，清潔光滑和陳舊程度都會(huì)影響檢查的結(jié)果，推薦使用1～1.2mm厚度：25.4mm×76.2mm長(zhǎng)度的載玻片。新玻片表面常有游堿質(zhì)，必須用酸溶液浸泡24h后再用清水徹底清洗、干燥后備用。

1.3 制片方法用推片醮取骨髓(血)液少許，置于載玻片右端三分之一處，使推片和此骨髓(血)液接觸，當(dāng)骨髓(血)液擴(kuò)散成一均勻的粗線。然后使推片與載玻片成30度至40度角，自右向左，均勻的向前推，直至玻片的尾部，尾部應(yīng)結(jié)束在載玻片左側(cè)六分之一處。上述制作過(guò)程應(yīng)盡快完成，否則骨髓液凝固，將影響標(biāo)本質(zhì)量。要求厚薄適宜，體尾分明、邊緣整齊，血細(xì)胞分布均勻，膜長(zhǎng)度占載玻片2/3左右。

1.4 染色方法染液以覆蓋血膜或骨髓膜為宜，染色時(shí)間長(zhǎng)短與增生程度、膜厚度和室內(nèi)溫度有關(guān)，增生程度高、膜厚、室內(nèi)溫度低染色時(shí)間長(zhǎng)、反之則染色時(shí)間短。染色效果，一般以加入第二液后低倍鏡下清晰觀察到核漿分明后，流水沖洗干后鏡檢[4]。

1.5 結(jié)果分析計(jì)數(shù)結(jié)果進(jìn)行比較分析，成熟RBC內(nèi)檢出瘧原蟲為陽(yáng)性。平均100個(gè)成熟RBC內(nèi)檢出瘧原蟲個(gè)數(shù)為陽(yáng)性率。

2 結(jié)果

2.1 計(jì)數(shù)方法外周血、骨髓涂片，由2名具有豐富臨床檢驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)工作者分別計(jì)數(shù)10000個(gè)成熟RBC內(nèi)瘧原蟲出現(xiàn)的數(shù)目。取其均值分別計(jì)算出陽(yáng)性率。

2.2 瘧原蟲形態(tài)學(xué)診斷標(biāo)準(zhǔn)2種瘧原蟲形態(tài)特點(diǎn)參考中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部醫(yī)政司主編全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程(第3版)。

2.3 計(jì)數(shù)結(jié)果見表1。

表1 3例瘧疾患者骨髓片與血片顯微鏡檢查瘧原蟲陽(yáng)性率

3 討論

目前瘧疾的監(jiān)測(cè)方法包括病原學(xué)診斷即顯微鏡厚/薄血片的檢查、免疫學(xué)檢查即快速免疫診斷試條和病原基因診斷[5]即實(shí)時(shí)定量PCR法等。骨髓象報(bào)告單的填寫要求書寫是否見到寄生蟲[6]，但有關(guān)骨髓顯微鏡檢查法應(yīng)用較少，瘧疾患者骨髓片與血片瘧原蟲陽(yáng)性率比較更未見相關(guān)報(bào)導(dǎo)。本文3例瘧疾患者血片瘧原蟲檢出陽(yáng)性率4.32%～7.06%之間，骨髓片瘧原蟲檢出陽(yáng)性率為0.41%～0.92%之間，二者比較血片瘧原蟲檢出陽(yáng)性率明顯大于骨髓片瘧原蟲檢出陽(yáng)性率，而且血片有核細(xì)胞較少，成熟紅細(xì)胞分布均勻，瘧原蟲形態(tài)更加典型易辯認(rèn)。因此作者認(rèn)為在臨床上懷疑惡性瘧疾患者進(jìn)行骨髓檢查時(shí)，應(yīng)重點(diǎn)檢查血涂片，在血片發(fā)現(xiàn)瘧原蟲基礎(chǔ)上再仔細(xì)檢查骨髓是否有瘧原蟲，從而提高骨髓片瘧原蟲檢出陽(yáng)性率。

[1]Edward G,Carol B,Gregory LM,et al.Carotid artery stenosis: grayscale and Doppler ultrasound diagnosis-society of radiologists in ultrasound consensus conference[J].Ultrasound Q,2003,19(6): 190-198.

[2]葉云,李蓮.輸入性惡性瘧疾死亡一例附文獻(xiàn)分析[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2010,28(4):437.

[3]Brooks WH,McClure RR,Jones MR,et al.Carotid angiop lasty and Sten-ing versus carotid endarterectomy for treatment of asymptomatic carotid stenosis:a randomized trial in a community hospital [J].Neurosurgery,2004,54(2):318-325.

[4]張水生,劉秋蓮,熊玲,等.骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查質(zhì)控分析[J].實(shí)用臨床醫(yī)學(xué),2007,8(5):40.

[5]劉德全,馮曉平,楊恒林,等.我國(guó)惡性瘧原蟲對(duì)氯喹抗性的消長(zhǎng)[J].中國(guó)寄生蟲學(xué)與寄生蟲雜志,2005,23(1):27-31.

[6]陳方平.血液學(xué)檢驗(yàn)[M]北京:人民衛(wèi)生出版社,2007:31.

R446.11+1,R531.13,R382.3+1

B

1674-1129(2013)05-0503-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2013.05.042