宋曉娜 任景樂(lè) 祝貴華 呂良鵬 (山東省青島市畜牧獸醫(yī)研究所 266100)刁有祥 (山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技大學(xué) 山東 泰安)
新城疫(ND)是一種急性、高度傳染性疫病,主要侵害雞和火雞,亦可感染其它禽類(lèi)及人類(lèi),世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)將其列為應(yīng)呈報(bào)疫病[1]。目前普遍認(rèn)為,雞群HI抗體平均值在6log2以上才能有效地防制該病[2]。本試驗(yàn)通過(guò)不同免疫方式免疫雛雞,應(yīng)用HI方法檢測(cè)新城疫抗體水平和繪制抗體消長(zhǎng)規(guī)律曲線,比較各種免疫方式對(duì)雛雞新城疫抗體的免疫效果,以期為生產(chǎn)實(shí)踐提供科學(xué)的理論參考。
隨機(jī)挑選山東省某種雞場(chǎng)的1日齡的蛋雛雞150只。
96孔V型微量反應(yīng)板、微量振蕩器、1%紅細(xì)胞懸液、生理鹽水、微量移液器、注射器、抗凝劑、離心機(jī)、37℃恒溫箱、被檢雞血清等;雞新城疫低毒力活疫苗(Clone30株)購(gòu)自乾元浩生物股份有限公司;新城疫血凝抗原和陽(yáng)性血清購(gòu)自青島易邦生物工程有限公司。
1.3.1 試驗(yàn)分組及處理 將1日齡雛雞150只隨機(jī)分為5組,各組之間體重差異不顯著,每組30只。試驗(yàn)組通過(guò)不同的接種途徑進(jìn)行免疫接種新城疫疫苗,分別為滴鼻點(diǎn)眼組、飲水組、粗滴噴霧組和肌肉注射組,對(duì)照組不接種新城疫疫苗。在相同環(huán)境下飼養(yǎng)管理,每天記錄雛雞的精神狀況、糞便性狀及采食飲水情況等。
1.3.2 抗體檢測(cè) 1日齡雛雞150只,免疫前隨機(jī)抽取10只雛雞在第1、3、5、7、9d采血測(cè)定母源抗體水平,以確定試驗(yàn)組的免疫時(shí)間。試驗(yàn)組接種新城疫疫苗后,分別于14、19、24和29日齡時(shí)采血。按新城疫病毒微量血凝抑制試驗(yàn)(HI)方法進(jìn)行抗體檢測(cè),檢測(cè)雞只的抗體水平,根據(jù)平均值繪制抗體消減曲線。為了降低雛雞的應(yīng)激反應(yīng),采用雛雞頸靜脈采血的方法,分離制備血清。
雛雞新城疫母源抗體檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1和圖1。從表1中可以看出,雛雞新城疫母源抗體在第5日齡時(shí)達(dá)到高峰期,為8.4log2,之后隨著日齡的增長(zhǎng),新城疫母源抗體逐漸下降,平均每天下降1個(gè)滴度,直到第9日齡時(shí)抗體水平已下降到4.8log2,低于臨界值6log2。
表1 雛雞新城疫母源抗體水平的檢測(cè)結(jié)果 (log2)
圖1 不同日齡雛雞新城疫母源抗體消長(zhǎng)規(guī)律曲線
不同免疫方式對(duì)雛雞新城疫抗體檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表2和圖2。由表2可知,對(duì)照組與試驗(yàn)組相比,抗體檢測(cè)差異顯著(P<0.05)。四種免疫方式中以粗滴噴霧和滴鼻點(diǎn)眼方式所產(chǎn)生的免疫效果相對(duì)較好,而肌肉注射免疫次之,飲水免疫后所產(chǎn)生的抗體效價(jià)最低。
表2 不同免疫方式對(duì)雛雞新城疫抗體檢測(cè)結(jié)果 (log2)
圖2 不同免疫方式雛雞新城疫母源抗體消長(zhǎng)規(guī)律曲線
本試驗(yàn)通過(guò)檢測(cè)雛雞新城疫母源抗體水平的基礎(chǔ)上,可知在第5日齡時(shí)抗體水平達(dá)到高峰,以后隨著日齡的增加,抗體水平呈下降趨勢(shì),每天平均下降1個(gè)滴度,直到第9日齡時(shí)低于臨界值。應(yīng)用不同的免疫方式免疫后,從免疫效果來(lái)看,粗滴噴霧和滴鼻點(diǎn)眼的免疫效果最好。
[1] SAIF Y M. Disease of poultry [M]. 11thed. Ames:Iowa State University Press,2003:64-87.
[2] 劉事勇. 產(chǎn)蛋雞非典型新城疫的流行現(xiàn)狀及防治措施[J]. 中國(guó)家禽, 2005, 27(6): 30-31.