內(nèi)皮細胞膜微粒與腦血管疾病的相關性研究進展*

馮曉敏 ， 秦　超

(1．廣西醫(yī)科大學，南寧　530021；　2.廣西醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院，南寧　530021)

腦血管病是指由于栓塞和血栓形成導致的血管腔閉塞、血管破裂、血管壁損傷或通透性發(fā)生改變、凝血機制異常、血液黏度異?；蜓撼煞之惓Ｗ兓鸬哪X功能障礙，其發(fā)病率、病死率和致殘率均很高。目前，世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計全球腦血管疾病每年死亡人數(shù)為615萬，位列全球十大死因第二，僅次于心血管疾病。因此在對腦血管疾病進行有效治療的同時，積極開展對腦血管病的預防至關重要。目前可以用各種血液中的生物標志物來診斷感染、血脂異常、糖尿病和急性心肌梗死等，然而，沒有特定的血液標志物可用于腦血管疾病的預測或診斷。細胞膜微粒(microparticles, MPs)是在細胞激活或者凋亡的情況下從細胞膜脫落下來的0.1～1 μm的微小碎片[1]。循環(huán)血中的MPs可以來自于血小板、白細胞、紅細胞、內(nèi)皮細胞以及內(nèi)皮祖細胞等[ 2, 3]。大量研究已報道，腦血管病發(fā)生主要源自于內(nèi)皮功能障礙、血管損傷及炎癥反應[4]。其中內(nèi)皮功能障礙導致血栓形成是動脈粥樣硬化和腦卒中發(fā)生的一個關鍵因素，同時內(nèi)皮細胞的功能障礙是由內(nèi)皮細胞活化或凋亡的程度所決定的。目前已有研究報道循環(huán)血中的內(nèi)皮細胞膜微粒在內(nèi)皮功能障礙、血管損傷、炎癥反應和血栓形成中起著重要的作用，因此，推測循環(huán)血中的內(nèi)皮細胞膜微?？赡艹蔀槟X血管疾病的潛在的生物學標記物。本文將對當前關于循環(huán)血內(nèi)皮細胞膜微粒對腦血管病的研究做以下綜述。

內(nèi)皮細胞膜微粒(endothelial microparticles， EMPs)是內(nèi)皮細胞在多種刺激下激活或者凋亡時從細胞膜脫落到外周血中的小囊泡狀物質(zhì)[5]。1990年Hamilton等[6]將補體蛋白C5b-9和鈣離子載體A23187作用于臍靜脈內(nèi)皮細胞后，第一次用流式細胞儀檢測出一種<1 μm 的微粒，命名為 EMPs。保留其前體細胞特有的細胞膜、細胞質(zhì)和細胞核結(jié)構(gòu)，在大小和組成上與其他亞細胞結(jié)構(gòu)如凋亡體(1500～4000 nm)和外染色體(50～100 nm)不同[7-9]。許多研究發(fā)現(xiàn)，循環(huán)血中的內(nèi)皮細胞膜微粒的增加可見于多種疾病，如冠心病、多發(fā)性硬化、惡性高血壓、糖尿病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、抗磷脂抗體綜合征、血栓性血小板減少性紫癜、鐮狀細胞病和陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥(PNH)等[10-12]。隨后的研究發(fā)現(xiàn)在慢性阻塞性肺病、阿爾茲海默病等疾病中也有EMPs水平的增高[13, 14]。因此，內(nèi)皮細胞膜微?？赡艹蔀槎喾N疾病的新型生物學標志物，對疾病的預測、進展及預后有著重大的指導作用，進而可能為疾病的預防、治療及防治并發(fā)癥提供重要的線索。

1　EMPs的形成機制

研究表明，正常健康人體循環(huán)血中有少量的EMPs。在多種疾病狀態(tài)下，內(nèi)皮細胞膜受某些因素的刺激， 會增加EMPs釋放。這些刺激因素包括：①促炎癥刺激：TNF(腫瘤壞死因子)-α、LPS(在脂肪酸的存在下)、IL-1α、和CRP(C-反應蛋白)等[15, 16]；②凝血因子：凝血酶和纖溶酶原激活物抑制劑等[17]；③尿毒癥的毒素：P-甲酚[18]；④其他刺激血管的因素：如高血糖、血管緊張素II、生長因子剝奪和活性氧自由基(ROS)等[5, 19-22]。最近研究發(fā)現(xiàn)，在體內(nèi)血流剪切力與EMPs的形成也有關系，但在體外實驗中未見報道。當前在體外細胞培養(yǎng)的研究中已證實EMPs在內(nèi)皮細胞活化和凋亡時均可形成，然而，EMPs在體內(nèi)的形成機制仍待有力的證據(jù)證明。

1.1內(nèi)皮細胞活化EMPs形成首先需要細胞出芽形成膜小泡，當內(nèi)皮細胞激活時，胞質(zhì)中鈣離子濃度增加，使細胞膜脂類分布有關的酶的活性降低，改變膜脂正常的不對稱性，同時抑制磷酸酶，激活鈣蛋白酶，使踝蛋白降解導致細胞骨架結(jié)構(gòu)紊亂和重組，導致位于細胞膜內(nèi)層的磷脂酰絲氨酸暴露于細胞表面，細胞骨架水解，使EMPs釋放[23]。

1.2內(nèi)皮細胞凋亡凋亡細胞產(chǎn)生EMPs與激活時的機制有所不同，細胞凋亡的特點是細胞固縮及DNA的降解。囊泡的形成依賴于細胞骨架的肌動蛋白與肌球蛋白的相互作用，Capsase 3介導的Rho激酶I的激活能調(diào)節(jié)這個作用[24]。ROCK蛋白被與GTP結(jié)合的Rho蛋白激活，促進肌球蛋白輕鏈的磷酸化，肌球蛋ATP酶激活使肌球蛋白-肌動蛋白絲與細胞質(zhì)膜連接，且收縮力增加，使細胞收縮[25]，DNA降解，DNA片段從細胞核區(qū)域裂解到膜囊泡中，EMPs釋放。由此得知，細胞凋亡所形成的EMPs可能含有細胞核的成分。他汀類藥物能通過使Rho/ROCK途徑失活，抑制EMPs的產(chǎn)生[26]。

內(nèi)皮細胞膜微粒在內(nèi)皮細胞活化及凋亡時所形成的機制不同，這也表明其生物學意義可能也不盡相同。

2　 細胞膜微粒的檢測方法

目前，盡管循環(huán)內(nèi)皮細胞膜微粒已被證實在多種病理情況下的數(shù)量有明顯改變，很多研究也在體外實驗中提取分離出了EMPs,但是其可靠的識別和量化技術仍然是一個挑戰(zhàn)。

目前使用最多的方法是流式細胞學，先通過離心獲取乏血小板血漿，再按一定的倍數(shù)稀釋，加入高特異性熒光標記抗體結(jié)合微粒上特定的蛋白抗原成分(EMPs表面表達內(nèi)皮細胞膜表面抗原，如CD31、CD144 、CD51、CD54、CD106、CD146、CD105、CD62E和CD42等)或加入annexin V結(jié)合暴露的磷脂酰絲氨酸，通過檢測結(jié)合樣本的熒光強度即可達到對樣品中的微粒進行定量的目的。根據(jù)研究者不同的研究目的，選擇不同的特異性抗體，常用的抗體有：單抗CD144、 CD51、CD105、CD54、CD62E和CD106或組合抗體CD31/CD42b(內(nèi)皮細胞及血小板均表達CD31，而CD42b只在血小板表面表達)和CD31/AV等。EMPs的大小通常由1 μm 和2 μm的流式細胞磁珠進行校準。

在體外細胞培養(yǎng)的實驗中，內(nèi)皮細胞在凋亡和激活過程中釋放不同抗原表型的EMPs，誘導內(nèi)皮細胞凋亡時，表達結(jié)構(gòu)性標志的抗體(如 CD31、CD51、CD105)明顯升高(且CD31>CD105)，誘導內(nèi)皮細胞激活時，表達可誘導標志的抗體 (CD54、CD62E、CD106)明顯升高(且CD62E>CD54>CD106)，annexin V與暴露于細胞表面的磷脂酰絲氨酸結(jié)合，因此annexin V+ EMP在內(nèi)皮細胞凋亡及激活時都顯著升高。因此用流式細胞學法特異性抗體可了解內(nèi)皮細胞的功能狀態(tài)，以便為臨床提供有用的信息。

流式細胞術作為目前檢測微粒的一項重要技術，具有檢測設備簡單、周期短、可同時檢測微粒所表達的兩種或多種抗原成分及易于對微粒進行定量、能快速檢測大量的樣本等優(yōu)點。然而，這一技術也并非十全十美，在微粒的檢測過程中仍存在諸多不足。如EMPs非常小，所帶的表面抗原蛋白又是很小的一部分，因此，與抗體結(jié)合有一定的限制性，大大減少了被測定EMPs的數(shù)量。但目前為止，流式細胞術仍然是最普遍的檢測方法。其他檢測EMPs的方法還有：酶聯(lián)免疫吸附試驗、功能性分析、細胞微粒的氟硼二吡咯-馬來酰亞胺染色法、以細胞微粒蛋白質(zhì)組學為基礎的分析法、激光共聚焦顯微鏡和電子顯微鏡和納米微粒跟蹤分析等[27, 28]。

3　內(nèi)皮細胞膜微粒與腦血管疾病的關系

3.1EMPs與腦血管內(nèi)皮功能障礙 腦血管內(nèi)皮功能障礙為腦血管病發(fā)病的重要因素，EMPs又是內(nèi)皮細胞功能障礙的誘導因素之一，因此，研究EMPs對內(nèi)皮細胞的破壞機制和理解腦血管病的發(fā)生以及預防有重大的意義。

Brodsky等[29]首次報道EMPs可減弱乙酰膽堿介導的血管舒張，減少小鼠主動脈NO的釋放,增加O2-(超氧陰離子)的產(chǎn)生，且這些效應與EMPs的濃度呈正相關。NO在調(diào)節(jié)內(nèi)皮細胞各種功能中起著重要作用，內(nèi)皮NO合酶作用改變及NO生成減少及超氧化物的產(chǎn)生均導致內(nèi)皮功能障礙。可能機制為：EMPs通過使一氧化氮合酶解偶聯(lián)，使其功能從生產(chǎn)NO的酶變?yōu)楫a(chǎn)生超氧化物的NADPH氧化酶， 使NO減少，O2-和H2O2增加[20, 29]。EMPs也已被證明可以通過刺激內(nèi)皮細胞產(chǎn)生活性氧自由基(ROS)，進一步破壞內(nèi)皮細胞。

3.2EMPs與動脈粥樣硬化 目前認為動脈粥樣硬化的形成是由于血管內(nèi)皮功能障礙和炎癥反應相互作用引起的一個動態(tài)的、進展的病理過程，是血管炎癥后損傷的一種表現(xiàn)[30]。EMPs可導致血管內(nèi)皮細胞發(fā)生功能紊亂而分泌多種炎癥因子，同時在其表面表達黏附分子，可結(jié)合白細胞和單核細胞等并促進其向內(nèi)皮細胞的遷移，促進炎癥反應。當白細胞進入內(nèi)皮后會分泌更多的炎癥介質(zhì)，同時攝取氧化低密度脂蛋白，形成泡沫細胞，使病灶逐步發(fā)展，以致形成脂紋和纖維斑塊，最終導致粥樣硬化斑塊形成?，F(xiàn)有研究報道，從人動脈硬化斑塊衍生出的細胞膜微粒還可以通過促使內(nèi)皮功能失調(diào)及內(nèi)部斑塊的促凝活性和新生血管形成，進而促進動脈硬化的形成[31]，由此形成惡性循環(huán)，增加粥樣硬化的不穩(wěn)定性，最終導致斑塊破裂，發(fā)生腦血管事件。

3.3EMPs與急性缺血性腦卒中缺血性腦卒中為腦部血液循環(huán)障礙，腦組織缺血、缺氧所導致局限性腦組織缺血壞死或軟化、神經(jīng)功能受損的疾病，包括腦梗死及腦栓塞。EMPs促進缺血性腦卒中發(fā)病的可能機制為：內(nèi)皮細胞膜微粒的表面有大量的磷脂酰絲氨酸，這種陰離子磷脂是最有效的組織因子啟動劑，激活因子Ⅶa及凝血級聯(lián)反應，導致血栓的形成，進而發(fā)生缺血性腦卒中事件。

Simak等[32]研究報道，EMPs的數(shù)量在急性缺血性腦卒中的患者中，遠遠高于正常人及有腦血管病高危因素的人群，而且EMPs的數(shù)量與腦缺血的程度、面積及患者的臨床預后密切相關。隨后Keun-Hwa等[4]研究發(fā)現(xiàn)，CD62E+EMPs比其他表型的EMPs的數(shù)量對急性腦梗死體積及NIHSS評分有著更顯著的關聯(lián)。上文指出內(nèi)皮細胞激活時釋放CD62E+EMP，因此推測，在急性缺血性腦卒中誘導梗死后反應的主要因素來源于內(nèi)皮細胞的活化而非凋亡[33]，同時表明內(nèi)皮細胞的活化是一個病理過程，而非修復過程。隨后的動物實驗研究報道循環(huán)內(nèi)皮細胞膜微粒和內(nèi)皮祖細胞膜微粒的數(shù)量與糖尿病鼠的血糖濃度以及腦梗死面積呈正相關關系[3]，也證明了EMPs與腦梗死面積的關聯(lián)。以上研究表明，EMPs可能為判斷急性缺血性腦卒中患者的腦缺血程度、梗死面積及臨床預后的重要血液標記物。

3.4EMPs與顱內(nèi)外動脈狹窄 Keun-Hwa等[4]研究報道，有腦血管病致病危險因素的患者中，顱外動脈狹窄的患者CD62E+EMPs數(shù)量顯著升高，而顱內(nèi)動脈狹窄的患者CD31+/CD42-和CD31+/AV+EMPs數(shù)量顯著升高。因此，患者血液中的CD62E+EMPs與CD31+/CD42b-EMPs或CD31+/AV-EMPs的比例可用來區(qū)分顱外和顱內(nèi)動脈狹窄。從研究中也可看出，顱外動脈狹窄主要的病理改變?yōu)閮?nèi)皮細胞激活，而顱內(nèi)動脈狹窄主要為內(nèi)皮細胞凋亡。因此循環(huán)中的內(nèi)皮細胞膜微粒的多種不同的抗原表型在腦血管病中有著不同的生物學意義，可為及時的診斷、臨床風險的評估、治療方式的選擇及預后的評估有著重要的指導意義。

3.5EMPs與血管重塑血管結(jié)構(gòu)的改變即血管重塑是高血壓病、糖尿病、動脈粥樣硬化的重要特征[34-36]。當血管腔橫斷面積變小及血管壁增厚時，這種重塑被稱為向內(nèi)重塑，其可以用血管壁層和管腔的面積比的增加來反映[34, 37]。 腦動脈血管的向內(nèi)重塑可能會增加缺血性腦卒中的風險及腦部的缺血性損害。最近的一項研究展示，升高的內(nèi)皮細胞膜微粒與頸部的向內(nèi)重塑可能存在正相關的關系[38]。也有研究發(fā)現(xiàn), 人乳脂球表皮生長因子VIII(MFG-E8)可作為動脈壁老化、向內(nèi)重塑的生物標志物， 而MFG-E8正是內(nèi)皮細胞膜微粒重要的組成部分。但目前循環(huán)細胞膜微粒與大腦動脈血管重塑的潛在機制仍然未明確?？赡軝C制為：一氧化碳合酶(eNOS)在血管中扮演著重要角色，并且可以調(diào)節(jié)血管的大部分功能[39，40]。未耦合的一氧化氮合酶可以導致內(nèi)皮功能失調(diào)以及高血壓或動脈粥樣硬化[41]，可使血管內(nèi)向重塑。

3.6EMPs與治療 目前有研究表明，將與正常細胞膜微粒共培養(yǎng)的內(nèi)皮祖細胞注射到缺血性腦卒中的小鼠后，減少了小鼠的缺血性損傷，而這種效益卻在與糖尿病小鼠中提取的MPs共培養(yǎng)的EPCs中減少或消失。因為來自于正常小鼠的循環(huán)內(nèi)皮細胞膜微?？梢酝ㄟ^PPARα/NF-kB/Akt路徑促進內(nèi)皮祖細胞的分化以及血管再生[42]。也有研究表明,激活血小板及血小板微粒含有多種至關重要的生長因子和營養(yǎng)因子,并可能成為受損神經(jīng)修復和血管再生的新的治療藥物。可能機制為：血小板及其微顆?？梢酝ㄟ^刺激內(nèi)源性干細胞(eNSC)的增殖、遷移和分化促進神經(jīng)發(fā)生,通過從內(nèi)皮細胞和星形膠質(zhì)細胞釋放的神經(jīng)源性信號刺激血管生成。表明血小板微粒具有增強血管再生、神經(jīng)發(fā)生和神經(jīng)保護的作用，可改善中風后的功能障礙[43]。EMPs是否有同樣的效益，還有待于將來的研究所證實。因此細胞膜微粒有可能成為治療腦血管疾病的一個靶點[44]。這為腦血管病的治療又提出了一個新的方案，但如何應用于臨床之中，還有待于進一步的研究。

綜上所述，一方面，EMPs可能誘導內(nèi)皮細胞功能損害，另一方面，也是有內(nèi)皮細胞損害而形成和釋放的產(chǎn)物。一方面，內(nèi)皮細胞膜微粒可能誘導腦血管疾病，另一方面，也可能是由腦血管疾病應答所產(chǎn)生的。EMPs在內(nèi)皮功能紊亂、炎癥反應、血栓形成及血管生成中起著重要的作用，研究也表明EMPs在腦動脈粥樣硬化形成、急性缺血性腦卒中、腦血管狹窄及腦血管重塑中扮演著重要的角色。EMPs可能成為預測腦血管疾病的新的生物學標記物，對腦血管病的預防、治療及評估預后有著重要的臨床意義。同時，生理狀態(tài)下的EMPs可促進內(nèi)皮祖細胞的分化，可能成為治療腦血管病的新的治療措施。但目前EMPs對腦血管損害的機制還未完全明確，如何將其應用于腦血管疾病的診療過程中還有待于今后的進一步研究。

1Mause S F，C Weber.Microparticles: protagonists of a novel communication network for intercellular information exchange[J]. Circ Res, 2010，107(9): 1047

2Martinez M C, S Tual-Chalot, D Leonetti,etal.Microparticles:targets and tools in cardiovascular disease [J]. Trends Pharmacol Sci, 2011，32(11): 659

3Chen J, S Chen, Y Chen,etal.Circulating endothelial progenitor cells and cellular membrane microparticles in db/db diabetic mouse: possible implications in cerebral ischemic damage [J]. Am J Physiol Endocrinol Metab, 2011，301(1): E62

4Jung K H, K Chu, S T Lee,etal.Circulating Endothelial Microparticles as a Marker of Cerebrovascular Disease [J]. Annals of Neurology,2009，66(2): 191

5Jimenez J J, W Jy, L M Mauro,etal.Endothelial cells release phenotypically and quantitatively distinct microparticles in activation and apoptosis [J]. Thromb Res,2003，109(4): 175

6Hamilton K K, R Hattori, C T Esmon,etal.Complement proteins C5b-9 induce vesiculation of the endothelial plasma membrane and expose catalytic surface for assembly of the prothrombinase enzyme complex [J]. J Biol Chem,1990， 265(7)：3809

7Simons M，G Raposo.Exosomes-vesicular carriers for intercellular communication [J]. Curr Opin Cell Biol, 2009，21(4): 575

8Thery C, M Ostrowski, E Segura.Membrane vesicles as conveyors of immune responses [J]. Nature Reviews Immunology, 2009，9(8): 581

9Hristov M, W Erl, S Linder,etal.Apoptotic bodies from endothelial cells enhance the number and initiate the differentiation of human endothelial progenitor cells in vitro [J]. Blood, 2004，104(9): 2761

10Bueno Jimenez C.Circulating microparticles from patients with coronary artery disease cause endothelial dysfunction [J]. Rev Esp Cardiol (Engl Ed), 2012， 65(4): 389

11Parker B, A Zaki, S Haque,etal.Endothelial Microparticles As a Biomarker for Endothelial Dysfunction in Active Systemic Lupus Erythematosus [J]. Arthritis and Rheumatism, 2012，64(s 10): 270

12Tramontano A F, R Lyubarova, J Tsiakos,etal.Circulating endothelial microparticles in diabetes mellitus [J]. Mediators Inflamm, 2010，2010: 250476

13Takahashi T, S Kobayashi, N Fujino,etal.Increased circulating endothelial microparticles in COPD patients: a potential biomarker for COPD exacerbation susceptibility [J]. Thorax, 2012，67(12): 1067

14Xue S, X Cai, W Li,etal.Elevated plasma endothelial microparticles in Alzheimer's disease [J]. Dement Geriatr Cogn Disord, 2012，34(3-4): 174

15Brown M D, D L Feairheller, S Thakkar,etal.Racial differences in tumor necrosis factor-alpha-induced endothelial microparticles and interleukin-6 production [J]. Vasc Health Risk Manag,2011，7: 541

16Devaraj S, P R Kumaresan，I Jialal.C-Reactive Protein Induces Release of Both Endothelial Microparticles and Circulating Endothelial Cells In Vitro and In Vivo: Further Evidence of Endothelial Dysfunction [J]. Clinical Chemistry, 2011，57(12): 1757

17Simoncini S, M S Njock, S Robert,etal.TRAIL/Apo2L mediates the release of procoagulant endothelial microparticles induced by thrombin in vitro: a potential mechanism linking inflammation and coagulation [J]. Circ Res, 2009， 104(8): 943

18Faure V, L Dou, F Sabatier,etal.Elevation of circulating endothelial microparticles in patients with chronic renal failure [J]. J Thromb Haemost, 2006，4(3):566

19Terrisse A D, N Puech, S Allart,etal.Internalization of microparticles by endothelial cells promotes platelet/endothelial cell interaction under flow [J]. Journal of Thrombosis and Haemostasis,2010，8(12):2810

20Burger D, A C Montezano, N Nishigaki,etal. Endothelial Microparticle Formation by Angiotensin II Is Mediated via Ang II Receptor Type I/NADPH Oxidase/Rho Kinase Pathways Targeted to Lipid Rafts [J]. Arteriosclerosis Thrombosis and Vascular Biology,2011，31(8):1898

21Simak J, K Holada, J G Vostal.Release of annexin V-binding membrane microparticles from cultured human umbilical vein endothelial cells after treatment with camptothecin [J]. BMC Cell Biol,2002，3:11

22Szotowski B，S Antoniak, P Goldin-Lang,etal.Antioxidative treatment inhibits the release of thrombogenic tissue factor from irradiation- and cytokine-induced endothelial cells [J]. Cardiovasc Res, 2007，73(4): 806

23Zwaal R F A, P Comfurius, E M Bevers.Surface exposure of phosphatidylserine in pathological cells [J]. Cellular and Molecular Life Sciences, 2005，62(9): 971

24Sebbagh M, C Renvoize, J Hamelin,etal.Caspase-3-mediated cleavage of ROCK I induces MLC phosphorylation and apoptotic membrane blebbing [J]. Nat Cell Biol, 2001，3(4): 346

25Emmert D A, J A Fee, Z M Goeckeler,etal.Rho-kinase-mediated Ca2+-independent contraction in rat embryo fibroblasts [J]. Am J Physiol Cell Physiol, 2004， 286(1):C8

26Tramontano A F, J O'Leary, A D Black,etal.Statin decreases endothelial microparticle release from human coronary artery endothelial cells: implication for the Rho-kinase pathway [J]. Biochem Biophys Res Commun, 2004， 320(1):34

27Banff C，Brioschi M, Wait R,etal.Proteome of endothelial cell-derivedprocoagulant mieropartieles[J]．Protcemies，2005，5(17)：4443

28Horstman L L, W Jy, J J Jimenez,etal.New horizons in the analysis of circulating cell-derived microparticles [J]. Keio J Med, 2004,53(4):210

29Brodsky S V, F Zhang, A Nasjletti,etal.Endothelium-derived microparticles impair endothelial function in vitro [J]. Am J Physiol Heart Circ Physiol, 2004,286(5):H1910

30Montero-Vega M T.The inflammatory process underlying atherosclerosis [J]. Crit Rev Immunol, 2012,32(5):373

31Leroyer A S, P E Rautou, J S Silvestre,etal.CD40 ligand+ microparticles from human atherosclerotic plaques stimulate endothelial proliferation and angiogenesis a potential mechanism for intraplaque neovascularization [J]. J Am Coll Cardiol, 2008,52(16):1302

32Simak J, M P Gelderman, H Yu,etal.Circulating endothelial microparticles in acute ischemic stroke: a link to severity, lesion volume and outcome [J]. J Thromb Haemost,2006,4(6):1296

33Williams J B, E C Jauch, C J Lindsell,etal.Endothelial microparticle levels are similar in acute ischemic stroke and stroke mimics due to activation and not apoptosis/necrosis [J]. Acad Emerg Med, 2007,14(8):685

34Schiffrin E L.Vascular remodeling in hypertension: mechanisms and treatment [J]. Hypertension, 2012,59(2):367

35Endemann D H, Q Pu, C De Ciuceis,etal.Persistent remodeling of resistance arteries in type 2 diabetic patients on antihypertensive treatment [J]. Hypertension, 2004,43(2):399

36Birnbaum Y, M C Fishbein, H Luo,etal.Regional remodeling of atherosclerotic arteries: a major determinant of clinical manifestations of disease [J]. J Am Coll Cardiol, 1997,30(5):1149

37Pires P W, C Deutsch, J L McClain,etal.Tempol,a superoxide dismutase mimetic, prevents cerebral vessel remodeling in hypertensive rats [J]. Microvasc Res, 2010, 80(3):445

38Chironi G N, A Simon, C M Boulanger,etal.Circulating microparticles may influence early carotid artery remodeling [J]. Journal of Hypertension, 2010, 28(4):789

39Sessa W C.Molecular control of blood flow and angiogenesis: role of nitric oxide [J].J Thromb Haemost, 2009, 7(s1): 35

40Huang P L.eNOS, metabolic syndrome and cardiovascular disease [J]. Trends Endocrinol Metab, 2009, 20(6):295

41Toda N, K Ayajiki, T Okamura.Cerebral blood flow regulation by nitric oxide: recent advances [J]. Pharmacol Rev, 2009, 61(1):62

42Benameur T, S Tual-Chalot, R Andriantsitohaina,etal.Pparalpha Is Essential for Microparticle-Induced Differentiation of Bone Marrow-Derived Endothelial Progenitor Cells and Angiogenesis [J]. Hypertension, 2009, 54(5):1169

43Hayon Y, E Shai, D Varon,etal.The Role of Platelets and their Microparticles in Rehabilitation of Ischemic Brain Tissue [J]. Cns & Neurological Disorders-Drug Targets, 2012, 11(7):921

44Tual-Chalot S, C Guibert, B Muller,etal.Circulating Microparticles from Pulmonary Hypertensive Rats Induce Endothelial Dysfunction [J]. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine, 2010, 182(2):261