多發(fā)性骨髓瘤血漿suPAR水平的臨床探討

呂濤 郭淑利 徐曉燕

選取42例多發(fā)性骨髓瘤患者進(jìn)行suPAR水平分析，探討其作用，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2009年1月至2012年12月42例多發(fā)性骨髓瘤患者設(shè)定為研究組，并選取42例健康者作為對(duì)照組，研究組患者病情均為初發(fā)，其中男25例、女17例，年齡41～71歲，平均65歲;均符合判定標(biāo)準(zhǔn)，其中IgA患者為13例，IgG患者為16例，IgM患者為7例，不分泌型患者為6例?；颊呔鶎?shí)施VAD治療方案給予化療，且應(yīng)用400～800 mg/d沙利度胺，部分患者給予α-干擾素300萬U，每隔一日給予1次治療。兩組人員在性別、年齡方面都不具有差異性，可實(shí)施對(duì)比。

1.2 方法 suPAR檢測(cè)［1］:兩組都于清晨空腹抽取3 ml靜脈血，以EDTA實(shí)施抗凝，進(jìn)行30 min離心，轉(zhuǎn)速保持在1000 r/min，將血漿進(jìn)行分離，于零下70℃保存。營(yíng)養(yǎng)ELISA法、uPAR試劑盒對(duì)具體suPAR值進(jìn)行檢測(cè)。每份待測(cè)樣本均取用25 μl加入至100 μlRD6P標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液中稀釋5倍。且加入200 μl辣根過氧化物酶標(biāo)記過的uPAR抗體液，于室溫下持續(xù)孵育2 h。200 μl底物溶液，室溫下持續(xù)孵育0.5 h。加入50 μl終止液，于30 min內(nèi)將OD450nm值給予測(cè)定，每孔均需測(cè)定兩次。

在此同時(shí)需要測(cè)定患者的外周血Hb、血沉、肌酐、血鈣以及乳酸脫氫酶等。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有測(cè)定數(shù)據(jù)均應(yīng)用SPSS 14.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，以表示，t、χ2進(jìn)行檢驗(yàn)。以Spearman對(duì)suPAR水平與外周血Hb、血沉、血鈣、乳酸脫氫酶、肌酐等關(guān)系實(shí)施相關(guān)性分析。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

兩組患者血漿suPAR對(duì)比，研究組suPAR值為(4.32±1.56)ng/ml，對(duì)照組 suPAR 值為(1.82 ±0.35)ng/ml，兩組數(shù)值差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜0.05。研究組IgM型類患者血漿suPAR數(shù)值為(6.23±3.69)ng/ml，不分泌型為(6.17±1.56)ng/ml、IgG型為(4.03±1.95)ng/ml以及 IgA 型為(3.52±0.74)ng/ml，其中，研究組患者IgG型及不分泌型血漿suPAR和對(duì)照組IgG型(3.61±0.68)ng/ml及不分泌型血漿suPAR(5.28±1.06)ng/ml，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。研究組血漿suPAR各類型間并不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

血漿suPAR水平及其他臨床指標(biāo)相關(guān)性顯示，血漿su-PAR水平和Hb具有負(fù)相關(guān)性(r=-0.629，P＜0.01);和肌酐、血沉具有正相關(guān)性(r=0.736、0.521，P＜0.05，＜0.05);和臨床分期具正相關(guān)性(r=0.541，P＜0.05)。和血鈣、乳酸脫氫酶沒有相關(guān)性。

3 討論

相關(guān)研究結(jié)果表明，uPAR的表達(dá)過程主要在單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等細(xì)胞表面進(jìn)行，在臨床常見的一些非造血細(xì)胞當(dāng)中，如血管內(nèi)皮細(xì)胞的表面都具有非常明顯的表達(dá)性。另?yè)?jù)文獻(xiàn)報(bào)道稱，在腫瘤細(xì)胞的表面也存在數(shù)量極大的uPAR，且具有表達(dá)功能，它不僅僅對(duì)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、侵襲和轉(zhuǎn)移能力具有良好的控制作用，且和患者預(yù)后有著非常密切的關(guān)系。通過相關(guān)研究后顯示，原始惡性漿細(xì)胞uPA、uPAR，蛋白水解系統(tǒng)在經(jīng)過活化處理后，可以充分參與到骨基質(zhì)的降解過程中。纖溶酶原在多發(fā)性骨髓瘤血漿腫細(xì)胞表面被徹底激活后會(huì)有纖溶酶出現(xiàn)，導(dǎo)致細(xì)胞呈現(xiàn)蛋白水解活性，參與到骨基質(zhì)非膠原蛋白的消除過程中。而且纖溶酶可以對(duì)基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)進(jìn)行有效激活，經(jīng)水解Ⅰ型膠原蛋白對(duì)骨質(zhì)進(jìn)行全面重塑。uPA系統(tǒng)能夠?qū)Ω渭?xì)胞生長(zhǎng)因子起到明顯的活化作用，對(duì)成骨細(xì)胞分泌IL-11這一過程具有積極的促進(jìn)作用，且IL-11對(duì)破骨細(xì)胞具有促進(jìn)生成作用?；蛘哒fuPA及uPAR值的表達(dá)，表明骨髓瘤細(xì)胞和骨髓微環(huán)境具有相互關(guān)系，對(duì)骨基質(zhì)降解、骨髓瘤細(xì)胞浸潤(rùn)和歸巢等產(chǎn)生的影響較大。在骨髓微環(huán)境當(dāng)中IL-6的作用非常重要，對(duì)瘤細(xì)胞繁殖能力具有一定的影響。

外周血當(dāng)中的suPAR水平出現(xiàn)于腫瘤中很多情況都認(rèn)為和患者不良預(yù)后具有一定的關(guān)系。通過研究發(fā)現(xiàn)研究組患者血漿suPAR值出現(xiàn)顯著上升，和正常對(duì)照組對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)果表明，各亞型之間的多發(fā)性骨髓瘤患者其suPAR值并差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，作者認(rèn)為和研究患者例數(shù)比較少具有一定關(guān)系。suPAR水平和疾病的分期、肌酐、血沉、漿細(xì)胞等都具有一定的相關(guān)性(P＜0.05)，和血鈣、乳酸脫氫酶數(shù)值并不存在相關(guān)性，表明suPAR水平和多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞侵襲能力具有一定的相關(guān)性。Rigolin等［2］人在單變量及多變量的生存研究中發(fā)現(xiàn)，suPAR對(duì)多發(fā)性骨髓瘤患者的生存有獨(dú)立影響作用。suPAR所具有功能并不明確，通常人們認(rèn)為主要通過對(duì)漿細(xì)胞及骨髓基質(zhì)的黏附進(jìn)行抑制后給予表達(dá):大部分uPAR能夠裂解出suPAR，瘤細(xì)胞表面uPAR量會(huì)明顯降低。suPAR和uPAR可以競(jìng)相與玻璃黏蛋白、β整合蛋白發(fā)生結(jié)合反應(yīng)。所以suPAR值含量高通常情況下表示骨髓瘤細(xì)胞和骨髓基質(zhì)的黏附性正呈現(xiàn)逐步降低的發(fā)展態(tài)勢(shì)，致使其容易出現(xiàn)擴(kuò)散，導(dǎo)致髓外浸潤(rùn)。而且uPAR對(duì)血管新生有影響作用，MMP12能夠降低這種效果，對(duì)MMP12給予抑制能夠恢復(fù)此作用［3］。高水平suPAR能夠顯示病癥血管新生能力降低，需應(yīng)用其他方法進(jìn)行治療。

［1］ 汪洪毅.多發(fā)性骨髓瘤患者血漿suPAR變化的臨床意義．山東醫(yī)藥，2007，47(34):73-74．

［2］ 崔中光.多發(fā)性骨髓瘤患者血漿suPAR水平的臨床研究．中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志，2008，16(1):197-199．

［3］ 崔為發(fā).IL-2、IL-6及其受體與多發(fā)性骨髓瘤的研究．山東醫(yī)藥，2000，40(6):1-2．