HPLC 法測(cè)定對(duì)乙酰氨基酚緩釋片中對(duì)乙酰氨基酚的含量

顧海霞

江蘇省啟東市中醫(yī)院藥劑科，江蘇 啟東 226200

對(duì)乙酰氨基酚緩釋片為上海強(qiáng)生制藥有限公司生產(chǎn)的治療感冒常用藥物，原標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)乙酰氨基酚的含量測(cè)定為滴定法，操作費(fèi)時(shí)費(fèi)力，我們用高效液相法 (HPLC)測(cè)定本品內(nèi)的對(duì)乙酰氨基酚的含量，取得良好效果。

1 儀器、試劑和樣品

高效液相色譜儀系統(tǒng)：所含儀器包括Waters 515高效液相色譜儀 (美國(guó)Waters公司制造);高壓泵 (型號(hào)為：P200);紫外檢測(cè)器 (型號(hào)為：Waters 2487);色譜柱 (型號(hào)為：Hanbang C18;規(guī)格為：200mm×4.6mm×5μm;B3500S-MT型超聲波清洗器 (上海必能信儀器有限公司);BP211D電子分析天平 (德國(guó)賽多利斯公司)，對(duì)乙酰氨基酚 (100018-200107)對(duì)照品由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件［1］色譜柱型號(hào) Hanbang C18(規(guī)格為：200mm×4.6mm×5μm);流動(dòng)相：甲醇-水 (體積比為40∶60);使用前以0.45μM微孔濾膜減壓過濾，檢測(cè)波長(zhǎng)為UV210nm;流速為0.5ml/min，理論塔板數(shù)以對(duì)乙酰氨基酚峰值計(jì)算大于3000。

2.2 對(duì)照品溶液的制備 分別精密稱取對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品適量，加乙醇溶解并用水定量稀釋成每1ml中約含0.5 mg對(duì)乙酰氨基酚溶液，作為對(duì)照品溶液。

2.3 線性關(guān)系考察 精密稱取對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品適量，用乙醇配制成含對(duì)乙酰氨基酚1.25 mg/ml的對(duì)照品混合溶液。精密量取對(duì)照品溶液 2.0ml、5.0ml、10.0ml、20.0ml、25.0ml置25ml量瓶中，分別加水至刻度，搖勻。分別精密量取20 μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，以峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)樣質(zhì)量為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。對(duì)乙酰氨基酚回歸方程：Y=2E+05X-1E+08，相關(guān)系數(shù)γ=0.9995，對(duì)乙酰氨基酚在2.50～31.25 μg具有良好的線性關(guān)系。

2.4 精密度試驗(yàn) 取對(duì)照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣6次，每次20 μl，對(duì)乙酰氨基酚峰面積的RSD為0.24%。表明儀器精密度良好。

2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取同一供試品溶液，間隔一定時(shí)間測(cè)定1次，共測(cè)24h，對(duì)乙酰氨基酚峰面積的RSD為0.35%(n=6)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.6 重現(xiàn)性試驗(yàn) 取同批號(hào)樣品5份，按供試品溶液的制備方法制備，測(cè)定，計(jì)算。結(jié)果對(duì)乙酰氨基酚的平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為99.5%，RSD分別為0.39%(n=5)。

2.7 加樣回收率試驗(yàn) 取已知含量的對(duì)乙酰氨基酚緩釋片，研細(xì)，精密稱取適量 (約相當(dāng)于對(duì)乙酰氨基酚0.06 g)，稱取 6份，分別加入對(duì)乙酰氨基酚 0.0472mg、0.0698mg、0.0935 mg，按供試品溶液制備方法制備，測(cè)定，計(jì)算回收率。結(jié)果對(duì)乙酰氨基酚的平均回收率分別為99.6%，RSD 分別為0.59%(n=6)。

2.8 供試品溶液的制備 取對(duì)乙酰氨基酚緩釋片，研細(xì)，精密稱取適量，約相當(dāng)于對(duì)乙酰氨基酚0.125 g，置具塞三角瓶中，精密加入乙醇50ml，振搖使溶解，濾過，精密量取續(xù)濾液10ml，置50ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

2.9 樣品測(cè)定 取對(duì)乙酰氨基酚緩釋片，按上述條件測(cè)定，結(jié)果對(duì)乙酰氨基酚質(zhì)量分?jǐn)?shù)在95.9% ～101.1%(n=6)。

3 討論

3.1 對(duì)乙酰氨基酚緩釋片原檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)中，對(duì)乙酰氨基酚的檢測(cè)方法是用亞硝酸鈉滴定液進(jìn)行重氮化滴定，操作過程較為繁瑣，現(xiàn)改為高效液相法，具有快速、穩(wěn)定、重現(xiàn)性好的特點(diǎn)。

3.2 取同一批號(hào)的樣品，用滴定法和HPLC法分別對(duì)對(duì)乙酰氨基酚含量進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果分別為 99.5%、99.1%，RSD分別為1.16%、0.37%(n=6)，測(cè)定結(jié)果顯示，兩種方法結(jié)果幾乎一致。

［1］靳建中，王占林.高效液相法測(cè)定氨酚啡啉片中對(duì)乙酰氨基酚、鹽酸偽麻黃堿和咖啡因的含量［J］.藥物分析雜志，1997，17(6)：26.