黑色素瘤相關(guān)抗原(MAGE)基因在肺癌中的表達(dá)及意義

李廣旭 宋平平 綜述 張百江 審校

肺癌是最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,其發(fā)病率高,預(yù)后差,與肺癌易發(fā)生血行轉(zhuǎn)移和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)[1].淋巴轉(zhuǎn)移和血行轉(zhuǎn)移是肺癌的主要轉(zhuǎn)移方式,淋巴結(jié)及血行轉(zhuǎn)移狀況對(duì)于肺癌的準(zhǔn)確分期、治療及預(yù)后具有重要的意義[2].但因微轉(zhuǎn)移灶不易被常規(guī)的檢查和診斷方法發(fā)現(xiàn),使肺癌分期不準(zhǔn)確,甚至耽誤了患者的治療.因此,探尋更有優(yōu)勢(shì)的微轉(zhuǎn)移檢測(cè)指標(biāo)和方法極為重要.作為一種高度腫瘤特異性相關(guān)基因,黑色素瘤相關(guān)抗原基因被認(rèn)為是目前最佳的微轉(zhuǎn)移檢測(cè)指標(biāo),本文將就其在肺癌微轉(zhuǎn)移中的研究進(jìn)展做一綜述.

1 黑色素瘤相關(guān)抗原基因(melanoma associated antigens genes, MAGE)基因的發(fā)現(xiàn)及結(jié)構(gòu)

MAGE基因是一種原癌基因,屬于腫瘤-睪丸抗原(cancer-testis antigen, CTA)家族,首先從黑色素瘤中發(fā)現(xiàn),目前發(fā)現(xiàn)的MAGE基因家族成員超過(guò)60個(gè),MAGE基因家族的最大共同特征是其氨基酸序列存在一個(gè)MAGE同源結(jié)構(gòu)域(MAGE homology domain, MHD).MHD一般含165個(gè)-171個(gè)氨基酸殘基,根據(jù)其氨基酸排列進(jìn)行的結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)表明,它可能含有4個(gè)α螺旋和5個(gè)β片層結(jié)構(gòu),但是其真實(shí)結(jié)構(gòu)及功能目前還不是很清楚.根據(jù)MAGE基因在染色體上具體位置的不同及其表達(dá)模式的不同,MAGE基因被分為兩大亞家族,分別為MAGE-I類(lèi)抗原和MAGE-II類(lèi)抗原,MAGE-I類(lèi)抗原屬于癌睪丸抗原中的一個(gè)大家族,其又可分為MAGE-A、B和C三個(gè)亞家族,它們主要分布在生殖細(xì)胞和滋養(yǎng)細(xì)胞;MAGE-II類(lèi)抗原包括MAGE-D、神經(jīng)細(xì)胞生長(zhǎng)抑制因子抗原、網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)刺激素抗原等,主要表達(dá)于神經(jīng)組織和其它正常組織.在MAGE-I類(lèi)抗原中MAGE-A具有嚴(yán)格的腫瘤特異性表達(dá)模式,可編碼腫瘤特異性抗原多肽,其編碼的蛋白產(chǎn)物能被細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(cytotoxic T lymphocyte,CD8+)識(shí)別并誘導(dǎo)免疫應(yīng)答,常被作為腫瘤診斷和免疫治療的重要靶分子,因此成為腫瘤免疫治療研究的熱點(diǎn).

2 MAGE基因的調(diào)控及表達(dá)

2.1 MAGE基因的調(diào)控機(jī)制 MAGE基因在除了睪丸和胎盤(pán)組織之外的正常組織中幾乎不表達(dá),但在腫瘤組織中卻存在高表達(dá)現(xiàn)象,目前在肺癌、肝癌、腎癌、黑色素瘤等腫瘤中均檢測(cè)到MAGE基因的表達(dá).因其腫瘤特異性,對(duì)其研究逐漸受到重視.

目前認(rèn)為MAGE基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制主要有兩種:①M(fèi)AGE基因是一種正?；?甲基化控制其表達(dá),基因調(diào)控方式中便包括DNA甲基化這一項(xiàng).通常MAGE基因在人類(lèi)正常體細(xì)胞中高度甲基化,而在某些惡性腫瘤細(xì)胞和胚胎細(xì)胞中表現(xiàn)為去甲基化.因?yàn)楸籇NA甲基化所調(diào)控的CpG島(CpG island)或富含CpG的區(qū)域控制著大部分的腫瘤睪丸抗原基因啟動(dòng)子機(jī)MAGE-A基因,所以抑制轉(zhuǎn)錄主要是通過(guò)防止轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合和增加甲基化-CpG結(jié)合區(qū)域蛋白(methylation-CpG binding region of proteins, MBDs)來(lái)實(shí)現(xiàn)[3].②MAGE-A基因的表達(dá)調(diào)控與組蛋白的乙?；饔糜嘘P(guān).組蛋白乙酰化可以從以下兩方面促進(jìn)基因轉(zhuǎn)錄:轉(zhuǎn)錄活化因子能識(shí)別氨基末端乙?；暮诵慕M蛋白,松弛染色質(zhì),暴露核小體DNA,利于轉(zhuǎn)錄因子與之結(jié)合;組蛋白乙?；筛蓴_組蛋白氨基末端與抑制因子之間的相互作用.Wischnewski等[4]通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)、Western雜交、免疫細(xì)胞化學(xué)染色和瞬時(shí)轉(zhuǎn)染分析等方法,證實(shí)了啟動(dòng)子的去甲基化和組蛋白乙?；@兩種方法均可調(diào)控人腫瘤細(xì)胞MAGE-A基因的表達(dá).Yanagawa等[5]應(yīng)用RT-PCR技術(shù)對(duì)比分析了非小細(xì)胞肺癌患者的癌組織及非癌組織中MAGE-A1和MAGE-A3啟動(dòng)子去甲基化和其表達(dá)的關(guān)系,結(jié)果在90%表達(dá)MAGE-A1的癌組織樣本中檢測(cè)到MAGE-A1啟動(dòng)子的去甲基化,在92.3%表達(dá)MAGE-A3的癌組織樣本中檢測(cè)到MAGE-A3啟動(dòng)子的去甲基化,統(tǒng)計(jì)分析顯示MAGE基因啟動(dòng)子去甲基化與MAGE基因表達(dá)之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,MAGE基因啟動(dòng)子去甲基化是誘發(fā)MAGE基因的表達(dá)首要原因.

2.2 MAGE基因在肺癌的表達(dá) 基于MAGE基因腫瘤表達(dá)特異性及抗原特異性,近年來(lái)MAGE基因與肺癌的相關(guān)研究逐步受到重視.Shin等[6]提取133例患者肺組織及痰液中的RNA,應(yīng)用RT-PCR技術(shù)行MAGE基因檢測(cè),發(fā)現(xiàn)MAGE A1-A6在肺癌組織中的陽(yáng)性率為87.5%,在肺癌患者的痰液中的陽(yáng)性率為50.8%;40例MAGE基因陽(yáng)性的病例中,33例被診斷患有肺癌,7例為肺良性疾病,但這7例中6例出現(xiàn)了MAGE基因高度甲基化保護(hù),因此可以說(shuō)明MAGE的陽(yáng)性表達(dá)提示著肺癌細(xì)胞或癌前細(xì)胞的存在.Karimi等[7]采用RT-PCR方法檢測(cè)MAGE-A1、MAGE-A2、MAGE-A3/6、MAGE-A4、MAGE-A12基因在肺癌中的表達(dá),結(jié)果在58個(gè)腫瘤樣本中,至少有1種MAGE基因表達(dá)的樣本數(shù)為37個(gè),其中MAGE-A4的表達(dá)率最高.Kim等[8]應(yīng)用RT-PCR方法檢測(cè)MAGE A1-6基因在53例疑似肺癌患者組織樣本中的表達(dá),結(jié)果MAGE基因在肺癌中的敏感性、特異性、準(zhǔn)確性、陽(yáng)性和陰性預(yù)測(cè)值分別為83%、58%、77%、87%和55%.這證明MAGE基因與肺癌具有高度密切性.Yanagawa等[5]應(yīng)用RT-PCR技術(shù)對(duì)67例非小細(xì)胞肺癌患者的癌組織及非癌組織進(jìn)行MAGE-A1和MAGE-A3的表達(dá)檢測(cè),結(jié)果在全部非癌組織中均未查到MAGE-A1和MAGE-A3的表達(dá),在肺癌組織中MAGE-A1的表達(dá)率為29.9%,MAGE-A3的表達(dá)率為38.8%,MAGE-A1和MAGE-A3在鱗癌中的表達(dá)高于腺癌,隨著病情進(jìn)展,其表達(dá)率成逐漸升高趨勢(shì).MAGE-A1和MAGE-A3表達(dá)組患者的預(yù)后差于不表達(dá)組患者.國(guó)內(nèi)相關(guān)研究也已開(kāi)展,韓秀晶等[9]應(yīng)用間接酶免疫組化技術(shù)檢測(cè)MAGE-A3在45例非小細(xì)胞肺癌組織中的表達(dá)情況,結(jié)果顯示MAGE-A3在非小細(xì)胞肺癌中的敏感度為62.2%,與Yanagawa的觀點(diǎn)不同,其檢測(cè)出MAGE-A3在腺癌中的表達(dá)率高于鱗癌,與性別、年齡、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無(wú)關(guān).MAGE基因在肺癌組織中的表達(dá)這方面,國(guó)內(nèi)外學(xué)者已達(dá)到共識(shí),但關(guān)于癌型及臨床分期與MAGE基因表達(dá)的聯(lián)系存在不同的觀點(diǎn),Shin等[10]應(yīng)用PCR法檢測(cè)75例肺癌患者組織中MAGE A1-A6基因的表達(dá),發(fā)現(xiàn)MAGE基因的表達(dá)與肺癌組織類(lèi)型和臨床分期無(wú)相關(guān)性,僅與腫瘤大小有關(guān),在<3 cm的腫瘤中其檢出率為74%,>3 cm的腫瘤中檢出率為58.7%.綜上所述,MAGE基因在肺癌中的表達(dá)有以下規(guī)律:①M(fèi)AGE基因在肺癌中的表達(dá)具有高度特異性;②MAGE基因表達(dá)與肺癌的病理分期有關(guān),分期越晚,表達(dá)率越高;③MAGE基因表達(dá)與肺癌病理類(lèi)型有關(guān),在鱗癌中表達(dá)率高于肺癌.在檢測(cè)時(shí),各研究結(jié)果存在差異性,究其原因主要與檢測(cè)技術(shù)、操作水平、指標(biāo)選擇等有關(guān),鑒于MAGE基因在肺癌中的表達(dá)規(guī)律,MAGE基因表達(dá)檢測(cè)可用于早期肺癌的篩選、診斷、分期評(píng)估及臨床治療.

影響肺癌預(yù)后的主要原因是血行轉(zhuǎn)移和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,早期發(fā)現(xiàn)肺癌微轉(zhuǎn)移將為早期診斷、指導(dǎo)臨床治療、檢測(cè)療效、判斷腫瘤預(yù)后提供參考依據(jù),但目前一般使用的檢測(cè)標(biāo)記物敏感性較低,迫切需要靈敏度高、特異性強(qiáng)的腫瘤標(biāo)記物用于肺癌微轉(zhuǎn)移檢測(cè).MAGE基因作為一種敏感度較高、特異性較強(qiáng)的標(biāo)記物,越來(lái)越受到重視.劉濤等[11]采用RT-PCR 技術(shù),通過(guò)檢測(cè)非小細(xì)胞肺癌患者外周血中的MAGE-1表達(dá),研究非小細(xì)胞肺癌外周血微轉(zhuǎn)移與臨床特征之間的關(guān)系,結(jié)果顯示MAGE-1基因在非小細(xì)胞肺癌患者外周血中陽(yáng)性表達(dá)率為57.15%,遠(yuǎn)高于對(duì)照組中其陽(yáng)性表達(dá)率(0/31);外周血MAGE-1的表達(dá)與腫瘤分化程度、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系密切.宋鑒清等[12]用甲基化特異性聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)49例非小細(xì)胞肺癌患者外周血MAGE-A1、MAGE-A3基因啟動(dòng)子區(qū)CpG島去甲基化的狀態(tài),分析與臨床參數(shù)的關(guān)系,并進(jìn)行24個(gè)月隨訪,結(jié)果肺癌患者外周血MAGE-A1和MAGE-A3啟動(dòng)子區(qū)CpG島啟動(dòng)子呈去甲基化狀態(tài)分別為53.1%和49%;對(duì)照組外周血標(biāo)本均呈現(xiàn)甲基化(100%),通過(guò)隨訪發(fā)現(xiàn)肺癌組MAGE-A1、MAGE-A3啟動(dòng)子區(qū)CpG島啟動(dòng)子呈去甲基化模式患者較呈甲基化患者預(yù)后不良,這說(shuō)明MAGE-A1、MAGE-A3啟動(dòng)子區(qū)CpG島啟動(dòng)子去甲基化模式與肺癌的轉(zhuǎn)移、TNM分期及預(yù)后相關(guān),通過(guò)對(duì)外周血相關(guān)基因的檢測(cè),可為腫瘤早期診斷、療效觀察及預(yù)后判斷提供有價(jià)值的信息.在非小細(xì)胞肺癌淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移檢測(cè)方面,Dango等[13]將取自32例非小細(xì)胞肺癌患者術(shù)后的100枚淋巴結(jié)每枚平均分為兩部分,分別進(jìn)行常規(guī)病理檢查及MAGE-A基因表達(dá)檢測(cè),常規(guī)病理檢查陽(yáng)性的淋巴結(jié)其MAGE-A基因表達(dá)率為66.7%,常規(guī)病理檢查結(jié)果陰性的淋巴結(jié)MAGE-A基因表達(dá)陽(yáng)性率為9.6%,共37.5%的肺癌患者淋巴結(jié)檢測(cè)出MAGE-A基因表達(dá),MAGE-A基因在淋巴結(jié)中的表達(dá)與腫瘤病理類(lèi)型、病理分級(jí)、性別、年齡無(wú)關(guān).Cucuruz等[14]運(yùn)用LightCycler480儀器對(duì)89例肺癌患者的202枚淋巴結(jié)進(jìn)行實(shí)時(shí)定量表達(dá)分析,結(jié)果提示MAGE-A1-6在支氣管內(nèi)超聲引導(dǎo)下細(xì)針穿刺(endobronchial ultrasound-guided fi neneedle aspiration, EBUS-TBNA)取得的樣本中其表達(dá)率為28.7%,而在縱隔鏡取得的樣本中其表達(dá)率為20.0%;MAGE-A12在兩種方式取得的樣本中的表達(dá)率分別為8.2%和11.3%,經(jīng)術(shù)后病理驗(yàn)證,術(shù)前檢測(cè)到MAGE基因表達(dá)的患者,術(shù)后均診斷為廣泛的區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,術(shù)前EBUS-TBNA和縱隔鏡結(jié)合MAGE定量聚合酶鏈反應(yīng),可將病理組織學(xué)診斷的準(zhǔn)確性提高至81.2%和86.4%.冼磊等[15]采用RT-PCR方法檢測(cè)53例非小細(xì)胞肺癌患者的111組淋巴結(jié)中MAGE-1、MAGE-2、MAGE-3、MAGE-4 mRNA的表達(dá),其陽(yáng)性表達(dá)率為41.4%,遠(yuǎn)高于常規(guī)病理檢查結(jié)果的27.9%,常規(guī)病理檢查結(jié)果陰性淋巴結(jié)中至少有1種MAGE基因表達(dá)的概率為23.8%,在常規(guī)病理檢查結(jié)果陽(yáng)性的淋巴結(jié)中其概率為87.1%,而在肺部良性疾病患者淋巴結(jié)中4種MAGE基因的表達(dá)均為0.相比于其它檢測(cè)指標(biāo),MAGE基因具有高度特異性及敏感性,能更早地檢測(cè)到非小細(xì)胞肺癌患者淋巴結(jié)、外周血中存在的微轉(zhuǎn)移,不僅能更早地診斷腫瘤,還能更準(zhǔn)確地估計(jì)腫瘤臨床分期,為制定準(zhǔn)確的治療計(jì)劃提供分子領(lǐng)域的支持.

2.3 MAGE基因在其它惡性腫瘤中的表達(dá) MAGE基因不僅在肺癌中表達(dá),在黑色素瘤、乳腺癌、肝癌、膀胱癌、大腸癌、胃癌、精原細(xì)胞瘤、頭頸部鱗癌、食管癌、白血病、淋巴瘤和肉瘤等惡性腫瘤中均可檢測(cè)到MAGE基因的表達(dá).

Curioni-Fontecedro等[16]發(fā)現(xiàn)MAGE-C1在原發(fā)性黑色素瘤和和色素瘤細(xì)胞株中的陽(yáng)性表達(dá)率同為24%,MAGE-C2在原發(fā)性黑色素瘤和和色素瘤細(xì)胞株中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為33%和14%,在遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移瘤中MAGE-C1及MAGE-C2的陽(yáng)性表達(dá)率均為40%,同時(shí)發(fā)現(xiàn)MAGE-C1或MAGE-C2陽(yáng)性的原發(fā)黑色素瘤患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率較高.Badovinac ?rnjevi?等[17]發(fā)現(xiàn)乳腺癌患者腫瘤切片中MAGE-A10的陽(yáng)性表達(dá)率為64%,其表達(dá)與腫瘤的大小、分級(jí)及淋巴結(jié)狀態(tài)無(wú)關(guān).Zhang等[18]運(yùn)用實(shí)時(shí)-定量-聚合酶鏈反應(yīng)發(fā)現(xiàn)肝癌患者外周血標(biāo)本中MAGR-A1的陽(yáng)性率為34.9%,AMGE-A3的陽(yáng)性表達(dá)率為60.5%;在非肝癌患者血標(biāo)本中并未檢測(cè)到MAGE基因的陽(yáng)性表達(dá).Dyrskj?t等[19]對(duì)350例長(zhǎng)期隨訪膀胱腫瘤患者的腫瘤標(biāo)本行MAGE基因檢測(cè),結(jié)果顯示43%的腫瘤表達(dá)MAGE-A3基因,56%的腫瘤至少表達(dá)1種CT基因,同時(shí)MAGE-A3基因的表達(dá)有預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值.

3 MAGE基因影響腫瘤生長(zhǎng)的分子機(jī)制

雖然MAGE基因已經(jīng)發(fā)現(xiàn)20余年,其生物學(xué)特性仍未清楚,但一些證據(jù)表明MAGE基因的表達(dá)與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后有密切的關(guān)系,可用于腫瘤的診斷和免疫治療.首先,MAGE基因與腫瘤的發(fā)生有密切關(guān)系,主要是通過(guò)影響人體抑癌基因(p53基因)的活性來(lái)影響腫瘤發(fā)生.Yang等[20]研究發(fā)現(xiàn)MAGE-A、MAGE-B和MAGE-C等蛋白可能通過(guò)與p53基因結(jié)合,抑制其活性,促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的活化,促進(jìn)惡性腫瘤的發(fā)生和發(fā)展.另有研究[21]顯示MAGE-A可以與p53核心區(qū)的DNA結(jié)構(gòu)域結(jié)合,阻斷p53與啟動(dòng)子的結(jié)合,達(dá)到延長(zhǎng)細(xì)胞周期,降低細(xì)胞死亡的作用,這項(xiàng)研究證明MAGE-A蛋白可以通過(guò)抑制p53的轉(zhuǎn)錄而引起腫瘤的發(fā)生發(fā)展.國(guó)內(nèi)也可見(jiàn)類(lèi)似報(bào)道,桑梅香等[22]發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染p53基因可以使p21 WAF1啟動(dòng)子介導(dǎo)的熒光素酶表達(dá)增加,而共同轉(zhuǎn)染恒定量的p53基因和不同量的MAGE-A4基因后p21 WAF1啟動(dòng)子介導(dǎo)的熒光素酶表達(dá)明顯高于單獨(dú)轉(zhuǎn)染p53基因時(shí)的表達(dá)量;共同轉(zhuǎn)染MAGE-A4基因和p53基因后p21 WAF1 mRNA和蛋白表達(dá)水平均明顯高于單獨(dú)轉(zhuǎn)染p53基因時(shí)的表達(dá)水平;克隆形成實(shí)驗(yàn)及原位末端轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記技術(shù)染色結(jié)果顯示,共轉(zhuǎn)染MAGE-A4基因和p53基因以后H1299細(xì)胞克隆形成數(shù)與單獨(dú)轉(zhuǎn)染p53基因組相比減少,而凋亡細(xì)胞數(shù)與單獨(dú)轉(zhuǎn)染p53基因組比較增加;最終結(jié)論證明MAGE-A4可以通過(guò)增強(qiáng)抑癌基因p53的轉(zhuǎn)錄活性,從而抑制腫瘤細(xì)胞的增殖并誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡.此外,MAGE-A3被發(fā)現(xiàn)是成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體2(f i broblast growth factor receptor 2,FGRF2)信號(hào)通路的靶基因,可負(fù)調(diào)節(jié)FGFR2的表達(dá),并通過(guò)調(diào)節(jié)纖維連接蛋白而控制腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移[23].MAGE基因還可通過(guò)細(xì)胞免疫達(dá)到殺滅腫瘤細(xì)胞的作用,在MAGE-A蛋白分子內(nèi)至少有5個(gè)組織相容性復(fù)合體(major histocompatibility complex, MHC)I類(lèi)分子限制性表位和6個(gè)MHC II類(lèi)分子限制性表位,經(jīng)由相應(yīng)的MHC I類(lèi)或II類(lèi)分子遞呈給輔助性T細(xì)胞(helper T cells, CD4+)和CD8+細(xì)胞,使人體產(chǎn)生針對(duì)相應(yīng)腫瘤的細(xì)胞免疫.Hama?等[24]研究發(fā)現(xiàn),MAGE-A3抗肺癌機(jī)制為MAGE-A3抗原特定性CD4+細(xì)胞在白細(xì)胞介素17的影響下轉(zhuǎn)化為效應(yīng)T淋巴細(xì)胞,分泌干擾素,攻擊并殺傷腫瘤細(xì)胞,達(dá)到抑制肺癌生長(zhǎng)的作用.Baba等[25]研究發(fā)現(xiàn)MAGE-A抗原治療肺癌的主要機(jī)制為其抗原首先作用于MHC基因簇,后控制人類(lèi)白細(xì)胞抗原(human leukocyte antigen, HLA)I類(lèi)分子,將信息呈遞給CD4+或CD8+細(xì)胞,產(chǎn)生干擾素或轉(zhuǎn)變?yōu)樾?yīng)T細(xì)胞,達(dá)到消滅腫瘤的作用.MAGE-A4表達(dá)陽(yáng)性患者中HLA I類(lèi)分子缺乏患者的5年生存率明顯低于HLA I類(lèi)分子健全患者.Peikert等[26]研究發(fā)現(xiàn)MAGE-A4穩(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞其凋亡指數(shù)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3的活性均比MAGE-A4表達(dá)陰性的細(xì)胞高,在用MAGE-A4反義RNA干擾MAGE-A4表達(dá)后,細(xì)胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3的活性明顯降低,結(jié)果提示MAGE-A4基因參與細(xì)胞凋亡信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡,可能在腫瘤的發(fā)生中起到積極的防御作用,承載著治療腫瘤的新希望.

4 MAGE基因編碼蛋白的抗腫瘤治療

以MAGE基因?yàn)榘悬c(diǎn)的抗癌作用主要通過(guò)以下3種方法:①接種MAGE表位抗原疫苗;②阻斷MAGE基因與其配體的結(jié)合;③破壞操縱MAGE基因表達(dá)的監(jiān)管系統(tǒng).前兩種方法可極大限度的限制MAGE蛋白在正常組織的表達(dá),同時(shí)對(duì)機(jī)體影響較小、副作用較少,大多研究都著重于前兩種方法.MAGE基因編碼的相關(guān)抗原在正常組織不表達(dá)(睪丸和胎盤(pán)除外),而睪丸和胎盤(pán)是免疫豁免器官,因此MAGE相關(guān)抗原是腫瘤特異性免疫治療的理想靶分子.

4.1 MAGE基因在惡性腫瘤免疫治療的應(yīng)用 MAGE基因抗腫瘤治療要追溯到1999年,Marchand等[27]將多肽

MAGE-A1和MAGE-A3為黑色素瘤患者皮下注射,接受治療的25例患者中,7例腫瘤縮小,3例完全消失,2例的無(wú)瘤期達(dá)2年以上.經(jīng)過(guò)不斷探索研究,Glynn等[28]發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞中只要表達(dá)MAGE基因,便可抵抗腫瘤壞死因子介導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用,從而達(dá)到抑制腫瘤細(xì)胞凋亡的作用.之后,Ueda等[29]將MAGE-A1、MAGE-A3抗原肽用于食管原發(fā)性黑色素瘤患者的治療,發(fā)現(xiàn)患者外周血中

IFN-γ明顯增多,患者的生存期較其它治療方式有所提高.

4.2 MAGE基因在肺癌免疫治療的應(yīng)用 MAGE基因家族在肺癌中的廣泛表達(dá)為抗腫瘤作用提供了潛在的靶點(diǎn),目前相應(yīng)的抗原性疫苗已經(jīng)問(wèn)世.國(guó)外有1例病例報(bào)道[30],1

位肺腺癌患者首次手術(shù)后復(fù)發(fā),二次手術(shù)后再次復(fù)發(fā),后接受MAGE-A3相關(guān)抗原免疫治療,隨訪觀察18個(gè)月未見(jiàn)復(fù)發(fā)跡象.國(guó)外一項(xiàng)隨機(jī)II期臨床研究[31]將182例術(shù)后MAGE-A3表達(dá)陽(yáng)性的肺癌患者(122例Ib期和60例II

期)隨機(jī)分為兩組,分別接受MAGE-A3疫苗和安慰劑治療,中位隨訪時(shí)間為28個(gè)月,共發(fā)現(xiàn)67例復(fù)發(fā)病例和45

例死亡病例,MAGE-A3疫苗組患者的無(wú)病間隔期、無(wú)病生存期及總生存率均優(yōu)于對(duì)照組.另外開(kāi)展的一項(xiàng)III期臨床研究[32],預(yù)計(jì)全球招募2,270例術(shù)后患者(Ib期-IIIa

期),其主要目的是觀察免疫治療對(duì)肺癌術(shù)后復(fù)發(fā)的預(yù)防作用,此外還要觀察免疫療法的療效,該研究在我國(guó)也招募患者,本項(xiàng)研究是目前世界最大的肺癌輔助治療臨床研究項(xiàng)目.

5 問(wèn)題與展望

MAGE基因是較為敏感的腫瘤特異性基因,在肺癌腫瘤組織中高表達(dá),而在非瘤性組織中罕有表達(dá),在血液及正常淋巴結(jié)中無(wú)表達(dá),在肺癌患者的外周血及轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中高表達(dá),其免疫產(chǎn)品具有特異性高、副作用小的特點(diǎn),有望成為肺癌免疫治療的靶點(diǎn).加之肺癌是惡性腫瘤中發(fā)病率和病死率較高的腫瘤,MAGE基因與肺癌的關(guān)系已成為目前研究的熱點(diǎn),可在非小細(xì)胞肺癌的早期診斷、微轉(zhuǎn)移灶檢測(cè)、復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)、免疫治療及評(píng)估預(yù)后等工作中發(fā)揮作用.隨著對(duì)MAGE基因家族在肺癌領(lǐng)域研究的不斷深入,未來(lái)在肺癌的早期診斷、病理分級(jí)、臨床分期、免疫治療、評(píng)估預(yù)后等方面,MAGE基因家族將發(fā)揮更大的作用.