宮頸癌組織中CD13與CD34的表達(dá)

郭 哲，史惠蓉

1)南陽(yáng)市中心醫(yī)院婦產(chǎn)科 南陽(yáng)473000 2)鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科 鄭州450052

#通訊作者，女，1956年4月生，博士，教授，研究方向:婦科腫瘤，E-mail:huirougshi@yahoo.com.cn

宮頸癌是常見(jiàn)婦科惡性腫瘤之一，是發(fā)展中國(guó)家婦女死亡的第二大原因，目前其發(fā)病率和死亡率有增長(zhǎng)趨勢(shì)且有明顯年輕化傾向。腫瘤生成依賴血管形成，因此，腫瘤組織內(nèi)的微血管形態(tài)、分布、數(shù)量及血液循環(huán)狀態(tài)對(duì)于腫瘤的形成、治療和預(yù)后判定有著十分重要的意義。微血管密度(microvessel density，MVD)是目前評(píng)估腫瘤血管生成形態(tài)學(xué)的金標(biāo)準(zhǔn)，且其表達(dá)與宮頸癌的預(yù)后密切相關(guān)［1］。CD13是腫瘤特異性血管標(biāo)記物，是血管生成的重要調(diào)節(jié)因子，對(duì)處于血管生成過(guò)程中的微小血管內(nèi)皮細(xì)胞具有較高的特異性，因此用CD13 標(biāo)記來(lái)檢測(cè)MVD已成為當(dāng)今的研究熱點(diǎn)［2-3］。作者以CD13 和CD34為標(biāo)記檢測(cè)宮頸癌組織中的MVD，探討CD13 作為腫瘤新生血管標(biāo)記物的臨床意義。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 選取2009年6月至2011年8月在南陽(yáng)市中心醫(yī)院婦產(chǎn)科住院手術(shù)切除的新鮮宮頸癌標(biāo)本60例?；颊吣挲g38～65(48.5±6.8)歲，術(shù)前均未接受輔助放、化療以及其他抗癌治療。標(biāo)本經(jīng)組織病理學(xué)證實(shí)，鱗癌45例，腺癌15例; 其中19例有盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。按照國(guó)際婦產(chǎn)科協(xié)會(huì)(FIGO)2009年新的宮頸癌臨床分期標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分期，Ⅰ期32例，Ⅱ期28例。

1.2 宮頸癌組織中MVD 檢測(cè) 鼠抗人CD13、CD34 單克隆抗體、SP 免疫組化試劑盒和DAB 顯色劑均購(gòu)自上海信然生物技術(shù)有限公司。取存檔蠟塊，4 μm 厚連續(xù)切片，采用免疫組化SP 法檢測(cè)，按試劑盒操作說(shuō)明進(jìn)行。用PBS 緩沖液代替一抗作陰性對(duì)照。

1.3 結(jié)果判定 顯微鏡下觀察，CD13 和CD34 均在血管內(nèi)皮細(xì)胞胞質(zhì)中表達(dá)，呈棕黃色染色。由兩位副主任醫(yī)師在鏡下進(jìn)行微血管計(jì)數(shù)，凡呈現(xiàn)棕黃色單個(gè)內(nèi)皮細(xì)胞或內(nèi)皮細(xì)胞群者，只要與鄰近微血管、腫瘤細(xì)胞或其他結(jié)締組織分開(kāi)，就視為一個(gè)微血管。參照Weidner 方法，先在40 倍視野下尋找MVD密集區(qū)，然后在高倍鏡下計(jì)數(shù)4 個(gè)不同視野的微血管數(shù)，取其平均值作為該標(biāo)本的MVD。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 13.0 處理數(shù)據(jù)，2組間均數(shù)的比較應(yīng)用兩獨(dú)立樣本t 檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 CD13 和CD34 的表達(dá) 顯微鏡下可見(jiàn)CD13主要表達(dá)于微血管癌間質(zhì)內(nèi)皮細(xì)胞的胞質(zhì)，CD34 在所有血管內(nèi)皮細(xì)胞均著色(圖1)。

2.2 CD13、CD34 標(biāo)記的MVD 與宮頸癌臨床病理特征的關(guān)系 見(jiàn)表1。

圖1 CD13(左)和CD34(右)標(biāo)記的微血管(×400)

表1 CD13、CD34 標(biāo)記的MVD 與宮頸癌臨床病理特征的關(guān)系

續(xù)表

3 討論

CD13 是一種將氨基酸從寡肽N 末端切除的膜結(jié)合糖蛋白(氨基肽酶N)，具有鋅離子結(jié)合依賴性金屬蛋白酶活性，可酶解基底膜蛋白，促進(jìn)血管生成，從而調(diào)控腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移［4］。Kido 等［5］研究發(fā)現(xiàn)CD13 在骨肉瘤和黑色素瘤轉(zhuǎn)移過(guò)程中起積極作用，認(rèn)為與CD13 與促進(jìn)腫瘤細(xì)胞附著、降解細(xì)胞外基質(zhì)蛋白有關(guān)。Ikeda 等［6］研究發(fā)現(xiàn)，CD13表達(dá)水平與胰腺癌腫瘤內(nèi)MVD 呈平行增加關(guān)系，提示CD13 與腫瘤的新血管生成密切相關(guān)。Inagaki等［7］證實(shí)CD13 抑制劑可以抑制肝癌細(xì)胞的侵襲和血管生成，在臨床治療中CD13 抑制劑結(jié)合放化療對(duì)肝癌的治療效果好于單純放化療［8］。

長(zhǎng)期以來(lái)，國(guó)內(nèi)外多采用CD34 抗體標(biāo)記來(lái)評(píng)價(jià)實(shí)體腫瘤組織中的MVD，但是CD34 在所有血管內(nèi)皮細(xì)胞均有表達(dá)，對(duì)腫瘤微血管無(wú)特異性。這種對(duì)大多數(shù)血管內(nèi)皮細(xì)胞具有抗性作用的抗體往往與非增殖性或大血管的內(nèi)皮細(xì)胞反應(yīng)較好，但在腫瘤組織微血管中表達(dá)不穩(wěn)定，反應(yīng)特異性較差。該研究結(jié)果顯示，CD34 標(biāo)記的MVD 與宮頸癌患者的臨床分期、盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及病理分型無(wú)關(guān)，而Ⅱ期、有盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及病理類型為腺癌的宮頸癌組織CD13標(biāo)記的MVD 明顯高于Ⅰ期、無(wú)轉(zhuǎn)移及病理類型為SCC者。臨床分期和盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是宮頸癌預(yù)后的主要影響因素。因此，CD13 標(biāo)記的MVD 可以作為預(yù)測(cè)宮頸癌患者的預(yù)后指標(biāo)，對(duì)術(shù)后的放、化療及其他抗癌治療等有重要的指導(dǎo)作用。

總之，CD13 標(biāo)記宮頸癌微血管比CD34 更具有特異性，CD13 可以用來(lái)判斷宮頸癌生長(zhǎng)、浸潤(rùn)及復(fù)發(fā)狀況，并較準(zhǔn)確地對(duì)腫瘤轉(zhuǎn)移做出預(yù)示，可為患者預(yù)后提供更有價(jià)值的信息。

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