一種測(cè)定口香糖中VC的方法

鄧?guó)欌?/p>

（廣東食品藥品職業(yè)學(xué)院食品科學(xué)系，廣東 廣州 510520）

一種測(cè)定口香糖中VC的方法

鄧?guó)欌?/p>

（廣東食品藥品職業(yè)學(xué)院食品科學(xué)系，廣東 廣州 510520）

針對(duì)目前國(guó)標(biāo)沒(méi)有口香糖中VC含量的檢測(cè)方法，結(jié)合已有國(guó)標(biāo)VC測(cè)定方法的基礎(chǔ)上進(jìn)行改良試驗(yàn)。對(duì)口香糖樣品進(jìn)行快速溶解，使樣品中的VC溶解進(jìn)入含有乙酸的溶液中，與固藍(lán)鹽B反應(yīng)生成黃色的草酰肼-2-羥基丁酰內(nèi)酯衍生物。在其最大吸收波長(zhǎng)420nm處，用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定其含量。本方法的線性范圍1 μg/mL～20 μg/mL，檢出限為1 μg/mL，樣品加標(biāo)回收率在90.9%～98.6%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.57%。

紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)；VC；口香糖

口香糖是一種大眾喜愛(ài)的食品，其中的主要成分是天然樹(shù)膠或甘油樹(shù)脂的膠體，還含有糖漿、薄荷、穩(wěn)定劑、甜味劑等成分。因含有木糖醇、香精香料、VC、維VE和色素等不同成分而制成各種類的口香糖產(chǎn)品。VC又稱抗壞血酸，是一種水溶性維生素，在人體的代謝過(guò)程中起著重要的作用。人體中缺乏VC，會(huì)引起多種疾病，如壞血病等。

國(guó)標(biāo)測(cè)定食品中VC的方法主要針對(duì)一些易溶解在相關(guān)溶液中的普通食品[1-2]。而口香糖的膠體基質(zhì)黏性很強(qiáng)，不適用于普通食品的處理方法。這些國(guó)標(biāo)前處理方法不能夠有效地處理這種膠體，使得口香糖中VC的檢測(cè)方法的特異性較差，結(jié)果的準(zhǔn)確性差。周芳梅等[3]使用高效液相色譜法對(duì)口香糖中VC的進(jìn)行測(cè)定。該方法雖然具有高效液相色譜法特點(diǎn)，但該方法需要采用高壓滅菌鍋對(duì)樣品進(jìn)行高溫處理，使得檢測(cè)前處理過(guò)程麻煩，高溫也容易影響VC的穩(wěn)定性，同時(shí)我們國(guó)家大部分企業(yè)還沒(méi)有普及高效液相色譜儀，大部分企業(yè)都還是使用紫外分光光度計(jì)。因此，建立一種紫外分光光度計(jì)檢測(cè)口香糖中VC的方法尤為重要。通過(guò)對(duì)口香糖中VC提取方法的優(yōu)化，取得良好效果，介紹如下。

1 材料與方法

1.1 儀器

AB104型電子天平：瑞士梅特勒公司；UV2401型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)：日本島津儀器公司。

1.2 試劑

所有試劑為分析純，水為蒸餾水；VC標(biāo)準(zhǔn)品，含量為99.5%；美國(guó)Sigma公司；2 mol/L乙酸溶液；0.5 mol/L乙酸溶液；106 g/L亞鐵氰化鉀溶液；0.25 mol/L EDTA；220 g/L乙酸鋅溶液；2 g/L固藍(lán)鹽B溶液；甲苯。

1.3 方法

1.3.1 原理

在乙酸溶液中，VC與固藍(lán)鹽B反應(yīng)生成黃色的草酰肼-2-羥基丁酰內(nèi)酯衍生物。在其最大吸收波長(zhǎng)420 nm處，用分光光度法測(cè)定其含量,該方法測(cè)定的是還原型的VC。

1.3.2 樣品前處理

稱量2片口香糖，放入50mL的潔凈離心管里，加入10.0mL 甲苯、10.0mL（2mol/L）乙酸溶液、2.5mL（220g/L）乙酸鋅溶液，搖動(dòng)樣品直至完全溶解；加入2.5 mL（106 g/L）亞鐵氰化鉀溶液、15 mL去離子水，搖動(dòng)樣品5 min；用離心機(jī)在2800 RCF（相對(duì)離心力）下離心15 min，分離溶液層，取下層水溶液用于VC的分析。

1.3.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制及樣品測(cè)定

在 10 mL 比色管中，依次加入 0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.5、2.0 mL VC標(biāo)準(zhǔn)使用液（100 mg/L），加入1.5 mL EDTA（0.25 mol/L），1.0 mL 乙酸溶液（0.5 mol/L），1.25mL固藍(lán)鹽B溶液（2g/L），用去離子水定容到刻度，充分混勻，室溫靜置3 min。用1 cm比色皿，在波長(zhǎng)420 nm處，以試劑空白作參比，測(cè)定吸光度（A）。同時(shí)取1.0 mL樣品液同法測(cè)定。

1.3.4 計(jì)算

式中：X為試樣中抗壞血酸的含量（mg/100g，mg/100 mL）；c為試樣測(cè)定液中抗壞血酸的含量，μg；m為試樣質(zhì)量（體積），g（mL）；V2試樣處理液總體積，mL；V1為測(cè)定時(shí)所取溶液體積，mL。

2 結(jié)果與討論

2.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

將VC標(biāo)準(zhǔn)溶液在紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)上進(jìn)行掃描，確定其最大吸收波長(zhǎng)為420 nm。

2.2 提取條件的選擇

VC具有較強(qiáng)的還原性，易受空氣、光、熱等因素影響，但在酸性條件中卻很穩(wěn)定。用乙酸溶液來(lái)保護(hù)標(biāo)樣中VC，用甲苯溶液來(lái)快速溶解膠基基質(zhì)。結(jié)果表明，這種處理速度快，效果好，有利于VC的提取，因此分別采用乙酸溶液、甲苯溶液來(lái)提取VC。

2.3 提取時(shí)間的選擇

隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，VC的含量略有降低，但在一定時(shí)間內(nèi)能保持穩(wěn)定。提取溶液放置時(shí)間越長(zhǎng)，VC的含量也會(huì)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而略有下降，但在3h內(nèi)變化不大。實(shí)驗(yàn)表明，按照本實(shí)驗(yàn)的操作，整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程穩(wěn)定。

2.4 方法的線性范圍及其檢出限

用本法繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，VC標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度對(duì)應(yīng)的吸光度，與體積濃度繪制了標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，見(jiàn)圖1。

圖1 紫外分光光度法測(cè)定VC標(biāo)準(zhǔn)溶液Fig.1 The UV spectrophotometric method for the determination of VCstandard solution

由圖 1 可見(jiàn)，VC含量在 1 μg/mL～20 μg/mL 時(shí)，符合朗伯-比爾定律，回歸方程y=0.0682x+0.0006，相關(guān)系數(shù)R2=0.9996，曲線的線性關(guān)系良好。根據(jù)國(guó)際與應(yīng)用化學(xué)聯(lián)合會(huì)（IUPAC）的規(guī)定計(jì)算檢出限，得檢出限為 1 μg/mL。

2.5 精密度

對(duì)3種不同樣品進(jìn)行12次重復(fù)測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 口香糖VC含量測(cè)定結(jié)果及精密度（n=12）Table 1 Results of determination of content of VCchewing gum and precision(n=12)

標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.0100～0.0144，變異系數(shù)1.18%～1.57%。從表1可以得出，精密度實(shí)驗(yàn)的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于2%，說(shuō)明該方法重復(fù)性較好。

2.6 準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn)

在測(cè)定完口香糖樣品中的VC含量后。選出4種不含VC含量的樣品，對(duì)這4種空白樣品進(jìn)行4個(gè)濃度的加標(biāo)回收試驗(yàn)，每個(gè)濃度各測(cè)4次。分別在100 g樣品中加入 20.30、100.50、300.0、420.0 mg的 VC標(biāo)樣。經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)，得到回收率范圍是90.9%～98.6%，平均回收率為95.2%（回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2）。

表2 準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn)結(jié)果(n=6)Table 2 The accuracy of experimental results(n=6)

3 結(jié)論

由以上分析可知，該分析方法克服了國(guó)標(biāo)方法[1-2]不能很好的處理口香糖等膠基糖果的問(wèn)題，也避免了需要采用高壓滅菌鍋對(duì)樣品進(jìn)行高溫處理[3]。該實(shí)驗(yàn)使用的儀器是紫外分光光度計(jì)，這種儀器是常見(jiàn)的分析儀器，適合企業(yè)配備，降低企業(yè)分析VC的檢測(cè)成本，具有很高的實(shí)用性和推廣價(jià)值。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果重現(xiàn)性好，準(zhǔn)確度及回收率高，此方法適合于口香糖等膠基糖果中VC含量的測(cè)定。

[1]張文德,李信榮,韓會(huì)新,等.GB/T 5009.159-2003食品中還原型抗壞血酸的測(cè)定[S].北京:中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社,2003:327-332

[2]王光亞,楊曉莉,田立新,等.GB/T 5009.86-2003蔬菜、水果及其制品中總抗壞血酸的測(cè)定(熒光法和2,4-硝基苯肼法)[S].北京:中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社,2003:623-628

[3]周芳梅,馮志強(qiáng),文燦,等.高效液相色譜法測(cè)定口香糖中維生素C[J].現(xiàn)代食品科技,2010,26(6):649-613

Determination Method of VCfrom Chewing Gum

DENG Hong-ling
（Guangdong Food and Drug Vocational College，Guangzhou 510520,Guangdong,China）

No chewing gum for the current national standard content of Vitamin C detection methods,combined with vitamin C has been the national standard based on the determination of improved tests.The method is rapid dissolution of the gum samples,the sample of vitamin C dissolved into the solution containing acetic acid,and the reaction of fast blue salt B yellow grass hydrazide-2-hydroxy butyrate acid lactone derivatives.At its maximum absorption wavelength at 420 nm,using UV-Vis spectrophotometer and its content.The linear range of 1 μg/mL-20 μg/mL,the detection limit was 1 μg/mL,the recovery rate in the 90.9%to 98.6%,relative standard deviation was 1.57%.

UV-visible spectrophotometer;Vitamin C;gum

鄧?guó)欌彛?977—），男（漢），高級(jí)工程師，碩士，主要從事食品安全及食品檢測(cè)技術(shù)的研究工作。

2011-12-30