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    乙型肝炎感染者血清e(cuò)抗原模式與HBV DNA及肝功能指標(biāo)關(guān)系研究

    2012-11-21 02:48:38施志農(nóng)陳繼梅
    中國實(shí)用醫(yī)藥 2012年12期
    關(guān)鍵詞:載量感染者乙型肝炎

    施志農(nóng) 陳繼梅

    一直以來,用酶聯(lián)法檢測(cè)乙型肝炎病毒(HBV)血清標(biāo)志物(HBV-M)是診斷HBV感染的常用方法,其中e抗原陽性是判斷病毒復(fù)制和高傳染性的常用免疫學(xué)標(biāo)志物,對(duì)于HBeAg陽性的乙肝患者,HBeAg陰轉(zhuǎn)并出現(xiàn)抗-HBe,提示HBV的復(fù)制停止,傳染性降低,意味著病情好轉(zhuǎn)。近年來實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(FQ-PCR)檢測(cè)患者體內(nèi)病毒量的方法全面推廣,對(duì)乙肝患者診療從分子學(xué)角度提供了有力的支持,通過FQ-PCR我們認(rèn)識(shí)到少部分患者在出現(xiàn)HBeAg血清學(xué)轉(zhuǎn)換后,仍存在病毒復(fù)制,肝功能出現(xiàn)反復(fù),病情遷延不愈?,F(xiàn)對(duì)我院門診及住院乙肝患者血清分別進(jìn)行乙型肝炎標(biāo)志物、HBVDNA、肝功能檢測(cè)并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,以探討乙型肝炎e抗原模式與HBVDNA及肝功能之間的關(guān)系。報(bào)告如下。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料 收集2009年5月至2010年6月在蕪湖市第三人民醫(yī)院門診及住院乙型肝炎感染者1407例,所有病例皆同時(shí)具有肝功、血清乙型肝炎病毒學(xué)(HBVDNA)及乙型肝炎血清標(biāo)志物(HBV-M)等檢查結(jié)果,診斷符合《慢性乙型肝炎防治指南(2010年版)》制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)[1],排除合并HCV、HAV等其他肝炎病毒感染者。其中男1066例,女341例,患者年齡7~76歲,平均(35.1±13.5)歲。

    1.2 檢測(cè)方法

    1.2.1 血清HBVDNA載量檢測(cè) 采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(FQ-PCR法),儀器為美國ABI公司生產(chǎn)的SLAN Real-Time PCR Detection System 7300熒光定量檢測(cè)儀,試劑購自上??迫A生物工程股份有限公司,以HBVDNA>103copirs/ml為陽性結(jié)果。

    1.2.2 血清HBV-M檢測(cè) 采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA法),試劑購自北京萬泰生物藥業(yè)有限公司的。檢測(cè)乙型肝炎患者血清 HBV標(biāo)志物(HBV-M),即 HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc。嚴(yán)格按說明書操作,結(jié)果在MK3型酶標(biāo)儀上測(cè)定,根據(jù)HBV-M結(jié)果按HBeAg模式分為二組,即HBeAg陽性組和HBeAg陰性組,前者包括HBsAg、HBeAg、抗-HBc陽性和 HBsAg、HBeAg陽性病例,后者包括 HBsAg、抗-HBe、抗-HBc陽性和 HBsAg、抗-HBc陽性及抗-HBe、抗-HBc陽性病例。

    1.2.3 肝功能生化指標(biāo)檢測(cè) 儀器為日立7180全自動(dòng)生化分析儀,以評(píng)估肝功能常用炎癥指標(biāo)血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST),及評(píng)估肝損傷指標(biāo)膽堿脂酶(CHE)作為觀察指標(biāo)。ALT、AST、CHE均采用雙試劑速率法。試劑購自溫州東甌津瑪生物科技有限公司。

    2 結(jié)果

    2.1 1407例慢性乙型肝炎感染者中不同e抗原模式中HBVDNA陽性率、病毒載量及ALT、AST、CHE結(jié)果比較(見表1)。

    由此表可以得出,e抗原陽性組HBVDNA檢出率達(dá)到94.62%,與e抗原陽性組相比存在顯著性差異(P<0.01),而e抗原陰性組中仍有42.80% 患者存在病毒復(fù)制,雖然病毒復(fù)制水平顯著低于e抗原陽性組(P<0.01),兩組血清ALT、AST、CHE水平結(jié)果不存在顯著性差異(P>0.05),即慢性乙型肝炎感染者血清酶水平可能與HBeAg模式無關(guān)。

    2.2 不同e抗原模式乙肝感染者中有病毒復(fù)制與無病毒復(fù)制其血清ALT、AST、CHE水平比較(見表2)。根據(jù)e抗原陽性或陰性組中是否存在病毒復(fù)制再次分組,探討其與ALT、AST、CHE等血清酶水平關(guān)系。

    表1 不同e抗原模式乙肝患者HBVDNA陽性率、病毒載量及ALT、AST、CHE結(jié)果比較(±s)

    表1 不同e抗原模式乙肝患者HBVDNA陽性率、病毒載量及ALT、AST、CHE結(jié)果比較(±s)

    注:*表示括號(hào)內(nèi)為陽性率,率比較采用方差分析

    表2 不同e抗原模式乙肝感染者有或無病毒復(fù)制血清ALT、AST、CHE水平比較(±s)

    表2 不同e抗原模式乙肝感染者有或無病毒復(fù)制血清ALT、AST、CHE水平比較(±s)

    注:HBeAg陽性HBVDNA(-)組與HBVDNA(+)組經(jīng)t檢驗(yàn)*表示P<0.05、**表示P<0.05,HBeAg陰性組中HBVDNA(-)組與HBVDNA(+)組經(jīng)t檢驗(yàn)★表示P<0.01

    我們的調(diào)查顯示不論e抗原陰性或陽性,都存在有病毒復(fù)制組ALT、AST水平顯著高于無病毒復(fù)制分組,CHE水平低于無病毒復(fù)制組(P<0.01)。病毒復(fù)制活躍時(shí)的肝臟炎癥均重于病毒復(fù)制水平較低時(shí),提示病毒載量與肝臟炎癥及預(yù)后有一定的相關(guān)性。

    3 討論

    本研究系統(tǒng)的收集了在我院門診和住院就診的乙型肝炎感染者1407例,通過分析,發(fā)現(xiàn)在乙型肝炎感染者中,e抗原陽性模式感染者502例,占35.68%,e抗原陰性模式感染者905例,占64.32%,e抗原陰性模式感染者明顯多于e抗原陽性模式感染者。e抗原陽性模式組血清HBVDNA檢出率及病毒載量水平都顯著高于e抗原陰性模式組,間接證實(shí)了血清HBeAg是病毒體內(nèi)復(fù)制的指標(biāo),與HBVDNA載量指標(biāo)有良好的一致性[2、3]。另一方面,我們資料顯示,有27例e抗原陽性患者血清中檢測(cè)不到HBVDNA載量,e抗原陰性組中仍有42.80%的患者存在病毒復(fù)制,雖然其病毒復(fù)制水平較陽性者顯著降低 (P<0.01),因此,單純通過 e抗原來推測(cè)HBV復(fù)制狀況的不確定性非常大,尤其在e抗原轉(zhuǎn)陰的情況下。同時(shí)我們也發(fā)現(xiàn),單純以e抗原模式分組討論其肝功能的關(guān)系,我們可以得出,二組之間ALT、AST、CHE等血清酶水平之間并不存在顯著性差異(P>0.05)見表1。而這兩組病毒載量存在顯著性差異,即可認(rèn)為血清ALT、AST、CHE水平與體內(nèi)病毒復(fù)制無關(guān),這與一些文獻(xiàn)報(bào)道相符[4、5],但仍有一些報(bào)道持相反意見[6、7],我們按e抗原不同模式中是否存在病毒復(fù)制再一次分類,結(jié)果顯示,e抗原陽性模式組中有病毒復(fù)制的患者其血清ALT、AST水來顯著高于無病毒復(fù)制組,CHE水平顯著低于無病毒復(fù)制組(P<0.01)見表2,e抗原陰性模式組也存在相同情況,有病毒復(fù)制組其ALT、AST水平高于無病毒復(fù)制組、CHE水平低于無病毒復(fù)制組。由此,我們得出與上面相反的結(jié)論,即血清ALT、AST、CHE水平與病毒載量相關(guān)[6、7]。我們認(rèn)為雖然機(jī)體對(duì)HBV的免疫應(yīng)答是造成肝組織損害的主要機(jī)制,但可能有HBV的直接參與,發(fā)生機(jī)制與免疫耐受被打破,病毒復(fù)制激發(fā)病變活動(dòng)有關(guān)[8]。

    因此,對(duì)于乙型肝炎感染者,我們認(rèn)為e抗原雖能在一定程度上反應(yīng)HBV復(fù)制狀況,但由于HBV致病機(jī)理相當(dāng)復(fù)雜,由HBV病毒引起,機(jī)體的免疫反應(yīng)的共同作用的結(jié)果,單一e抗原指標(biāo)并不能很好的反應(yīng)HBV的復(fù)制狀況。e抗原主要反應(yīng)機(jī)體的免疫狀態(tài),而HBVDNA直接檢測(cè)血中的病毒含量,能直接反映HBV的感染程度和病毒的復(fù)制情況,尤其是對(duì)于e抗原陰轉(zhuǎn)的感染者要加強(qiáng)HBVDNA的檢測(cè),全面綜合分析e抗原、HBVDNA水平及肝功能指標(biāo),才能協(xié)助評(píng)估病情的變化、嚴(yán)重程度,指導(dǎo)臨床對(duì)患者的診療。

    [1]中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì),中華醫(yī)學(xué)會(huì)感染病學(xué)分會(huì).慢性乙型肝炎防治指南(2010年版).中華肝臟病雜志,2011,19(1):13-24.

    [2]陳繼梅,施志農(nóng),田蕓.熒光定量PCR檢測(cè)HBV-DNA與血清標(biāo)志物關(guān)系探討.蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2009,34(2):158-159.

    [3]吳麗萍,張建軍,杜瑞清.血清HBVDNA定量在不同類型慢性乙型肝炎中的檢測(cè)價(jià)仁值.汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2009,22(1):34-36.

    [4]歐曉娟,王曉明,賈繼東,等.慢性乙型肝炎肝穿病理與血清HBVDNA及肝功能的關(guān)系.首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2006,27(4):435-437.

    [5]吳莉莉,董玲,沈錫中.慢性乙型肝炎血清HBeAg表達(dá)和HBV DNA水平與肝臟病理變化的相關(guān)性研究.中國臨床醫(yī)學(xué),2005,12(6):1029-1030.

    [6]李紅梅,劉映霞,劉書香,等.e抗原陰性慢性乙型肝炎患者體內(nèi)病毒復(fù)制與病情的臨床關(guān)系.南華大學(xué)學(xué)報(bào)·醫(yī)學(xué)版,2006,34(4):592-593.

    [7]Yuen MF,Nq IO,F(xiàn)an ST,et al.Significance of HBV DNA levels in liver histology of HBeAg and anti-HBe positive patients with chronic hepatitis B.Am J Gastroenterol,2004,99:2032-2037.

    [8]吳麗萍,綿建軍,杜瑞清,等.HBeAg陰性慢性乙型肝炎的臨床病理特征.山東醫(yī)藥,2008,48(41):102-103.

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