三種方法聯合檢測尿液有形成分的比較和評價

王蕾

(肥城礦業(yè)中心醫(yī)院檢驗科，山東 肥城 271608)

目前應用于臨床的尿液檢測方法主要有尿沉渣鏡檢、干化學法和尿沉渣分析儀三種方法。尿液干化學分析儀由于檢測速度較快、使用方便，可以對尿液標本進行篩選，提高了臨床檢驗工作的效率，但可導致假陽性和假陰性結果。尿沉渣分析儀具有操作簡單、靈敏度高、重復性好、標本不需離心等優(yōu)點，可對鏡檢報告中的紅細胞、白細胞、管型等進行計數，定量報告，有助于血尿、尿路感染病人的療效監(jiān)控[1-3]，適用于大批量標本檢測，尿液干化學分析儀與尿沉渣分析儀流水線已廣泛應用于實驗室。但傳統(tǒng)的尿沉渣鏡檢仍然是檢測尿中有形成分的金標準，然而該方法精密度較差，勞動強度大，在大中型醫(yī)院難以對每個尿液標本進行鏡檢。為了探討三種方法聯合檢測尿液有形成分的應用價值和影響因素，我們對640份我院住院及門診病人的尿液標本，同時用三種方法聯合檢測，并對檢測結果進行比較和評價，現報告如下。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 UF-50尿沉渣分析儀 (日本Sysmex公司生產)與配套試劑、液體質控(批號S0006)；迪瑞H-500尿干化學分析儀及配套11項試紙、液體質控品(批號20100817)；人工顯微鏡、離心機。

1.2 標本 隨機收集我院2011年3月門診及住院患者尿液標本640份，患者年齡4～81歲，男性標本396例，女性標本244例。

1.3 實驗方法

1.3.1 標本采集方法 用潔凈一次性尿杯囑患者留取中段尿約30ml，混勻后分裝三個試管，每管10ml，其中一管按儀器操作程序在UF-50上機測定，一管進行尿干化學測定，另一管離心后進行尿沉渣鏡檢，接收標本后2h內完成所有檢測。

1.3.2 UF-50及H-500檢測 對UF-50及H-500進行校準，每天檢測前用質控品做室內質控且結果在控，UF-50及H-500均按儀器說明嚴格操作。

1.3.3 顯微鏡檢測 取刻度離心管，倒入混合均勻的新鮮尿液 10ml，用 1500r/min轉速，離心 5min，棄去上清液，留下0.2ml沉渣，輕搖離心管，使尿沉渣有形成份充分混勻。取尿沉渣0.02ml，滴在載玻片上，用18mm×18mm蓋玻片覆蓋。首先用低倍鏡觀察尿沉渣分布情況后，再轉高倍鏡計數10個視野所見細胞數目[4]。

1.4 結果判斷 三種方法都按各自的說明書或SOP文件進行操作，尿沉渣鏡檢結果參考值范圍[4-5]：WBC：0～5 個/HP，RBC：0～3 個/HP，CAST：＜0/LP，超出參考值上限為陽性；UF-50尿沉渣結果判定：RBC：男性為 0～10/μl，女性為 0～20/μl；白細胞：男性為 0～12/μl，女性為 0～22/μl，CAST：男性為0～0.9 個/μl；女性 0～0.7/μl，檢查結果以超出參考值上限為陽性。

1.5 統(tǒng)計學方法 數據資料利用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行處理，三種方法間結果的比較用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

640 例尿標本三種方法檢測WBC、RBC陽性率結果見表1。以尿沉渣鏡檢結果為標準，干化學與尿沉渣鏡檢之間RBC和WBC結果比較見表2。UF-50尿液WBC、RBC、CAST結果與尿沉渣鏡檢結果比較見表3。干化學法、UF-50檢測尿液WBC、RBC的陽性率與尿沉渣鏡檢陽性率比較，結果差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。UF-50檢測結果陽性率分別與尿沉渣鏡檢結果比較，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。以干化學檢測結果中白細胞、紅細胞、蛋白及亞硝酸鹽四項全陰性為過篩標準[5]，對640例尿標本進行篩選，符合此標準的標本共316份，其中UF-50分析WBC陽性25份 (陽性率7.91%)，RBC 陽性 24 例(陽性率 7.59%)；尿沉渣鏡檢WBC陽性21例(陽性率6.65%)，RBC陽性9例(陽性率 2.85%)。

表2 干化學法與尿沉渣鏡檢法WBC和RBC結果比較

表3 UF－50與尿沉渣鏡檢法WBC、RBC和CAST結果比較

3 討論

UF-50采用流式熒光技術,具有檢測速度快、重復性好等優(yōu)點，但在臨床使用中仍然會出現檢測結果與尿沉渣鏡檢以及干化學不一致的情況[6-7]。干化學法是自動判定尿液中不同成分的定性或半定量結果的一種檢測方法，具有快速、簡便、準確的優(yōu)點，但此法在測定尿液過程中，易受溫度、酸堿度、藥物、理化等外界因素的干擾，出現假陽性和假陰性，有一定局限性[8-10]。尿沉渣鏡檢雖操作繁瑣，但標準化的尿沉渣鏡檢仍是尿沉渣分析的金標準，是尿液分析中不可缺少的檢查手段，具有重要的臨床價值[8]。640例尿液標本中，WBC陽性率以UF-50最高 (24.38%)，干化學法最低(15.31%)；干化學檢測WBC的敏感性較低，有39.55%的假陰性，這是由于干化學試紙只能檢測胞漿中含有白細胞酯酶的粒細胞，而不能測定部分缺乏酯酶的中性粒細胞、全部的淋巴細胞及大部分單核細胞。另外尿液中如含有大量先鋒霉素IV、慶大霉素或尿蛋白＞5g/L時，可導致結果偏低或假陰性[5,11]。因此，對于某些以尿中出現淋巴細胞為主的疾病(如腎結核、器官移植后等)，如果單純進行尿液干化學檢測，就會出現漏診[12]。UF-50和尿沉渣鏡檢法檢測的是全部WBC，故其陽性率高

表1640例尿標本三種方式檢測RBC和WBC陽性率項目例數常規(guī)鏡檢法干化學法UF-50法陽性陽性率陽性陽性率陽性陽性率WBC RBC 640 640 134 123 20.94 19.22 98 217 15.31 33.90 156 188 24.38 29.38于干化學法。干化學法過篩四項全陰的316份尿液標本中，UF-50檢測WBC陽性的27例，尿沉渣鏡檢WBC陽性的21例，UF-50 WBC陽性符合率為91.04%，假陽性為8.96%。檢測發(fā)現尿中鹽類結晶的析出、裸核、上皮細胞、精子、滴蟲等均可導致UF-50檢測WBC出現假陽性。三種方法聯合檢測尿液，UF-50可以防止干化學法檢測WBC的假陰性產生，尿沉渣鏡檢可排除UF-50的假陽性及假陰性產生。

640例尿液標本中，RBC以干化學法陽性率最高(33.90%)，尿沉渣鏡檢法最低(19.22%)。干化學法檢測尿中RBC是利用氧化酶法測定尿中的血紅蛋白，RBC破碎后仍能測出，且靈敏度較高。但該法易受尿中氧化型或還原型物質(如維生素C)的影響導致假陽性或假陰性。表2中，干化學法測RBC假陽性19.92%，其中部分是紅細胞完全破碎后尿沉渣鏡檢的假陰性標本。UF-50與尿沉渣鏡檢法相比有15.47%的假陽性，這80例假陽性標本，通過鏡檢發(fā)現有28份尿液有大量草酸鈣結晶，有12份尿液含有大量細菌，33份標本中含有類酵母菌，占假陽性標本的91.25%。UF-50產生假陽性的原因可能是上述標本中含有的這些顆粒與紅細胞形態(tài)相似，其染色的敏感性及散射光強度與紅細胞類似，在散點圖中與RBC交叉分布，干擾UF-50紅細胞計數而將其誤認為紅細胞[7]。三種方法聯合檢測尿液標本時，干化學法可以彌補尿沉渣鏡檢法和UF-50檢測不到的破碎紅細胞的不足，尿沉渣鏡檢法可以排除UF-50對尿中結晶、類酵母菌等引起的假陽性干擾，UF-50還可以通過檢測尿液中的RBC的變異性和均一性來鑒別血尿來源，有助于臨床了解泌尿系統(tǒng)出血部位[1，2，5]。

尿液中有形成分復雜，形態(tài)變化較大，管型與上皮細胞及黏液絲的形態(tài)大小，染色性有許多相似之處，當尿標本中含有大量上皮細胞，又同時含有非晶型鹽類、細菌等微粒附著時，儀器會將這些物質判定為管型的內容物而出現假陽性，從而造成相對較高的病理管型，出現假陽性結果。在實際工作中，當UF-50尿沉渣分析儀檢出管型，尤其提示病理管型時，應與干化學結果進行綜合分析并做尿沉渣鏡檢進行復核，減少儀器檢查帶來的誤差。

綜上所述，尿液干化學法和尿沉渣分析儀檢測只能作為尿液有形成分檢測的過篩試驗，對于干化學和UF-50兩者結果不符合及一些特殊標本務必進行尿沉渣鏡檢復查，以保證檢驗結果的可靠性[13-14]。在尿干化學、尿沉渣分析儀法結果均為陰性時，方可免去尿沉渣鏡檢[15]。建議各實驗室根據自己的尿液分析系統(tǒng)建立室內質控程序和適合本檢測系統(tǒng)的尿沉渣復檢規(guī)則，只有將三種方法有機結合，互為補充，才能提高檢驗質量，保證檢驗結果的準確性。

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