自制與進(jìn)口鹽酸左西替利嗪片溶出度比較

李 鶯，吳 燕，劉麗平，郭雙艷

(中國人民解放軍空軍總醫(yī)院，北京 100142)

鹽酸左西替利嗪為口服選擇性組胺H1受體拮抗劑，主要用于緩解變態(tài)反應(yīng)性疾病的過敏癥狀，臨床上用于治療變應(yīng)性鼻炎、蕁麻疹、血管神經(jīng)性水腫等皮膚黏膜過敏性疾病。目前，溶出度考察一般采用單點(diǎn)控制方法[1]，很難真正控制藥品的內(nèi)在質(zhì)量。為了更好地考察自制片劑與進(jìn)口片劑的質(zhì)量一致性，本試驗(yàn)通過 f2因子比較法評(píng)價(jià)鹽酸左西替利嗪自制片與進(jìn)口片體外溶出度曲線的相似性，為處方工藝優(yōu)化提供依據(jù)。

1 儀器與試藥

ZRS-8G型智能溶出試驗(yàn)儀(天津天大天發(fā)科技有限公司);UV-2401型紫外分光光度計(jì)(日本島津);BT125D電子天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司);KQ-300DE型數(shù)控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);Spin215微型高速離心機(jī)(北京東迅天地醫(yī)療儀器有限公司)。鹽酸左西替利嗪對(duì)照品(中國藥品生物制品檢定所，批號(hào)為100659-200401);鹽酸左西替利嗪自制咀嚼片(空軍總醫(yī)院藥學(xué)部制劑研究室，批號(hào)為20110901，20110903，20110905，規(guī)格5 mg);鹽酸左西替利嗪進(jìn)口片(批號(hào)為8231，規(guī)格5 mg);鹽酸、冰醋酸、醋酸鈉、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鈉、無水乙酸鈉、氫氧化鈉均為分析純，蒸餾水(空軍總醫(yī)院自制)。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶出條件確定

依據(jù)2010年版《中華人民共和國藥典(二部)》標(biāo)準(zhǔn)及參照日本《醫(yī)療用藥品品質(zhì)情報(bào)集》中溶出度試驗(yàn)條件推薦使用的4種溶劑分別測(cè)定。取本品，照溶出度測(cè)定法[2010年版《中華人民共和國藥典(二部)》附錄ⅩC]，方法為槳法，轉(zhuǎn)速為50 r/min，分別以水、0.1 mol/L的鹽酸、pH=4.0的醋酸鹽緩沖液、pH=6.8的磷酸鹽緩沖液為溶出介質(zhì)，溫度為37℃，取樣點(diǎn)分別為5，10，15，20，30，45 min，取溶出液 10 mL，并立即補(bǔ)加同溫度溶出介質(zhì)10 mL，溶出液用0.45μm微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液;另精密稱取105℃干燥至恒重的鹽酸左西替利嗪對(duì)照品10 mg于200 mL量瓶中，加溶出介質(zhì)溶解并定容至刻度，搖勻，作為對(duì)照品貯備液;另分別精密量取貯備液1 mL至10 mL量瓶中，加溶出介質(zhì)稀釋至刻度，搖勻，制成質(zhì)量濃度為5μg/mL的對(duì)照品溶液。

2.2 測(cè)定方法建立

取鹽酸左西替利嗪對(duì)照品適量，加溶出介質(zhì)稀釋至刻度，搖勻，配制成鹽酸左西替利嗪質(zhì)量濃度為5μg/mL的溶液，在200～400 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描，結(jié)果鹽酸左西替利嗪在各溶出介質(zhì)下230 nm波長(zhǎng)處有最大吸收;另稱取處方比例的輔料(采用4種溶劑分別制備)，經(jīng)紫外吸收?qǐng)D譜掃描可看出，各溶出介質(zhì)條件下輔料溶液在本品的最大吸收波長(zhǎng)230 nm處無紫外吸收，對(duì)鹽酸左西替利嗪的定量測(cè)定無影響。

2.3 方法學(xué)考察

標(biāo)準(zhǔn)曲線制備:精密稱取105℃干燥至恒重的鹽酸左西替利嗪對(duì)照品10 mg，置200 mL容量瓶中，分別加溶出介質(zhì)稀釋至刻度，搖勻，配制成質(zhì)量濃度為50μg/mL的對(duì)照品貯備液，再分別用溶出介質(zhì)逐級(jí)稀釋成 1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0，7.0 μg/mL的溶液，在230 nm波長(zhǎng)處分別測(cè)定其吸光度值。結(jié)果見表1，表明各條件下線性關(guān)系均良好。

表1 標(biāo)準(zhǔn)曲線試驗(yàn)結(jié)果

精密度試驗(yàn):量取用各溶出介質(zhì)稀釋制成5μg/mL的對(duì)照品溶液，在230 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，平行測(cè)定6次。結(jié)果各條件下的 RSD分別為 0.65%(水)，0.94%(0.1 mol/L鹽酸)，0.13%(pH=4.0醋酸鹽緩沖液)，0.56%(pH=6.8磷酸鹽緩沖液)。

加樣回收試驗(yàn):按處方比例稱取輔料量，分別加入該處方量對(duì)應(yīng)的50%，80%，100%量的鹽酸左西替利嗪對(duì)照品，加溶出介質(zhì)稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液;另精密稱取鹽酸左西替利嗪對(duì)照品適量，用溶出介質(zhì)稀釋成5μg/mL的溶液作為對(duì)照品溶液。取供試品和對(duì)照品溶液分別進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果見表2，表明各溶出介質(zhì)中回收率試驗(yàn)結(jié)果均良好。

表2 鹽酸左西替利嗪在不同溶出介質(zhì)中回收率試驗(yàn)結(jié)果

2.4 樣品溶出度測(cè)定

取3批鹽酸左西替利嗪自制咀嚼片及進(jìn)口片，分別測(cè)定4種溶出介質(zhì)條件下不同時(shí)間的溶出百分率，溶出曲線見圖1。

2.5 溶出曲線相似性比較(f2因子法)

將鹽酸左西替利嗪咀嚼片自制片3個(gè)批號(hào)的溶出曲線與進(jìn)口片溶出曲線按下列公式分別進(jìn)行相似性比較。

其中 R t代表鹽酸左西替利嗪咀嚼片自制片在第t時(shí)間的平均累積釋放度，T t代表鹽酸左西替利嗪進(jìn)口片在第t時(shí)間的平均累積釋放度，n代表測(cè)試點(diǎn)數(shù)(n=6)。結(jié)果見表3?？梢姡?個(gè)批號(hào)的自制片與進(jìn)口片相比較，f2均大于50，溶出曲線相似，且3個(gè)批號(hào)之間相似性無明顯差異，表明處方工藝合理，生產(chǎn)工藝可靠。

3 討論

表3 鹽酸左西替利嗪咀嚼片自制片與進(jìn)口片 f2因子比較

f2因子法是美國食品與藥物管理局(FDA)推薦使用定量比較試驗(yàn)制劑與參比制劑溶出性質(zhì)的差異的方法，描述制劑體外溶出曲線相似性的非模型依賴方法。該方法可判斷不同處方對(duì)藥物釋放的影響程度，從而篩選出與進(jìn)口片溶出性能優(yōu)異的產(chǎn)品的相似處方，為新藥申報(bào)注冊(cè)的生物等效性試驗(yàn)做前瞻性預(yù)測(cè)。f2大于50時(shí)即可認(rèn)為曲線相似，f2越大表明曲線越相似[2-4]。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，自制片與進(jìn)口片溶出曲線具有一致性，在一定程度上反映了自制制劑與對(duì)照制劑的處方工藝的一致性。目前，我國藥品申報(bào)中仿制藥申請(qǐng)占據(jù)了較大比例，保證仿制藥品與上市藥品具有質(zhì)量等同性，是仿制藥研究應(yīng)該遵循的基本原則[5]，仿制研究時(shí)應(yīng)進(jìn)行多層面的質(zhì)量對(duì)比研究，其中溶出度對(duì)比研究是工藝處方篩選的重要依據(jù)之一。同時(shí)，本試驗(yàn)還可為建立體內(nèi)外相關(guān)性提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

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