徐桂瓊 葉奕菁 陸小軍
廣東省中山市人民醫(yī)院腫瘤放療科,廣東中山 528400
環(huán)氧化酶-2在放療后復(fù)發(fā)喉癌中的表達(dá)
徐桂瓊 葉奕菁 陸小軍
廣東省中山市人民醫(yī)院腫瘤放療科,廣東中山 528400
目的 研究環(huán)氧化酶-2與喉癌對放療抗拒之間的關(guān)系,改善喉癌患者的生存率。 方法 選取122例早期喉癌患者,其中包括了61例放療敏感組和61例放療抗拒組。所有患者都單純行根治性放療。用免疫組化的方法檢測治療前活檢標(biāo)本中COX-2的表達(dá)情況。 結(jié)果 在放療抗拒組,61例中有41例(67%)腫瘤COX-2陽性。放療敏感組,61例患者僅25例(41%)COX-2蛋白陽性(P=0.004)。COX-2蛋白表達(dá)和腫瘤T分期無明顯相關(guān)(P=0.08),且和腫瘤的分化程度(P=0.181)及聲門上或聲門區(qū)(P=0.757)無相關(guān)性。COX-2表達(dá)和放療抗拒患者喉癌復(fù)發(fā)時間無相關(guān)性(P=0.126)。COX-2用作早期喉癌放療是否敏感的預(yù)測因子準(zhǔn)確度為67%。 結(jié)論 COX-2可作為喉癌對放療是否敏感的預(yù)測因子,聯(lián)合其他生物標(biāo)志也或許將提高預(yù)測是否放療敏感的準(zhǔn)確性。
COX-2;喉癌;放療抗拒
(PG)和血栓烷的關(guān)鍵酶,包括COX-1和COX-2兩種異構(gòu)酶[3]。環(huán)氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)是參與合成前列腺素的一種誘導(dǎo)酶,高表達(dá)COX-2的細(xì)胞對細(xì)胞凋亡抗拒。Tsujii等[4]描述了高表達(dá)COX-2的細(xì)胞對細(xì)胞凋亡抗拒,而細(xì)胞凋亡是放射致電離損傷后細(xì)胞死亡的重要機(jī)制。因此COX-2高表達(dá)可能和腫瘤對放療抗拒有關(guān)。本研究通過檢測COX-2在放療后復(fù)發(fā)喉癌中的表達(dá)情況,了解COX-2和喉癌放療抗拒是否相關(guān),現(xiàn)報道如下。
1.1 一般資料
選取筆者所在醫(yī)院1999年1月1日~2010年12月31日單純行根治性放療的喉鱗狀細(xì)胞癌患者122例。入組條件:(1)在確診喉癌之前沒有腫瘤病史;(2)治療前有明確的TNM分期;(3)單純接受根治性放療。根據(jù)放療后是否復(fù)發(fā)將患者分為放療抗拒組和放療敏感組。放療抗拒組61例,其中,男53例,女8例,平均年齡(64.0±9.7)歲,T1N0M0 Ⅰ期43例,T2N0M0 Ⅱ期18例。放療敏感組61例,其中,男51例,女10例,平均年齡(63.0±10.6)歲,T1N0M0 Ⅰ期 43例,T2N0M0 Ⅱ期18例。兩組患者的性別、年齡、腫瘤分期、腫瘤發(fā)生部位及腫瘤分化程度方面差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。放療結(jié)束6個月后原來腫瘤位置新出現(xiàn)腫瘤且病理類型和放療前一致定義為喉癌復(fù)發(fā)。復(fù)發(fā)患者歸到放療抗拒組,放療結(jié)束隨訪3年無腫瘤復(fù)發(fā)歸到放療敏感組。
1.2 方法
取患者治療前病理活檢蠟塊,采用免疫組化的方法檢測COX-2分子。鼠抗人COX-2單克隆抗體、Envision試劑盒、DAB顯色試劑盒均購自廣州儀濤科學(xué)儀器有限公司。操作按說明書進(jìn)行:石蠟切片常規(guī)脫蠟水化,3%過氧化氫封閉內(nèi)源性過氧化酶20 min,高溫高壓修復(fù)抗原20 min,加入鼠抗人COX-2單克隆抗體(1︰100,4℃過夜),PBS洗片后加入生物素標(biāo)記的二抗10 min,DAB顯色,蘇木精復(fù)染、脫水、透明封片。PBS代替一抗作為陰性對照,人乳腺癌標(biāo)本作為陽性對照。COX-2染色結(jié)果判定以胞漿內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒視為陽性細(xì)胞。在10×40高倍視野下,隨機(jī)選10個視野,按腫瘤細(xì)胞中陽性比例計算百分率。陰性:陽性細(xì)胞面積<10%;陽性:陽性細(xì)胞的面積≥10%。
1.3 統(tǒng)計學(xué)處理
使用SPSS16.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,計數(shù)資料采用x2檢驗,P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
2.1 兩組COX-2表達(dá)情況
在放療抗拒組中,61例患者有41例(67%)腫瘤COX-2陽性,20例COX-2陰性。放療敏感組中,61例患者僅25例(41%)COX-2陽性。兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.004)。COX-2預(yù)測喉癌對放療抗拒的特異性為59%,敏感性為67%,陰性預(yù)測值64%,陽性預(yù)測值61%。見表1。
表1 放療抗拒組和敏感組COX-2表達(dá)情況
2.2 COX-2表達(dá)和T分期、腫瘤原發(fā)部位、腫瘤細(xì)胞分化程度的關(guān)系
T1N0M0 Ⅰ期患者共86例,COX-2陽性40例(46.5%),T2N0M0 Ⅱ期36例,COX-2陽性26例(72.2%),COX-2表達(dá)和腫瘤T分期無相關(guān)性(x2=6.76,P=0.09)。并且COX-2表達(dá)和腫瘤原發(fā)部位(聲門上區(qū)、聲門區(qū))、腫瘤細(xì)胞的分化程度均無相關(guān)性。見表 2、3、4。
表2 COX-2表達(dá)和T分期的關(guān)系
表3 COX-2表達(dá)和腫瘤原發(fā)部位的關(guān)系
表4 COX-2表達(dá)和腫瘤細(xì)胞分化程度的關(guān)系
COX-2是合成前列腺素的一種誘導(dǎo)酶,一般不存在正常細(xì)胞中,在腫瘤細(xì)胞中可被一些細(xì)胞因子、癌基因、生長因子等誘導(dǎo)后表達(dá)[5]?;谇傲邢偎卦诩?xì)胞凋亡、血管生成、細(xì)胞增殖、免疫監(jiān)控等方面的作用,COX-2表達(dá)可能與腫瘤的發(fā)生發(fā)展有關(guān),但其機(jī)制尚未完全明確。迄今為止仍沒有預(yù)測腫瘤對放療是否敏感的因子應(yīng)用于臨床。本研究放療后復(fù)發(fā)喉癌患者中COX-2陽性率為67%,而無復(fù)發(fā)組COX-2陽性率僅為41%,兩組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.004),表明COX-2和腫瘤對放療抗拒相關(guān)。COX-2陽性預(yù)測喉癌對放療抗拒的特異性為59%,敏感性為67%。為盡可能減少混淆因素,本研究定義腫瘤復(fù)發(fā)需滿足2個條件:(1)患者必需接受了根治性放射治療且復(fù)發(fā)見于原腫瘤解剖位置;(2)復(fù)發(fā)與初診時的病理類型相同。這樣排除了將頭頸部第二癌誤認(rèn)為是腫瘤復(fù)發(fā)的情況。并且僅采用治療前的組織蠟塊檢測COX-2可避免放射治療對檢測結(jié)果所造成的影響。
COX-2表達(dá)和腫瘤對放療抗拒相關(guān)這一發(fā)現(xiàn)對臨床上可能有兩點重要意義。首先,COX-2可能作為預(yù)測腫瘤對放療抗拒的一種標(biāo)志物。在早期喉癌患者中,COX-2陽性可選擇手術(shù)治療作為一線治療方案,因?qū)τ谠缙诤戆┦中g(shù)和放射治療具有相同的治療效果;而COX-2陰性患者則可選擇放射治療作為根治性治療手段,得以保存器官的完整性和保留發(fā)音功能,生存質(zhì)量大大的提高。其次,COX-2抑制劑可能作為放療增敏劑用于治療腫瘤。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)COX-2拮抗劑可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡[6]。NS-398,一種特異性COX-2阻斷劑,有增強(qiáng)放療效果的作用,且主要表現(xiàn)在高表達(dá)COX-2的腫瘤細(xì)胞中[7]。COX-2抑制劑不影響小鼠正常組織的放射治療反應(yīng),可能是由于正常組織中一般不表達(dá)COX-2分子[8]。放射治療在治療喉癌方面有很多優(yōu)勢。如果治療前能夠識別出腫瘤對放療是否敏感,就可指導(dǎo)臨床醫(yī)生選擇個體化的治療方案,在控制腫瘤方面具有更明確的方向。COX-2可作為喉癌對放療是否敏感的預(yù)測因子,聯(lián)合其他生物標(biāo)志也或許將提高預(yù)測是否放療敏感的準(zhǔn)確性。
[1] 殷蔚伯,余子豪,徐國鎮(zhèn),等.腫瘤放射治療學(xué)[M].第4版.北京:中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)出版社,2008:399-406.
[2] Jrgensen C,Godballe O.Cancer of the larynx treatment results after primary radiotheraphy with salvage surgery in a series of 1005 patients[J]. Acta Oncologica,2002,41(6):69-76.
[3] Singh-Ranger G,Mokbel K. The role of cyclooxygenase-2(COX-2)inbreast cancer,and implications of COX-2 inhibition[J]. Eur J Surg Oncol,2002,28(10):729-737.
[4] Tsujii M,DuBois RN. Alterations in cellular adhesion and apoptosis in epithelial cells overexpressing prostaglandin endoperoxide synthase 2[J]. Cell,1995,83(4):493-501.
[5] Fosslien E. Molecular pathology of cyclooxygenase-2 in neoplasia[J]. Ann Clin Lab Sci,2000,30(1):3-21.
[6] Pruthi RS,Derksen E,Gaston K. Cyclooxygenase-2 as a potential target in the prevention and treatment of genitourinary tumors:a review[J]. J Urology,2003,169(5):2352-2359.
[7] Pyo H,Choy H,Amorino GP,et al. A selective cyclooxygenase-2 inhibitor,NS-398, enhances the effect of radiation in vitro and in vivo preferentially on the cells that express cyclooxygenase-2[J]. Clin Cancer Res,2001,25(7):2998-3005.
[8] Silverstein FE,F(xiàn)aich G,Goldstein JL,et al. Gastrointestinal toxicity with celecoxib vs nonsteroidal anti-inflammatory drugs for osteoarthritis and rheumatoid arthritis:the CLASS study: a randomized controlled trial.Celecoxib Long-term Arthritis Safety Study[J]. JAMA,2000,284(11):1247-1255.
Expression of COX-2 protein in recurrent laryngeal cancer after radiatheraphy
XU Guiqiong YE Yijing LU Xiaojun
Department of Radiatheraphy, the People's Hospital of Zhongshan City in Guangdong Province, Zhongshan 528400,China
ObjectiveTo investigate the relationship between COX-2 expression and radioresistance in laryngeal cancer,and Improve the survival rate of patients with laryngeal cancer.MethodsThe group comprised of 61 radioresistant and 61 radiosensitive patients matched for T stage, laryngeal subsite, gender and smoking history. All patients were treated with only radiotherapy for curative intent. Using immunohistochemical techniques to examine the expression of COX-2 protein in 122 laryngeal biopsies before treatment.ResultsCOX-2 positive expression was detected in 41 of 61 (67%) biopsy samples from patients with radioresistant tumours and 25 of 61 (41%) radiosensitive tumours. Positive expression was significantly associated with radioresistant tumours (P=0.004). Cox-2 has 67% accuracy in predicting radiotherapy failure. There was no significant association among COX-2 expression and T stage (P=0.08), degree of tumour differentiation (P=0.181) or laryngeal glottic or supraglottic subsite(P=0.757). COX-2 expression was also not related to time of recurrence in the radioresistant group (P=0.126).ConclusionCOX-2 may have prognostic value in predicting response to radiotherapy. If combined with other biological marker, the predicted accuracy may increase.
COX-2; Laryngeal cancer; Radioresistance喉癌是頭頸部的常見惡性腫瘤,早期喉癌(T1~T2N0M0)采用手術(shù)治療或放射治療,總的生存率相似[1]。放射治療可保留患者的發(fā)音功能和吞咽功能的完整性,提高患者治療后的生活質(zhì)量。放射治療是根治早期喉癌的主要手段,但遺憾的是放射治療仍有約10%~25%的失敗率。T1期大約有10%、T2期大約有25%放射后復(fù)發(fā)[2]。這表明被廣泛用于指導(dǎo)治療的TNM分期并不能個體化的評估患者對放射治療的反應(yīng)。放療失敗后再進(jìn)行挽救性手術(shù)使得手術(shù)難度增大,并發(fā)癥增多。如果能夠預(yù)測并治療放療拮抗將改善喉癌患者的生存率。環(huán)氧合酶(cyclooxygenase,COX)是花生四烯酸轉(zhuǎn)化為前列腺素
R739.65
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2095-0616(2012)11-22-03
2012-04-05)