• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    首烏藤總黃酮的抑菌活性研究

    2012-10-26 00:41:50段玉峰王蓓蓓羅喻紅鄒柯婷杜曉旭史俊燕
    食品工業(yè)科技 2012年9期
    關(guān)鍵詞:首烏藤李斯特懸液

    楊 聞,段玉峰,王蓓蓓,羅喻紅,鄒柯婷,杜曉旭,史俊燕

    (陜西師范大學(xué)食品工程與營(yíng)養(yǎng)科學(xué)學(xué)院,陜西西安 710062)

    首烏藤總黃酮的抑菌活性研究

    楊 聞,段玉峰*,王蓓蓓,羅喻紅,鄒柯婷,杜曉旭,史俊燕

    (陜西師范大學(xué)食品工程與營(yíng)養(yǎng)科學(xué)學(xué)院,陜西西安 710062)

    研究首烏藤總黃酮的體外抑菌效果,為首烏藤的進(jìn)一步廣泛開發(fā)利用提供理論依據(jù)。用打孔法測(cè)定首烏藤總黃酮的抑菌作用,酸堿和紫外光處理對(duì)首烏藤總黃酮抑菌活性的影響。結(jié)果表明,首烏藤總黃酮對(duì)金黃色葡萄球菌、腸炎沙門氏菌、鼠傷寒桿菌、李斯特桿菌的最小抑菌濃度(MIC)分別為6.25%、12.5%、12.5%、3.125%;對(duì)枯草芽孢桿菌、蠟狀芽孢桿菌、大腸桿菌的抑菌作用較不明顯。pH和紫外光對(duì)首烏藤總黃酮的抑菌性均有一定程度的影響。

    首烏藤,總黃酮,抑菌活性

    首烏藤,為衛(wèi)生部公布的藥食同源中藥品種之一,是寥科植物何首烏的藤莖或帶葉藤莖,又名夜交藤,最早記載于《日華子諸家本草》或《開寶本草》,而后《證類本草》、《滇南本草》、《本草綱目》等均有記載,李時(shí)珍在《本草綱目》中描述,其味甘性平,歸心、肝經(jīng),具有養(yǎng)心安神、通絡(luò)祛風(fēng)之功效[1]。而藥食同源中藥中普遍含有黃酮類化合物,具有抗癌、抗腫瘤、保護(hù)心腦血管、免疫調(diào)節(jié)、抗菌、抗病毒以及抗氧化、抗衰老等作用[2]。宋毅等研究了首烏藤黃酮提取物體內(nèi)和體外抗氧化實(shí)驗(yàn),證明首烏藤黃酮提取物對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、肺炎鏈球菌等都有抑制作用,對(duì)慢性炎癥有抗炎作用,對(duì)急性炎癥的抗炎作用不明顯[3],但是沒(méi)有給出首烏藤黃酮提取物的最小抑菌濃度。目前對(duì)首烏藤化學(xué)成分方面研究較少且僅限于對(duì)其中蒽醌類包括大黃素、大黃酚及大黃素甲醚的研究,國(guó)內(nèi)外對(duì)于首烏藤黃酮類化合物的抑菌作用報(bào)道較少且不系統(tǒng)。因此,本研究以市售經(jīng)鑒定的首烏藤為原料,對(duì)其總黃酮的抑菌活性進(jìn)行了研究,為有效地開發(fā)利用首烏藤提供科學(xué)的依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料與儀器

    首烏藤 陜西省藥材公司提供,陜西師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院植物學(xué)教研室鑒定;金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大腸桿菌(Escherichia coli)、枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)、蠟狀芽孢桿菌(Bacillus cereus)、腸炎沙門氏菌(Bacillus enteritidis)、鼠傷寒桿菌(Baciltyphimurium)、李斯特桿菌(Listeria) 均由陜西師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院微生物實(shí)驗(yàn)室提供;培養(yǎng)基 牛肉膏3g,蛋白胨10g,瓊脂粉15g,水1000m L,pH為7.1~7.3,完全溶解后裝入三角瓶中,加塞并在棉塞外包一層報(bào)紙并用麻繩捆扎,放入殺菌鍋內(nèi)121℃滅菌20m in[4];石油醚,無(wú)水乙醇,無(wú)菌生理鹽水,0.1mol/L的Na2CO3溶液,生理鹽水等。

    GSP-9080MBE型隔水式恒溫培養(yǎng)箱 上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠;SW-CJ-1F凈化工作臺(tái) 蘇凈集團(tuán)蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司;RE-52AA型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 上海亞榮生化儀器廠;AL204型電子天平 梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司;KQ-200KDE型高功率數(shù)控超聲波清洗器 昆山市超聲儀器有限公司。

    1.2 實(shí)驗(yàn)方法

    1.2.1 首烏藤總黃酮的制備 稱取干燥粉碎的首烏藤3kg,過(guò)40目篩,先用石油醚脫脂12h,揮干石油醚,得到脫脂的首烏藤干粉,然后以料液比1∶15(g/m L),50%乙醇作為溶劑,進(jìn)行超聲輔助提取,提取溫度60℃,超聲時(shí)間40m in,超聲功率200W,提取兩次[5]。提取液過(guò)濾后減壓濃縮并冷凍干燥,得到干的首烏藤總黃酮提取物。

    1.2.2 培養(yǎng)基的制備[6]無(wú)菌條件下將適量培養(yǎng)基置于已滅菌的培養(yǎng)皿內(nèi)至凝固,每個(gè)皿的量相等。

    1.2.3 菌種活化 無(wú)菌條件下,將供試菌種接種于相應(yīng)的試管斜面培養(yǎng)基上,37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后,0~4℃冷藏室冷卻備用。

    1.2.4 菌懸液的配制 預(yù)先把各種供試菌種用適宜的培養(yǎng)基進(jìn)行菌種斜面活化,在無(wú)菌條件下用無(wú)菌生理鹽水沖洗斜面培養(yǎng)基直至將供試菌種全部沖洗至離心管中,3000r/m in離心5min,棄去上層清液,底部沉淀的細(xì)菌用一定量的無(wú)菌生理鹽水移至三角瓶中,振蕩搖勻制成菌懸液。將菌懸液稀釋成若干梯度,選取濃度較小的梯度用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板鏡檢計(jì)數(shù),計(jì)算出菌懸液的濃度,選取106~107個(gè)/m L濃度備用。

    1.2.5 打孔法測(cè)定首烏藤總黃酮的抑菌作用[7-8]分別取各種供試菌懸液0.1m L于相應(yīng)的平皿上,用L棒將菌懸液涂布均勻,用滅過(guò)菌的打孔器在培養(yǎng)皿中間部位打孔,無(wú)菌條件下,每個(gè)孔注入0.1m L首烏藤總黃酮溶液,以注入無(wú)菌水為對(duì)照,置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后觀察,每組實(shí)驗(yàn)重復(fù)三次,取平均值。

    1.2.6 首烏藤總黃酮的最小抑菌濃度(MIC)[9]采用二倍稀釋法,將首烏藤總黃酮溶液用無(wú)菌水稀釋為原溶液的50%、25%、12.5%、6.25%、3.125%、1.563%六個(gè)濃度,在無(wú)菌平皿中分別加入1m L不同濃度的稀釋液,然后倒入15m L培養(yǎng)基充分混合均勻,冷卻凝固后取0.1m L供試菌懸液于平板上涂布均勻,置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后觀察,每組重復(fù)三次,取平均值。

    1.2.7 酸堿性對(duì)首烏藤總黃酮抑菌活性的影響[7]用0.1mol/L的Na2CO3和HCl將各種供試菌最低抑菌濃度下的首烏藤總黃酮溶液調(diào)節(jié)pH分別為4、5、6、7、8、9的一系列溶液,在無(wú)菌平皿中分別加入1m L不同pH的首烏藤總黃酮稀釋液,倒入15m L培養(yǎng)基混合均勻,冷卻凝固后取0.1m L相對(duì)應(yīng)的供試菌懸液于平板上涂布均勻,置于37℃下培養(yǎng)24h后觀察,每種細(xì)菌每個(gè)pH梯度平行做三組。

    1.2.8 紫外光處理對(duì)首烏藤總黃酮抑菌活性的影響[7]將各種供試菌最低抑菌濃度下首烏藤總黃酮溶液置于紫外燈下30cm左右處分別照射10、20、30、40、50、60、70m in后,在對(duì)應(yīng)的無(wú)菌平皿中分別加入1m L處理過(guò)的首烏藤總黃酮稀釋液,倒入15m L培養(yǎng)基混合均勻,冷卻凝固后取0.1m L相對(duì)應(yīng)的供試菌懸液于平板上涂布均勻,置于37℃下培養(yǎng)24h后觀察,每種細(xì)菌每個(gè)處理時(shí)間梯度平行做三組。

    2結(jié)果與分析

    2.1 首烏藤總黃酮的抑菌效果

    由表1可知,首烏藤總黃酮溶液對(duì)金黃色葡萄球菌、腸炎沙門氏菌、鼠傷寒桿菌、李斯特桿菌的抑菌作用比較明顯,而對(duì)于枯草芽孢桿菌、蠟狀芽孢桿菌、大腸桿菌的抑菌作用不明顯。

    表1 首烏藤總黃酮的平均抑菌圈直徑(mm)Table 1 Antimicrobial circle diameter of total flavonoids from Caulis PolygoniMultifori(mm)

    由表2可知,首烏藤總黃酮溶液對(duì)金黃色葡萄球菌、腸炎沙門氏菌、鼠傷寒桿菌、李斯特桿菌的最小抑菌濃度分別為6.25%、12.5%、12.5%、3.125%,尤其是對(duì)李斯特桿菌具有明顯的抑制效果。

    表2 首烏藤總黃酮的MICTable 2 MIC of total flavonoids from Caulis PolygoniMultifori

    2.2 pH處理對(duì)首烏藤總黃酮抑菌活性的影響

    由表3可知,首烏藤總黃酮溶液在不同pH條件下,對(duì)這四種菌的抑菌效果是有差異的,但是總體看來(lái)pH為5~6時(shí)溶液的抑菌效果最好,在pH保持為7時(shí),對(duì)李斯特桿菌仍有良好的抑菌效果。

    表3 pH對(duì)首烏藤總黃酮抑菌活性的影響Table 3 The antimicrobial effects of total flavonoids from Caulis PolygoniMultifori with different pH

    2.3 紫外光線對(duì)首烏藤總黃酮抑菌活性的影響

    由表4可知,20m in以內(nèi)的紫外光線照射對(duì)首烏藤總黃酮的抑菌活性不會(huì)產(chǎn)生明顯的影響,超過(guò)20m in其抑菌能力會(huì)出現(xiàn)不同程度的減弱。紫外光照射對(duì)金黃色葡萄球菌和鼠傷寒桿菌的影響最大,李斯特桿菌的敏感度最低。

    表4 紫外光照射對(duì)首烏藤總黃酮抑菌活性的影響Table 4 Effectof ultraviolet radiation on antibiotic activity of total flavonoids from Caulis PolygoniMultifori

    3 結(jié)論

    用打孔法對(duì)首烏藤總黃酮的抑菌性測(cè)定可以看出,首烏藤總黃酮對(duì)一部分細(xì)菌具有較明顯的抑制作用,尤其對(duì)李斯特桿菌、鼠傷寒桿菌、腸炎沙門氏菌、金黃色葡萄球菌的抑菌作用較為明顯。首烏藤總黃酮抑菌成分在弱酸性條件下比較穩(wěn)定,最佳抑菌pH范圍是5~6;首烏藤總黃酮在紫外光線照射下20m in以內(nèi),抑菌成分比較穩(wěn)定,超過(guò)20m in,抑菌成分的化學(xué)結(jié)構(gòu)可能會(huì)發(fā)生變化,抑菌能力降低。

    實(shí)驗(yàn)證明,首烏藤黃酮可作為一種理想的抑菌添加劑,預(yù)防和抵抗對(duì)李斯特桿菌、腸炎沙門氏菌、鼠傷寒桿菌和金黃色葡萄菌所引起的感染,這為找到天然抑菌有機(jī)化合物提供了理論依據(jù)。

    [1]薛詠梅,李智敏,孫贅,等.夜交藤的研究與開發(fā)進(jìn)展[J].云南中醫(yī)學(xué)院報(bào),2008,31(1):64-67.

    [2]牛鵬飛,段玉峰,仇農(nóng)學(xué),等.玉米須中不同極性黃酮類化合物的抗氧化活性比較[J].西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2006,15(5):72-74,79.

    [3]宋毅,唐堯,張志勇,等.夜交藤抗炎抑菌作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].華西藥業(yè),2003,18(2):112-114.

    [4]井樂(lè)剛,張永忠,田璐,等.大豆異黃酮抗菌活性研究[J].生物技術(shù)通訊,2004,15(9):477-478.

    [5]肖揚(yáng),段玉峰.超聲輔助提取首烏藤黃酮及其抗氧化活性的研究[J].農(nóng)產(chǎn)品加工·學(xué)刊,2009,6(6):38-40.

    [6]張益娜.新疆沙棘葉黃酮類化合物提取、純化及抑菌性研究[D].烏魯木齊:新疆農(nóng)業(yè)大學(xué),2007.

    [7]林亮.化香樹果序黃酮類化合物提取、分離及抗菌活性研究[D].西安:西北大學(xué),2009.

    [8]項(xiàng)昭保,何從林,任紹光,等.野生橄欖黃酮抑菌效應(yīng)及其在牛奶保鮮中的應(yīng)用[J].食品工業(yè)科技,2004,25(10):69-70.

    [9]滕海鵬,仲山民,毛勝鳳,等.菊米總黃酮的超聲波提取及其體外抗菌實(shí)驗(yàn)[J].浙江林業(yè)科技,2009,29(3):68-72.

    Study on bacteriostasis activity of total flavonoids from Caulis PolygoniMultifori

    YANG W en,DUAN Yu-feng*,WANG Bei-bei,LUO Yu-hong,ZOU Ke-ting,DU Xiao-xu,SHI Jun-yan
    (College of Food Engineering and Nutritional Science,ShaanxiNormal University,Xi’an 710062,China)

    The bacteriostasis effects of total flavonoids from Caulis Polygoni Multifori were stud ied,which p rovided a theoretical basis for further extensive research on Caulis PolygoniMultifori.The punch method was used to determ ine the bacteriostasis effects of total flavonoids from Caulis PolygoniMultifori.The effects of pH and UV treatment on the bacteriostasis activity of total flavonoids from Caulis PolygoniMultifori were evaluated. The results showed thatm inimum inhibitory concentration(MIC)values were Staphylococcus aureus 6.25%,Salmonella enieritid is 12.5%,Salmonella typhimurium 12.5%,Listeria spp 3.125%.The results were not obvious for Bacillus subtilis,Bacillus ceereus and Escherichia coli.There were some influence from pH and ultraviolet rad iation for bac teriostasis effects.

    Caulis PolygoniMultiflori;total flavonoids;bacteriostasis activity

    TS201.2

    A

    1002-0306(2012)09-0111-03

    2011-07-18 *通訊聯(lián)系人

    楊聞(1986-),男,碩士研究生,研究方向:天然產(chǎn)物化學(xué)。

    陜西省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(2006B18)。

    猜你喜歡
    首烏藤李斯特懸液
    我請(qǐng)鴿子來(lái)吃飯
    幼兒園(2019年7期)2019-09-05 17:49:18
    首烏藤外治皮膚病妙方
    首烏藤總黃酮提取工藝優(yōu)化及抗氧化性研究
    磺胺嘧啶銀混懸液在二度燒傷創(chuàng)面治療中的應(yīng)用
    薯蕷皂苷元納米混懸液的制備
    中成藥(2017年9期)2017-12-19 13:34:28
    基于特異質(zhì)大鼠膽紅素相關(guān)轉(zhuǎn)運(yùn)體功能抑制探討首烏藤肝損傷機(jī)制
    霧化吸入布地奈德混懸液治療COPD急性加重期的效果觀察
    保持肅靜
    首烏藤質(zhì)量與養(yǎng)血安神膠囊中大黃素含量相關(guān)性分析*
    美國(guó)FDA批準(zhǔn)達(dá)蘆那韋口服混懸液上市
    国产精品自产拍在线观看55亚洲| 黄片大片在线免费观看| 波多野结衣高清无吗| 成人欧美大片| 精品无人区乱码1区二区| 床上黄色一级片| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 欧美黄色淫秽网站| 岛国在线免费视频观看| 无遮挡黄片免费观看| www日本在线高清视频| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 成人午夜高清在线视频| 一a级毛片在线观看| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 狂野欧美激情性xxxx| 精品免费久久久久久久清纯| 国内精品久久久久久久电影| 婷婷六月久久综合丁香| 熟女电影av网| 国产探花在线观看一区二区| 黄色片一级片一级黄色片| 黄色视频,在线免费观看| 日韩欧美精品v在线| 婷婷亚洲欧美| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 日本一二三区视频观看| 99精品欧美一区二区三区四区| 97碰自拍视频| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 校园春色视频在线观看| 午夜免费激情av| 精品欧美国产一区二区三| 99精品久久久久人妻精品| 男人和女人高潮做爰伦理| x7x7x7水蜜桃| 成人亚洲精品av一区二区| 淫妇啪啪啪对白视频| 久久久久久久久中文| 黄色日韩在线| 老司机在亚洲福利影院| 亚洲国产高清在线一区二区三| 大型黄色视频在线免费观看| 日韩成人在线观看一区二区三区| 亚洲国产精品sss在线观看| 久久久久久久久大av| 国产三级黄色录像| 免费人成视频x8x8入口观看| 久久午夜亚洲精品久久| 国产视频内射| 国产av一区在线观看免费| 亚洲在线观看片| 亚洲欧美日韩东京热| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 美女大奶头视频| 国产亚洲欧美在线一区二区| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 亚洲人成电影免费在线| 又爽又黄无遮挡网站| 中文字幕久久专区| 成人国产综合亚洲| 日本黄大片高清| 亚洲成人中文字幕在线播放| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 国产一区二区在线观看日韩 | 久久久久免费精品人妻一区二区| 在线播放无遮挡| 国产精品乱码一区二三区的特点| 少妇高潮的动态图| 国产一级毛片七仙女欲春2| 欧美午夜高清在线| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| av天堂中文字幕网| 深夜精品福利| 国产麻豆成人av免费视频| 日日夜夜操网爽| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 日韩欧美三级三区| 51国产日韩欧美| av专区在线播放| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 十八禁网站免费在线| 黄片大片在线免费观看| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 亚洲国产高清在线一区二区三| 亚洲精品在线观看二区| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 国产视频一区二区在线看| 757午夜福利合集在线观看| 午夜视频国产福利| netflix在线观看网站| 国产免费男女视频| 久久精品91蜜桃| 色综合亚洲欧美另类图片| 夜夜爽天天搞| 亚洲天堂国产精品一区在线| 悠悠久久av| 国产av不卡久久| 在线观看日韩欧美| 首页视频小说图片口味搜索| 激情在线观看视频在线高清| 免费av毛片视频| 成人无遮挡网站| 亚洲第一电影网av| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 成人一区二区视频在线观看| av中文乱码字幕在线| 听说在线观看完整版免费高清| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 久久久久久久久中文| 日本五十路高清| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 国产精品美女特级片免费视频播放器| av专区在线播放| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 丝袜美腿在线中文| 亚洲在线观看片| 十八禁网站免费在线| 久99久视频精品免费| 18+在线观看网站| 午夜福利在线在线| 最近最新免费中文字幕在线| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| ponron亚洲| 欧美一区二区国产精品久久精品| 国产精品久久久久久久久免 | 精品国产亚洲在线| 国产亚洲欧美在线一区二区| 色av中文字幕| 亚洲一区二区三区色噜噜| 丰满人妻一区二区三区视频av | 岛国在线观看网站| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 一进一出抽搐动态| 老司机在亚洲福利影院| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 国产视频内射| 国内精品一区二区在线观看| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 最后的刺客免费高清国语| 在线观看免费午夜福利视频| 亚洲片人在线观看| tocl精华| 亚洲午夜理论影院| 国产精品99久久久久久久久| 91九色精品人成在线观看| 又粗又爽又猛毛片免费看| 有码 亚洲区| 久久九九热精品免费| 九色国产91popny在线| 亚洲国产精品合色在线| 1000部很黄的大片| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 88av欧美| 69人妻影院| 午夜福利成人在线免费观看| 99热精品在线国产| 欧美激情久久久久久爽电影| 中文字幕av成人在线电影| 久久久久久久久大av| 精品久久久久久久末码| av黄色大香蕉| 又黄又爽又免费观看的视频| av国产免费在线观看| 麻豆国产97在线/欧美| 欧美日韩福利视频一区二区| 国产 一区 欧美 日韩| 日本黄大片高清| 88av欧美| 亚洲精品久久国产高清桃花| 欧美中文日本在线观看视频| 午夜福利免费观看在线| 最后的刺客免费高清国语| 中出人妻视频一区二区| 99国产精品一区二区三区| 一级a爱片免费观看的视频| 国产伦精品一区二区三区视频9 | 午夜亚洲福利在线播放| 成人鲁丝片一二三区免费| 欧美精品啪啪一区二区三区| 丁香欧美五月| 叶爱在线成人免费视频播放| 国产麻豆成人av免费视频| 欧美一级a爱片免费观看看| 村上凉子中文字幕在线| 亚洲av电影不卡..在线观看| 少妇的逼水好多| 网址你懂的国产日韩在线| 99久久综合精品五月天人人| 怎么达到女性高潮| 亚洲最大成人中文| 美女免费视频网站| 国产三级黄色录像| 性色avwww在线观看| 校园春色视频在线观看| 色综合婷婷激情| 全区人妻精品视频| 精品人妻偷拍中文字幕| 无遮挡黄片免费观看| 丰满的人妻完整版| 国产精品一及| 九色成人免费人妻av| 亚洲精品粉嫩美女一区| 偷拍熟女少妇极品色| 最近在线观看免费完整版| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美 | 18禁黄网站禁片免费观看直播| 国产三级黄色录像| 欧美午夜高清在线| 日韩成人在线观看一区二区三区| 亚洲性夜色夜夜综合| 女警被强在线播放| 国产探花在线观看一区二区| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 91九色精品人成在线观看| 在线观看av片永久免费下载| 国产成年人精品一区二区| 欧美成狂野欧美在线观看| 久久久久免费精品人妻一区二区| 久久久久久久久大av| 精品无人区乱码1区二区| 国产精品98久久久久久宅男小说| 俄罗斯特黄特色一大片| 啦啦啦韩国在线观看视频| 亚洲自拍偷在线| 日韩高清综合在线| 国产探花极品一区二区| 99精品欧美一区二区三区四区| 最新在线观看一区二区三区| 欧美日韩黄片免| 男女之事视频高清在线观看| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 精品一区二区三区视频在线 | 亚洲精品粉嫩美女一区| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美 | 内地一区二区视频在线| 神马国产精品三级电影在线观看| 高清毛片免费观看视频网站| 成人永久免费在线观看视频| 成年女人永久免费观看视频| 老师上课跳d突然被开到最大视频 久久午夜综合久久蜜桃 | 男女午夜视频在线观看| 国产淫片久久久久久久久 | 小说图片视频综合网站| 露出奶头的视频| 国产久久久一区二区三区| 一进一出抽搐gif免费好疼| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 国产亚洲精品一区二区www| 午夜免费观看网址| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 国产乱人视频| 午夜福利视频1000在线观看| 无限看片的www在线观看| 国产高清视频在线观看网站| 老司机午夜福利在线观看视频| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 国产精品女同一区二区软件 | 欧美成人免费av一区二区三区| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 99国产精品一区二区蜜桃av| 亚洲成av人片在线播放无| 一进一出好大好爽视频| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 又粗又爽又猛毛片免费看| www.www免费av| 在线观看舔阴道视频| 免费电影在线观看免费观看| 特大巨黑吊av在线直播| 神马国产精品三级电影在线观看| 99精品久久久久人妻精品| 99久久九九国产精品国产免费| 岛国在线观看网站| 综合色av麻豆| 国内精品久久久久精免费| 亚洲成人中文字幕在线播放| 夜夜夜夜夜久久久久| 精品一区二区三区人妻视频| a在线观看视频网站| 搡老熟女国产l中国老女人| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 99热这里只有精品一区| 丁香欧美五月| 亚洲人与动物交配视频| 日韩中文字幕欧美一区二区| 成人特级av手机在线观看| 亚洲最大成人手机在线| 高清日韩中文字幕在线| 日本黄大片高清| 黄色成人免费大全| 国产成人系列免费观看| 国产精品爽爽va在线观看网站| 少妇人妻精品综合一区二区 | 国产私拍福利视频在线观看| 欧美一级毛片孕妇| 久久久久亚洲av毛片大全| 一本久久中文字幕| 麻豆成人av在线观看| 精品免费久久久久久久清纯| 欧美乱色亚洲激情| or卡值多少钱| 欧美一级a爱片免费观看看| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 国产精品亚洲一级av第二区| 色精品久久人妻99蜜桃| h日本视频在线播放| 乱人视频在线观看| 99精品在免费线老司机午夜| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 国产97色在线日韩免费| 最好的美女福利视频网| 久久久国产成人免费| 欧美最新免费一区二区三区 | 免费看十八禁软件| 国产精品1区2区在线观看.| 欧美一区二区亚洲| 色综合婷婷激情| АⅤ资源中文在线天堂| 国产精品一区二区免费欧美| 精品乱码久久久久久99久播| 精品久久久久久久久久久久久| 啦啦啦免费观看视频1| 热99re8久久精品国产| 亚洲国产高清在线一区二区三| 母亲3免费完整高清在线观看| 搞女人的毛片| 精品免费久久久久久久清纯| 内射极品少妇av片p| 久久久国产精品麻豆| 一级毛片女人18水好多| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 他把我摸到了高潮在线观看| 婷婷丁香在线五月| 美女大奶头视频| 国产视频内射| 村上凉子中文字幕在线| 国产精品亚洲av一区麻豆| 日韩人妻高清精品专区| 麻豆成人午夜福利视频| 国产极品精品免费视频能看的| 在线观看午夜福利视频| 99视频精品全部免费 在线| av视频在线观看入口| 中文资源天堂在线| 国产精品三级大全| 成人一区二区视频在线观看| 男女床上黄色一级片免费看| 亚洲天堂国产精品一区在线| 99久久精品热视频| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 一进一出抽搐动态| 欧美+亚洲+日韩+国产| 1024手机看黄色片| 久久久久久人人人人人| 99精品久久久久人妻精品| 老汉色∧v一级毛片| 给我免费播放毛片高清在线观看| 亚洲国产高清在线一区二区三| 免费看十八禁软件| 亚洲成人免费电影在线观看| 国产精品 国内视频| 手机成人av网站| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 国产探花极品一区二区| 制服丝袜大香蕉在线| 欧美日韩国产亚洲二区| 免费大片18禁| 国产免费男女视频| 最近最新中文字幕大全免费视频| 又黄又粗又硬又大视频| 男女之事视频高清在线观看| 亚洲国产精品合色在线| 老鸭窝网址在线观看| 日本熟妇午夜| 国产高清有码在线观看视频| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 偷拍熟女少妇极品色| 久久久久免费精品人妻一区二区| 超碰av人人做人人爽久久 | 免费电影在线观看免费观看| 国产成人a区在线观看| 深夜精品福利| 丁香六月欧美| 久久精品综合一区二区三区| 色综合婷婷激情| 一个人免费在线观看的高清视频| 欧美高清成人免费视频www| 露出奶头的视频| 99久久99久久久精品蜜桃| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 黄色日韩在线| 黄片大片在线免费观看| 两个人的视频大全免费| 午夜精品在线福利| 国产爱豆传媒在线观看| 在线免费观看不下载黄p国产 | 久久久久精品国产欧美久久久| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 久久草成人影院| 日韩欧美精品v在线| 狂野欧美激情性xxxx| 国产一区在线观看成人免费| 成人18禁在线播放| 宅男免费午夜| 国产探花在线观看一区二区| 九九热线精品视视频播放| 欧美高清成人免费视频www| 国产精品爽爽va在线观看网站| 99久久99久久久精品蜜桃| 欧美性感艳星| 伊人久久精品亚洲午夜| 日韩av在线大香蕉| 波野结衣二区三区在线 | 日韩国内少妇激情av| 最近最新中文字幕大全免费视频| av天堂中文字幕网| 成年人黄色毛片网站| 国内精品美女久久久久久| 国产亚洲av嫩草精品影院| 人妻夜夜爽99麻豆av| 亚洲成人久久爱视频| 日韩人妻高清精品专区| 久久国产精品影院| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 欧美在线一区亚洲| 在线观看66精品国产| 久久久久国内视频| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 亚洲真实伦在线观看| 国产97色在线日韩免费| 亚洲精品日韩av片在线观看 | 欧美日韩国产亚洲二区| a级一级毛片免费在线观看| 草草在线视频免费看| 色视频www国产| 我的老师免费观看完整版| 夜夜爽天天搞| 久久久久免费精品人妻一区二区| 99精品欧美一区二区三区四区| 国产精品久久电影中文字幕| 村上凉子中文字幕在线| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 色哟哟哟哟哟哟| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 国产乱人伦免费视频| 一本久久中文字幕| 12—13女人毛片做爰片一| 黄色片一级片一级黄色片| 久久久久亚洲av毛片大全| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 精品人妻一区二区三区麻豆 | av片东京热男人的天堂| av欧美777| 久久人妻av系列| 亚洲精品色激情综合| 看片在线看免费视频| 久久久精品欧美日韩精品| 国产精品亚洲美女久久久| 亚洲黑人精品在线| 国产一区二区三区视频了| 少妇人妻精品综合一区二区 | 亚洲美女视频黄频| 日本一本二区三区精品| 亚洲国产欧美人成| 天天一区二区日本电影三级| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 亚洲午夜理论影院| 国产一区二区激情短视频| 精品久久久久久久久久免费视频| 久久中文看片网| 欧美国产日韩亚洲一区| 热99在线观看视频| 色综合欧美亚洲国产小说| 99国产极品粉嫩在线观看| 淫秽高清视频在线观看| 波多野结衣巨乳人妻| 丰满的人妻完整版| 欧美国产日韩亚洲一区| 亚洲美女视频黄频| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 搡老岳熟女国产| 欧美3d第一页| 免费看a级黄色片| 99热6这里只有精品| 精品人妻偷拍中文字幕| 久99久视频精品免费| 亚洲一区二区三区色噜噜| 成人无遮挡网站| 在线观看66精品国产| 中亚洲国语对白在线视频| 老司机在亚洲福利影院| 男女之事视频高清在线观看| 日韩国内少妇激情av| 欧美日韩乱码在线| 特级一级黄色大片| 91在线精品国自产拍蜜月 | 精品欧美国产一区二区三| 最好的美女福利视频网| 日韩欧美国产在线观看| 亚洲av电影在线进入| 又黄又爽又免费观看的视频| 精品欧美国产一区二区三| 免费看a级黄色片| 高清在线国产一区| 国产国拍精品亚洲av在线观看 | 久久久久久久午夜电影| www日本在线高清视频| a在线观看视频网站| 国产精品影院久久| 99久久成人亚洲精品观看| 亚洲熟妇熟女久久| 搞女人的毛片| 亚洲成av人片免费观看| 亚洲国产精品999在线| 亚洲天堂国产精品一区在线| 最近视频中文字幕2019在线8| 国产毛片a区久久久久| 99在线视频只有这里精品首页| 久久久久亚洲av毛片大全| 亚洲人成网站在线播| 国产高清视频在线观看网站| 国产探花极品一区二区| 国产精品嫩草影院av在线观看 | 亚洲欧美日韩东京热| 久久久久九九精品影院| 神马国产精品三级电影在线观看| 亚洲第一电影网av| 久久久精品欧美日韩精品| 在线a可以看的网站| 日韩有码中文字幕| 色噜噜av男人的天堂激情| 啦啦啦韩国在线观看视频| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 1000部很黄的大片| 成熟少妇高潮喷水视频| 亚洲内射少妇av| 国产精品国产高清国产av| 99精品久久久久人妻精品| 欧美bdsm另类| 国产激情偷乱视频一区二区| 欧美zozozo另类| 人妻夜夜爽99麻豆av| 精品日产1卡2卡| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 欧美精品啪啪一区二区三区| 成人性生交大片免费视频hd| 午夜a级毛片| 一级毛片高清免费大全| 老鸭窝网址在线观看| 亚洲精品亚洲一区二区| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 啦啦啦韩国在线观看视频| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 日韩免费av在线播放| 久久伊人香网站| 天天添夜夜摸| 久久香蕉精品热| 欧美3d第一页| 天堂√8在线中文| 成年版毛片免费区| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 免费av毛片视频| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 嫁个100分男人电影在线观看| 精品久久久久久,| 一级毛片女人18水好多| 99久久无色码亚洲精品果冻| 国产高潮美女av| 日本三级黄在线观看| 舔av片在线| 国产视频一区二区在线看| 午夜精品在线福利| 神马国产精品三级电影在线观看| 欧美丝袜亚洲另类 | 桃色一区二区三区在线观看| 神马国产精品三级电影在线观看| 亚洲一区高清亚洲精品| av中文乱码字幕在线| 最新在线观看一区二区三区| 丁香欧美五月| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 亚洲激情在线av| 国产精品电影一区二区三区| 天天添夜夜摸| 婷婷亚洲欧美| 午夜福利视频1000在线观看| 精品人妻偷拍中文字幕| 亚洲一区高清亚洲精品| 亚洲美女视频黄频| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 亚洲国产欧美人成| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 一边摸一边抽搐一进一小说| 一区二区三区高清视频在线| 首页视频小说图片口味搜索| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 黑人欧美特级aaaaaa片| 久久香蕉国产精品| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 中国美女看黄片| 日韩人妻高清精品专区| 亚洲欧美精品综合久久99| 91麻豆精品激情在线观看国产| 国产激情欧美一区二区| av在线天堂中文字幕| 日本熟妇午夜| 最近在线观看免费完整版| 国产真实伦视频高清在线观看 | 午夜激情欧美在线|