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    Plackett-Burman(PB)優(yōu)化雞蛋蛋白凝膠性能的研究

    2012-10-25 01:26:22張根生岳曉霞艾曉麗
    食品工業(yè)科技 2012年14期
    關鍵詞:酪蛋白實驗設計內酯

    張根生,韓 冰,岳曉霞,艾曉麗

    (哈爾濱商業(yè)大學食品工程學院,黑龍江省普通高等學校食品科學與工程重點實驗室,黑龍江哈爾濱 150076)

    Plackett-Burman(PB)優(yōu)化雞蛋蛋白凝膠性能的研究

    張根生,韓 冰,岳曉霞,艾曉麗

    (哈爾濱商業(yè)大學食品工程學院,黑龍江省普通高等學校食品科學與工程重點實驗室,黑龍江哈爾濱 150076)

    在單因素實驗的基礎上,選擇適當?shù)囊蛩厮?,通過Plackett-Burman設計,選取NaCl、CaCl2、MgCl2、MgSO4、NaOH、KOH、Na2CO3、NaHCO3、焦磷酸鈉、三聚磷酸鈉、六偏磷酸鈉、葡萄糖酸-δ-內酯、β-環(huán)糊精、酪蛋白鈉及檸檬酸鈉15個對雞蛋蛋白凝膠性中有影響作用的因子進行篩選。實驗結果表明,對雞蛋蛋白凝膠性質有影響的因子中,MgCl2、MgSO4、葡萄糖酸-δ-內酯、酪蛋白鈉是影響雞蛋蛋白凝膠性質的顯著因子,在大于90%的概率水平上差異顯著,其它11個因子在大于90%的概率水平上差異不顯著。

    雞蛋蛋白,熱凝膠,Plackett-Burman設計

    雞蛋蛋白是一種重要的食品加工原料,其中的蛋白質具有多種功能特性,如凝膠作用、持水性、起泡性和乳化性等,尤其是凝膠作用在食品的制造中有重要的應用[1]。Kitabatake等[2]探討了卵蛋白質中添加不同濃度的NaCl形成凝膠的機制,Jinquan Xu等[3]曾將蛋清粉溶液先在60℃預熱2.0~3.5min,并于5℃冷藏20h后再制成凝膠,發(fā)現(xiàn)其硬度比相同條件下未經(jīng)預熱處理的有明顯提高。Plackett-Burman(PB)實驗設計是一種經(jīng)濟而有效的兩水平實驗設計方法,它試圖用最少實驗次數(shù)達到使因素的主效果得到盡可能精確估計的目的[4-5],避免在后期的優(yōu)化實驗中由于部分因子不顯著而浪費實驗資源[6]。適用于從眾多的考察因素中快速有效地篩選出最為重要的幾個因素,為進一步研究提供參考[7-8]。對在眾多的優(yōu)化方法中,Plackett-Burman法在篩選實驗重要因子方面最為有效和準確[9],目前已被廣泛應用于生物工藝優(yōu)化研究中[10]。而利用Plackett-Burman設計法對雞蛋蛋白的眾多影響因素進行篩選的實驗未見報道。本實驗擬通過Plackett-Burman設計篩選出對雞蛋蛋白凝膠性質具有顯著影響作用的因子,并在此基礎上采用響應曲面法對關鍵因子進行進一步的優(yōu)化,這一部分將在后續(xù)實驗中進行。

    1 材料與方法

    1.1 材料與儀器

    雞蛋 市售;NaCl、CaCl2、MgCl2、MgSO4、NaOH、KOH、Na2CO3、NaHCO3、D-葡萄糖酸-δ-內酯、焦磷酸鈉、三聚磷酸鈉、六偏磷酸鈉、環(huán)糊精、酪蛋白鈉、檸檬酸鉀 以上均為分析純試劑。

    pHs-25酸度計 上海雷磁儀器廠;HH-4數(shù)顯電子恒溫水浴鍋 國華電器有限公司;精密天平 上海梅特勒-拖利多儀器有限公司;物性測試儀(TAXT21) 英國TA公司。

    1.2 實驗方法

    1.2.1 凝膠的制備 市售新鮮雞蛋→高速分散器均質→棄去泡沫→取雞蛋溶液20mL放于25mL的燒杯中→置于真空干燥箱中脫氣→用保鮮膜封口,并用橡皮筋扎緊→置于80℃水浴加熱40min→立即放入冰水中冷卻20min→存放于4℃冰箱中過夜→恢復到室溫→測定凝膠強度[11]。

    1.2.2 凝膠強度的測定 測試條件:測試前速1mm/s,測試速度0.5mm/s,測試后速0.5mm/s,測試距離為50%,夾具為P 0.5 DIACylinder Ebonite(直徑0.5英寸的圓柱狀平頭探頭),凝膠強度用硬度(Hardness)即探頭下壓過程中的最大感應力(單位g)表示。

    1.3 Plackett-Burman法篩選影響雞蛋蛋白凝膠的顯著因子

    通過對單因素實驗進行分析,選用N=19的Plackett-Burman實驗設計,對影響雞蛋蛋白凝膠性質的15個因素進行研究,每個因素取2個水平:低水平“-1”和高水平“+1”。實驗設計因素水平及編碼見表1。

    表1 Plackett-Burman實驗的因素水平及編碼Table 1 Plackett-Burman test factors level and coding

    1.4 數(shù)據(jù)處理方法

    多指標全概率評分法:用多指標實驗全概率法[12]進行數(shù)據(jù)處理。式(3)即為同時兼顧各指標綜合效應的全概率公式。本實驗三個指標互不相容,權重不同,且凝膠強度、彈性越大越優(yōu),粘性越小越優(yōu)。按m1∶m2∶m3(凝膠強度∶粘性∶彈性)=0.5∶0.3∶0.2,P(Bi)=P(A1)P(Bi/A1)+P(A2)P(Bi/A2)+P(A3)P(Bi/A3)

    2 結果與分析

    經(jīng)查閱文獻可知,影響雞蛋蛋白凝膠性質的因素有NaCl、CaCl2、MgCl2、MgSO4、NaOH、KOH、Na2CO3、NaHCO3、焦磷酸鈉、三聚磷酸鈉、六偏磷酸鈉、葡萄糖酸-δ-內酯、β-環(huán)糊精、酪蛋白鈉及檸檬酸鈉,本實驗在單因素的基礎上通過Plackett-Burman設計對雞蛋蛋白凝膠性質具有顯著影響作用的因子進行篩選,為對顯著影響因子的進一步優(yōu)化提供實踐指導。實驗設計及結果見表2、表3。

    表2 Plackett-Burman實驗設計方案Table 2 Plackett-Burman experimental design and results

    由表4表明,所得的回歸方程達到顯著(p=0.0459),決定系數(shù)R2=0.9584,這表明95.84%的實驗數(shù)據(jù)的變異性可用此回歸模型來解釋。實驗回歸方程系數(shù)顯著性檢驗見表5。

    由表3中可以看出凝膠強度的范圍為329.666~ 777.522g/cm2,粘性的范圍為-359.910~-1576.780Pa·s,彈性的范圍為0.423~0.837,凝膠強度、粘性、彈性變化范圍都很大。由表5可知,在實驗設計的水平范圍內,MgCl2、MgSO4、葡萄糖酸-δ-內酯和酪蛋白鈉對雞蛋蛋白凝膠性能均有顯著影響(p<0.05),其他因素在所考察的水平范圍內對響應值無顯著影響。對雞蛋蛋白凝膠性質影響顯著的因子有MgCl2(p=0.0492)、MgSO4(p=0.0104)、葡萄糖酸-δ-內酯(p=0.0272)、酪蛋白鈉(p=0.0106),根據(jù)檢索,在雞蛋蛋白及全蛋凝膠性方面沒有利用Plackett-Burman實驗設計篩選主要因子的實驗。本實驗在整個實驗和數(shù)據(jù)分析過程中沒有考慮各因素間的交互影響,考慮交互影響的實驗將在后續(xù)通過響應面分析法進行研究。

    3 結論

    通過單因素實驗及Plackett-Burman設計,對影響雞蛋蛋白凝膠性質的諸多相關因子進行了評價,成功的篩選出對雞蛋蛋白凝膠性質有顯著影響的因子為:MgCl2(p=0.0492)、MgSO4(p=0.0104)、葡萄糖酸-δ-內酯(p=0.0272)、酪蛋白鈉(p=0.0106)是影響雞蛋蛋白凝膠性質的主要因子,為進一步優(yōu)化工藝參數(shù)提供了重要的理論依據(jù)與實踐基礎。

    表3 Plackett-Burman實驗設計結果Table 3 Plackett-Burman design of experiment results

    表4 回歸模型方差分析表Table 4 Regression model anova table

    表5 回歸方程顯著性檢驗表Table 5 Regression equation significant inspection table

    [1]李俐鑫,遲玉杰,孫波.蛋白質凝膠質構特性的研究[J].食品工業(yè)科技,2007,28(8):57-60.

    [2]Kitabatalce N,Shimizu A,Doi E.Preparation of transparent egg white gel with salt by two step heating method[J].J Food Sci,1988,35(3):735-738.

    [3]Jinquan Xu,Makoto Shimoyamada,Kenji Watanabe.Gelation of egg white proteins as affected by combined heating and freezing [J].Journal of Food Science,1997,62(5):963-966.

    [4]SK Ahuja,GM Ferreira,AR Moreira.Application of Plackett-Burman design and response surface methodology to achieve exponentialgrowth foraggregated shipworm bacterium[J]. Biotechnology and Bioengineering,2004,85(6):666-675.

    [5]陳志杰,韓永斌,沈昌,等.Plackett-Burman設計在靈芝生長及產(chǎn)胞外多糖主要影響因子篩選中的應用[J].食品科學,2005,26(12):115-118.

    [6]NAVEENA B J,ALTAF M D,BHADRIAH K,et al.Selection of medium components by Plackett-Burman design for production of L(+)lactic acid by Lactobacillus amylophilus GV6 in SSF using wheat bran[J].Bioresource Technology,2005,96:485-490.

    [7]Yannis L Loukas.A Plackett-Burman screening design directs the efficient formulation of multicomponent DRV liposomes[J]. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis,2001,26:255-263.

    [8]褚以文.微生物培養(yǎng)基優(yōu)化方法及其OPTI優(yōu)化軟件[J].國外醫(yī)藥抗生素分冊,1999,20(2):58-60,66.

    [9]胡升,梅樂和,姚善涇.響應面法優(yōu)化納豆激酶液體發(fā)酵[J].食品與發(fā)酵工業(yè),2003,29(1):13-17.

    [10]高修功,王超,章克昌.數(shù)學統(tǒng)計法快速優(yōu)化假單胞菌脂肪酶發(fā)酵條件[J].微生物學通報,1998,25(2):94-97.

    [11]徐雅琴,楊嚴俊.美拉德反應提高雞蛋白粉凝膠性質的研究[J].食品工業(yè)科技,2005,26(10):103-106.

    [12]倪永興,彭圖婉.多指標實驗全概率公式評分法研究槐米炭炮制工藝[J].中國藥科大學學報,1995,26(6):259.

    Plackett-Burman(PB)design for optimization of egg protein gel properties

    ZHANG Gen-sheng,HAN Bing,YUE Xiao-xia,AI Xiao-li
    (Key Laboratory of Food Science and Engineering,College of Food Engineering,Harbin University of Commerce,Harbin 150076,China)

    On the basis of single-factor experiments,15 influential factors,namely NaCl,CaCl2,MgCl2,MgSO4,NaOH,KOH,Na2CO3,NaHCO3,sodium pyrophosphate,sodium tripolyphosphate,sodium hexametaphosphate,gluconic acid-δ-lactone,β-cyclodextrin,sodium caseinate and sodium citrate,were selected at their appropriate levels for Plackett-Burman design.The results showed that among them MgCl2,MgSO4,gluconic acid-δlactone,sodium caseinate were significant factors,which showed significant differences in more than 90% probability level.The other 11 factors did not show significant differences in more than 90%probability level.

    egg whites;hot gel;Plackett-Burman design

    TS253.1

    B

    1002-0306(2012)14-0303-03

    2011-12-05

    張根生(1964-),男,教授,研究方向:食品科學。

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