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    牛冷凍精液人工授精技術(shù)操作規(guī)程(輸精部分)

    2012-10-17 09:13:46顏世波王廷斌戴志江
    黑龍江動(dòng)物繁殖 2012年2期
    關(guān)鍵詞:細(xì)管肌注液氮

    顏世波,王廷斌,戴志江

    (1.黑龍江省湯原縣職業(yè)技術(shù)學(xué)院,154700;2.佳木斯市家畜繁育指導(dǎo)站,154007)

    1 范圍

    適用于人工授精員對(duì)牛進(jìn)行細(xì)管冷凍精液的人工授精技術(shù)操作。

    2 人工授精

    用特定的輸精器材,將冷凍精液正確解凍后人工輸入發(fā)情母牛生殖道內(nèi),使之受孕。

    3 細(xì)管冷凍精液

    采集種公牛精液,經(jīng)特殊冷凍處理制成細(xì)管冷凍精液制劑。

    4 運(yùn)輸

    用液態(tài)氮生物容器運(yùn)輸。而解凍后的精液要保溫運(yùn)輸,在盡量短的時(shí)間內(nèi)輸精,不超過(guò)2~6 h。

    5 液氮灌的正確使用

    滿(mǎn)罐液氮靜止應(yīng)保持20~30 d有液氮。凍精在液態(tài)氮中保存。液氮少于1/3時(shí)及時(shí)加液氮。查看或取出凍精要在罐口下5~8 cm處,取出停留3~5 s以?xún)?nèi)送還罐內(nèi)或解凍。空罐加液氮需預(yù)冷,輕拿輕放,罐體出霜、出汗要及時(shí)檢查與更換。

    6 有關(guān)發(fā)情的概念

    6.1 發(fā)情

    母牛出現(xiàn)陰門(mén)腫脹、有黏液、鳴叫,表現(xiàn)出爬跨和接受爬跨的性行為,并能正常排卵,自然交配或人工授精具有受孕可能。母牛的這一表現(xiàn)稱(chēng)作發(fā)情。

    6.2 適配年齡

    母牛性成熟后,身體發(fā)育到成年體重70%左右,初配奶牛體重在350 kg以上。

    6.3 發(fā)情周期

    性成熟的母牛每18~24 d(平均21 d),周而復(fù)始地出現(xiàn)發(fā)情癥狀和表現(xiàn),為一個(gè)發(fā)情周期。母牛是常年發(fā)情家畜。發(fā)情周期分為發(fā)情前期、中期、后期和休情期。

    6.4 發(fā)情持續(xù)時(shí)間

    是指母牛發(fā)情外表征狀出現(xiàn)開(kāi)始,到征狀消失為止所持續(xù)的時(shí)間。一般母牛發(fā)情持續(xù)時(shí)間為12~36 h,平均24 h。黃牛的時(shí)間偏長(zhǎng)。

    6.5 發(fā)情鑒定

    就是鑒定母牛是否發(fā)情及發(fā)情的階段,以便正確掌握人工授精的時(shí)間。

    6.6 發(fā)情鑒定方法

    外部觀察法:通過(guò)觀察發(fā)情行為、性興奮和外陰變化癥狀來(lái)判定發(fā)情與階段。

    直腸檢查法:手伸進(jìn)牛直腸,觸摸子宮角判斷其長(zhǎng)短、粗細(xì)、質(zhì)地。觸摸卵巢,檢查卵泡大小、質(zhì)地、發(fā)育程度來(lái)確定牛發(fā)情及階段。

    6.7 真發(fā)情與假發(fā)情

    凡是發(fā)情能正常排卵,輸精或配種可受孕的是真發(fā)情。凡是有發(fā)情癥狀但不能正常排卵的發(fā)情為假發(fā)情。

    7 有關(guān)卵子、精子的概念與指標(biāo)

    7.1 排卵時(shí)間

    母牛一般在發(fā)情結(jié)束后10~15 h排卵,在發(fā)情開(kāi)始后24~36 h排卵,在靜立發(fā)情后12~24 h排卵。多數(shù)在凌晨至早晨排卵。

    7.2 卵子保持受精能力的時(shí)間

    8 h以?xún)?nèi)受精能力強(qiáng),以后減弱。

    7.3 有效精子數(shù)

    0.25 mL或0.5 mL細(xì)管冷凍精液每劑有效精子數(shù)不少于800~1 000萬(wàn)。保持受精能力的時(shí)間18~24 h,以輸精后6~18 h效果為好。

    8 人工授精操作

    8.1 輸精前的器材藥品準(zhǔn)備

    輸精槍、塑料外套、長(zhǎng)臂手套、顯微鏡、載玻片、解凍容器、溫水和溫度計(jì)、消毒防腐藥、注射器、生理鹽水、生殖激素及子宮炎治療藥物。

    8.2 冷凍精液的解凍

    取出凍精在空氣中停留3~5 s,放入38~42℃的水中解凍8~12 s,全部融化后取出擦干,保溫,等待鏡檢或輸精。

    8.3 鏡檢活力

    調(diào)整好顯微鏡,加熱載玻片至38~40℃,凍精空氣端刺小孔取精液1滴在載玻片上,迅速鏡檢,要求活力大于0.3可用于輸精。

    8.4 輸精時(shí)間

    在牛發(fā)情后期輸精,靜立發(fā)情后12~24 h輸精,牛拒爬后0~8 h輸精。

    8.5 母牛的保定與外陰衛(wèi)生消毒

    在保定架或配種欄中保定,輸精員在牛體正后方,以免牛傷人。用0.05%的高錳酸鉀溶液或清水清洗外陰,紙巾擦干后輸精。

    8.6 輸精過(guò)程

    采用直腸把握法輸精。輸精員戴上長(zhǎng)臂塑料手套,伸入直腸,排出糞便,隔著直腸壁握住子宮頸管。手臂下壓使陰門(mén)開(kāi)張。輸精槍斜上45°從陰門(mén)緩緩插入10 cm,避開(kāi)尿道口再平插至子宮頸口,通過(guò)2~3個(gè)皺壁將輸精管緩慢套入子宮頸,達(dá)到子宮體,將輸精槍稍微后拉即可輸精。輸精持續(xù)5 s以上,然后緩慢退出輸精槍。

    8.7 輸精后的觀察

    發(fā)現(xiàn)槍頭有少量血液(紅點(diǎn))屬于正?,F(xiàn)象,說(shuō)明即將排卵。發(fā)現(xiàn)槍頭脫落、棉塞推出屬于事故,但牛一般在下次發(fā)情可排出。如不發(fā)情,要跟蹤檢查確認(rèn)是否妊娠還是殘留,針對(duì)癥狀日后解決。出槍有少量膠凍狀微透明黏液為正常,如發(fā)現(xiàn)黏液渾濁、有膿或有氣泡則屬于炎癥,針對(duì)癥狀治療。發(fā)現(xiàn)精液逆流要及時(shí)補(bǔ)配。

    9 難孕牛的診治與輸精

    輕癥子宮炎可在輸精前、后治療并輸精??ㄋ浴㈦[性、卡他膿性子宮炎的牛本次可以適時(shí)輸精。在輸精3 h前或輸精后1~12 h子宮內(nèi)灌藥。應(yīng)采用對(duì)精子影響小的抗生素治療。

    重度子宮炎的牛在本期治療而不輸精,宮注子宮專(zhuān)用消炎藥,下期發(fā)情觀察再?zèng)Q定治療或輸精。

    10 應(yīng)用生殖激素提高受胎率

    促排3號(hào)(LHRH-A3)一般在發(fā)情中期使用即在輸精前6 h肌注25 μg,用的過(guò)早或劑量過(guò)大效果差,容易造成卵泡黃體化不能排卵。促黃體素(LH)和絨促性素(hCG)在輸精時(shí)分別肌注100單位和1 000單位。催產(chǎn)素(OX)在輸精后肌注40~80單位,加速精子上行。

    11 保胎

    應(yīng)用生殖激素促進(jìn)副黃體形成,維持卵巢功能達(dá)到保胎作用。在輸精后3~4 d肌注促排3號(hào)、促黃體素和絨促性素25~50 μg、100單位和1000單位,使卵巢小卵泡黃體化,形成副黃體。黃體酮(P4)在輸精后5~7 d連續(xù)注射80~100單位,拮抗卵巢上小卵泡產(chǎn)生雌激素的作用,降低子宮活動(dòng)性,達(dá)到保胎功效。在妊娠4~5月時(shí),少量妊娠牛出現(xiàn)假發(fā)情現(xiàn)象,可肌注黃體酮保胎。分5次5 d遞減注射,劑量分別是前3 d 100單位,后2天為50單位、25單位。

    12 妊娠診斷

    12.1 外部觀察法

    妊娠牛行動(dòng)穩(wěn)健,采飼量增加,被毛光亮,陰門(mén)出皺,陰蒂增大,陰道黏液呈黏稠狀,并粘有糞便夾 (俗稱(chēng)“掛牌”)。腹圍逐漸增大,妊娠后期(7~9個(gè)月)右側(cè)腹壁推診可觸及到胎兒,青年母牛在妊娠4~5個(gè)月乳房開(kāi)始發(fā)育。妊娠牛眼線明顯,眼角膜上的血管增粗,暗紅或紫紅,有1~3條;未妊娠牛的血管細(xì)而鮮紅,分支不明顯。

    12.2 直腸檢查法

    觸摸子宮角、卵巢黃體。根據(jù)黃體有無(wú)、子宮質(zhì)地、大小、彈性、位置等斷定是否妊娠及胎兒月齡。

    12.3 酒精法

    用純酒精滴定被檢查的奶樣,如果出現(xiàn)絮狀物即為妊娠。但酒精陽(yáng)性乳的奶樣和乳房中頭幾把乳不能檢查,因?yàn)槿榉垦兹榛蛉槌厥H榭赡鼙晃廴尽?/p>

    12.4 B超診斷法

    可以檢查35 d以后階段的胎兒。

    13 母牛輸精配種記錄

    記錄養(yǎng)殖場(chǎng)戶(hù)名、地址、聯(lián)系人、電話,母牛品種與耳號(hào)、年齡或產(chǎn)次、輸精時(shí)間,與配公牛凍精品種與牛號(hào),人工授精員姓名、電話。復(fù)配記錄同上。分析造成復(fù)配的原因,本次的技術(shù)處理方法。

    14 牛細(xì)管冷凍精液標(biāo)記方法與識(shí)別

    以黑龍江省家畜繁育指導(dǎo)站凍精為例,

    說(shuō)明:HLJ:黑龍江省家畜繁育指導(dǎo)站代號(hào)(拼音字頭)HS:荷斯坦奶牛的品種代號(hào)(拼音字頭)。080629:生產(chǎn)日期06028:該場(chǎng)該公牛身份證后5位數(shù),即2006年出生,28號(hào)公牛。

    15 種公牛品種與代號(hào)

    品種代號(hào)由兩位漢語(yǔ)拼音字頭組成。荷斯坦牛HS、娟珊牛JS、西門(mén)塔爾XM、夏洛來(lái)XL、利木贊LM、安格斯AG、德國(guó)黃牛DH、海福特HF、皮埃蒙特PA、兼用短角JD、肉用短角RD、南德文(溫)ND、蒙貝利亞MB。

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