骨髓間質(zhì)干細(xì)胞治療急性腦梗死患者60例

詹三華 張魯峰 姚衛(wèi)民 楊明輝 宋曉玲 (武警河南總隊(duì)醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，河南 鄭州 450052)

腦梗死治療后存活者多數(shù)遺留癱瘓、言語(yǔ)不清等嚴(yán)重功能障礙，進(jìn)一步恢復(fù)極其困難。因此，如何積極有效地在急性期恢復(fù)神經(jīng)功能是促進(jìn)痊愈、減少殘疾的關(guān)鍵，是治療重點(diǎn)。近年來(lái)干細(xì)胞移植在治療腦梗死的基礎(chǔ)與臨床研究取得了較好效果〔1〕，給腦梗死治療帶來(lái)了突破性進(jìn)展。本研究重點(diǎn)觀察自體骨髓干細(xì)胞移植治療急性腦梗死(ACI)的療效及安全性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2010年1月至2010年12月我院神經(jīng)內(nèi)科住院的ACI患者120例，分為觀察組60例，男32例，女28例，年齡40～76(平均57.5)歲，發(fā)病時(shí)間(1.5±1.1)d;對(duì)照組60例，男35例，女25例，年齡41～75(平均57.3)歲，發(fā)病時(shí)間(1.5±1.2)d;兩組性別、年齡、病情輕重程度、病程分布均衡，無(wú)顯著差異，具有可比性。均符合2000年全國(guó)腦血管病專題研討會(huì)修訂的ACI診斷標(biāo)準(zhǔn)，發(fā)病72 h以內(nèi)，并行頭顱CT及MRI檢查確診為頸內(nèi)動(dòng)脈系統(tǒng)腦梗死，且患者無(wú)意識(shí)障礙。

1.2 治療方法 觀察組在常規(guī)治療基礎(chǔ)上，于發(fā)病后第1周內(nèi)，取自體骨髓150～200 ml，進(jìn)行骨髓細(xì)胞分離，分離出的骨髓間質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)(圖1)分成2份，其中1份干細(xì)胞當(dāng)天應(yīng)用，另外1份干細(xì)胞進(jìn)行體外定向培養(yǎng)擴(kuò)增7 d后應(yīng)用，應(yīng)用方式為通過(guò)腰椎穿刺注射到蛛網(wǎng)膜下腔(圖2)。對(duì)照組給予常規(guī)藥物治療，同時(shí)配合康復(fù)鍛煉。

1.3 療效評(píng)定及預(yù)后評(píng)估 分別在治療前、治療后半個(gè)月及1個(gè)月進(jìn)行Barthel指數(shù)(BI)評(píng)分和中國(guó)腦卒中評(píng)分(CSS)。BI評(píng)分:0～20分極嚴(yán)重殘疾;25～45分嚴(yán)重殘疾;50～70分中度殘疾;75～95分輕度殘疾;100分為正常。CSS評(píng)分:0～15分輕度神經(jīng)功能缺損，16～30分中度缺損，31～45分重度缺損。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 計(jì)數(shù)資料用Ridit檢驗(yàn)，計(jì)量資料以±s表示，組間比較用t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

兩組在治療半個(gè)月后日常生活能力BI評(píng)分即有顯著改善(P＜0.01);治療后1個(gè)月，兩組BI評(píng)分增加，觀察組BI評(píng)分明顯優(yōu)于對(duì)照組(P＜0.01)。兩組治療后半個(gè)月CSS評(píng)分均有所下降，兩組差異顯著(P＜0.01);治療后1個(gè)月，CSS評(píng)分均有所下降，兩組差別顯著(P＜0.01)。見(jiàn)表1。觀察組鞘內(nèi)注射患者術(shù)后無(wú)明顯不適，定期復(fù)查血尿常規(guī)、肝腎功能、頭顱CT及MRI較前無(wú)明顯異常。

表1 兩組治療前后BI、CSS評(píng)分比較(± s，n=30)

表1 兩組治療前后BI、CSS評(píng)分比較(± s，n=30)

與治療前比較:1)P＜0.01;與對(duì)照組比較:2)P＜0.01

組別 BI治療前 治療后 半個(gè)月CSS治療前 治療后 半個(gè)月觀察組 34.71±7.62 68.25±6.511)2) 77.02±22.621)2) 25.31±6.21 15.21±4.241)2) 11.13±6.251)2)對(duì)照組 35.23±6.51 53.21±5.741) 61.12±15.101) 24.64±8.15 19.41±5.211) 16.67±5.431)

圖1 培養(yǎng)7 d后BMSCs(×200)

圖2 BMSCs經(jīng)腰穿移植蛛網(wǎng)膜下腔

3 討論

近年來(lái)，腦梗死患者在腦卒中單元接受超早期溶栓、腦神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)、腦保護(hù)藥物及康復(fù)理療、護(hù)理等措施取得明顯效果，但存活者仍有50%～70%遺留肢體癱瘓、言語(yǔ)不清等嚴(yán)重功能障礙，因此，在急性期積極有效地促進(jìn)腦缺血區(qū)恢復(fù)神經(jīng)功能是促進(jìn)疾病痊愈、減少殘疾的關(guān)鍵，是治療的重點(diǎn)。

干細(xì)胞具有很強(qiáng)的自我復(fù)制能力、多項(xiàng)分化潛能、自我更新能力、對(duì)損傷和疾病反應(yīng)能力。多項(xiàng)動(dòng)物腦缺血模型實(shí)驗(yàn)中，BMSCs移植在急性期應(yīng)用，腦缺血區(qū)域有移植后神經(jīng)元、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞及少突膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志蛋白表達(dá)，神經(jīng)功能均明顯恢復(fù)〔2～4〕。所以，在腦梗死急性期于神經(jīng)功能損傷區(qū)補(bǔ)充外源性干細(xì)胞對(duì)促進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù)有重要意義。外源性干細(xì)胞可能通過(guò)重建受損神經(jīng)元回路、釋放遞質(zhì)或分泌多種神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子、減輕腦卒中誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)、誘導(dǎo)血管形成起作用〔5〕。多項(xiàng)研究顯示，干細(xì)胞具有旺盛的分泌能力，能分泌多種神經(jīng)生長(zhǎng)因子、腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子、膠質(zhì)細(xì)胞系神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子等，可以對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞的活性、神經(jīng)細(xì)胞軸突生長(zhǎng)起顯著作用，從而改善臨床癥狀〔6，7〕。從臨床觀察看，患者移植后短期內(nèi)臨床癥狀改善應(yīng)該是干細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)作用發(fā)揮的結(jié)果。

本研究結(jié)果表明，聯(lián)合干細(xì)胞移植治療較常規(guī)治療能明顯促進(jìn)患者肌力、肌張力、語(yǔ)言、智力等恢復(fù)，并降低致殘率，提高患者生活質(zhì)量，安全可靠，未發(fā)現(xiàn)毒副作用。但本次研究樣本量小，遠(yuǎn)期療效尚無(wú)結(jié)論。干細(xì)胞移植在腦梗死急性期應(yīng)用尚屬于探索階段，其應(yīng)用指征、途徑、干細(xì)胞純化程度、應(yīng)用數(shù)量、遠(yuǎn)期療效等有待于臨床上進(jìn)一步更大樣本研究。

1 Hennemann B，Ickenstein G，Sauerbruch S，et al.Mobilization of CD34+hematopoietic cells colony-forming cells and long-term culture-initiating cells into the peripheral blood of patients with an acute cerebral ischemic insult〔J〕.Cytotherapy，2008;10(3):303-11.

2 Zhao LR，Duan WM，Reyes M，et al.Human bone marrow stem cells exhibit neural phenotypes and ameliorate neurological deficits after grafting into the ischemic brain of rats〔J〕.Exp Neurol，2002;174(1):11-20.

3 Li Y，Chen J，Zhang CL，et al.Gliosis and brain remodeling after treatment stroke in rats with marrow stromal cells〔J〕.Glia，2005;49(3):407-17.

4 Wang L，Li Y，Chen X，et al.MCP-1，IL-8 and ischemic cerebral tissue enhance human bone marrow stromal cell migration in interface culture〔J〕.Hematology，2002;7(2):113-7.

5 葉麗莎，白 雪.神經(jīng)干細(xì)胞移植治療缺血性腦卒中研究新進(jìn)展〔J〕.現(xiàn)代診斷與治療，2010;21(1):38-40.

6 Lu P，Jones LL，Snyder EY，et al.Neural stem cells constitutively secrete neurotrophic factors and promote extensive host axonal growth after spinal cord injury〔J〕.Exp Neural，2003;181(2):115-29.

7 Pluchino S，Quattrini A，Brambilla E，et al.Injection of adult neurospheres induce recovery in a chronic model of multiple sclerosis〔J〕.Nature，2003;422(6933):688-94.