胃乃安膠囊對乙醇致小鼠胃黏膜損傷的保護作用及機制

張 磊，郭雙雁，陶麗君，馬麗娟，白曉萍，錢小華，徐國萍*

（大理學院基礎醫(yī)學院，云南大理 671000）

飲酒是人生不可避免的，遇到高興的事更喜歡多喝幾杯。但酒不僅能興奮人的神經，給人帶來快樂的滿足，一旦過量就會對人體有損害，胃腸道的損害首當其沖。早在19世紀，Beaumont就發(fā)現(xiàn)，過度飲酒后，胃黏膜出現(xiàn)明顯的病變，包括充血、糜爛及滲出。此后的大量研究也發(fā)現(xiàn)，短期攝入大量酒精可引起胃黏膜的損傷〔1-2〕。動物實驗也證實，當乙醇超過一定濃度時可引起胃黏膜的損傷，引起損傷的最低濃度隨實驗方法和使用的動物種類的不同而不同〔3〕。目前研究表明，胃黏膜損傷的產生與胃黏膜自身保護作用的減弱或相對減弱，即與胃黏膜攻擊性因素及保護/防御性因素失衡密切相關〔4〕。國內學者于20世紀80年代中期開始了中藥保護胃黏膜的研究〔5-6〕，其中胃乃安對胃黏膜的損傷有一定保護作用，但其作用機制不清。本實驗旨在通過體內觀察胃乃安對乙醇致小鼠胃黏膜損傷的影響，分析及探討其作用機制，為臨床上應用胃乃安中藥類藥物治療胃黏膜損傷提供理論依據(jù)和實驗基礎。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 藥物與試劑 胃乃安膠囊（廣州中一藥業(yè)有限公司，批準文號：國藥準Z44020043），0.9%生理鹽水，無水乙醇，10%甲醛。

1.1.2 動物 20只雄性健康小鼠，體重（30±5）g（大理學院動物實驗中心提供）。

1.2 方法

1.2.1 實驗分組 選用體重（30±5）g、雄性小鼠20只，隨機分為四個組，每組5只。正常對照組、模型組、胃乃安低劑量（ 0.3 g/kg）組（ W1組）、胃乃安高劑量（ 1.5 g/kg）組（ W2組）。 W1組、W2組以胃乃安0.3 mL/只灌胃，正常組和模型組則給予等量0.9%生理鹽水0.3 mL/只灌胃，每天1次，連續(xù)25 d，常規(guī)飼養(yǎng)。

1.2.2 小鼠急性胃黏膜損傷模型建立 將前述分組小鼠在建立損傷模型前禁食24 h，不禁水，末次給藥后1 h，模型組、W1組、W2組給予無水乙醇（0.3 mL/只）灌胃，對照組以等量0.9%生理鹽水（0.3 mL/只）灌胃，1 h后頸椎脫臼法處死，剖腹，將胃的賁門及幽門結扎后取出，并向胃內注入10%甲醛溶液3 mL，然后取胃置于同濃度甲醛溶液中固定20 min。

將已固定的胃沿胃大彎剪開，用生理鹽水沖洗胃內殘留物后將胃粘膜展開，觀察胃粘膜改變、拍照并按Guth記分〔7〕全胃各病灶長度之和為損傷指數(shù)，病灶長度<1 mm為1分；1.0～1.9 mm為2分，依次類推，病灶寬度>2 mm則將其計數(shù)加倍。損傷抑制率=（模型對照組損傷指數(shù)-用藥組損傷指數(shù)）/模型對照組損傷指數(shù)×100%。

在病變明顯部位取材，常規(guī)固定脫水，石蠟包埋，4 um厚度連續(xù)切片，HE染色制成病理切片于顯微鏡下觀察。

2 結果

2.1 小鼠胃黏膜損傷指數(shù)測定

表1 各組小鼠胃黏膜損傷指數(shù)及抑制率表

2.1.2 各實驗組小鼠胃黏膜損傷指數(shù)比較 見圖1。

圖1 各組小鼠胃粘膜損傷指數(shù)比較

2.2 形態(tài)學觀察 與正常對照組比較，見圖2。模型組的胃黏膜重度充血、水腫，表面有較多灰黃色分泌物，可見散在糜爛和小灶性出血；低劑量組的胃黏膜中度出血、水腫，表面有灰黃色分泌物，可見散在出血點；高劑量組胃黏膜輕度出血、水腫，偶見出血。

圖2 各實驗組小鼠胃黏膜形態(tài)學觀察

2.3 組織病理學觀察 與正常對照組比較，見圖3。模型組胃黏膜淺層嚴重糜爛、出血，大量炎細胞浸潤，黏膜固有層內腺體明顯破壞；胃乃安低劑量組表層黏膜中度糜爛，腺體破壞，淺層出血，有炎細胞浸潤；胃乃安高劑量組鏡下可見黏膜輕度糜爛，有少量炎細胞浸潤，腺體完整。

圖3 各實驗組小鼠胃黏膜組織病理觀察

3 討論

酒精性胃黏膜損傷是經口攝入乙醇，可直接損害胃黏膜上皮被覆的脂蛋白層，使胃黏膜屏障受損，加上胃液中氫離子回滲入黏膜上皮細胞，導致組胺、5-羥色胺和肝素釋放，引起黏膜下動脈短路，毛細血管壓力升高與通透性增加，最終出現(xiàn)黏膜充血、紅細胞滲出、胃黏膜糜爛出血，甚至淺表性潰瘍。

胃乃安膠囊由五味藥物組成，含有人參、黃芪、田七、人工牛黃及珍珠層粉。珍珠層粉〔8〕可以消除精神緊張，通過鎮(zhèn)靜安神的作用可以解除胃和十二指腸潰瘍的心理精神病根。另外，珍珠層粉含有豐富的CaCO3，可中和部分胃酸，加之所含的殼角蛋白不易被胃酶、胰酶消化，故可在潰瘍處形成黏膜保護層，促使纖維母細胞增殖，從而修復潰瘍。研究表明，胃乃安膠囊不僅能縮小無水乙醇致胃黏膜損傷的潰瘍程度，而且對胃黏膜具有一定的保護作用，在臨床上有一定的應用前景〔9-12〕。

本實驗研究發(fā)現(xiàn)，對小鼠進行胃乃安灌胃造模后，胃乃安組乙醇致小鼠胃黏膜損傷程度明顯輕于模型組，并且胃乃安高劑量組的小鼠胃黏膜損傷程度明顯輕于低劑量組。本實驗說明胃乃安可能降低了小鼠胃液中游離酸和總酸含量，起到了抗?jié)儽Ｗo胃黏膜的作用。

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