高 純,杜忠富,楊少龍,何 琳,張 翠,方春生
(大理學(xué)院藥學(xué)與化學(xué)學(xué)院,云南大理 671000)
荔枝核為無患子科植物荔枝Litchi chinensis Sonn.的成熟種子〔1〕。 褐毛荔枝Litchi chinensis var.fulvosus YQ Lee是荔枝的野生變種〔2〕,主要分布于云南紅河州、西雙版納州地區(qū)〔3〕。荔枝核具有行氣散結(jié)、驅(qū)寒止痛的功效,民間廣泛用于治療胃脘痛、疝氣痛、婦女血?dú)獯掏?。藥理學(xué)前期研究表明荔枝核具有抗炎、止痛、退熱、抑制移植性腫瘤、對抗肝損傷、降血糖、降血脂、抗氧化、抗糖尿病、抑制病毒等作用。尚未見對動物消化道功能影響的相關(guān)文獻(xiàn)報道。褐毛荔枝的核大,在民間應(yīng)用功效較好,但我國還尚未對褐毛荔枝核進(jìn)行開發(fā)利用〔4-5〕。本文初步研究了褐毛荔枝核對動物消化道功能的作用,現(xiàn)報道如下。
1.1 動物 昆明種小鼠80只,體重18~20 g,雌雄各半;豚鼠,體重200~250 g,成都實驗動物中心提供,合格證號SCXK( YU)2007-001。
1.2 藥品 褐毛荔枝核(產(chǎn)于云南省紅河州元陽縣),阿托品,新鄉(xiāng)市常樂制藥有限責(zé)任公司,批號:1001025;乙酰膽堿,上海三愛思試劑有限公司,批號:20061130;組胺,上海麗珠東風(fēng)生物技術(shù)有限公司,批號:0806058;氯化鋇,廣東白云山化工廠,批號:080706。
1.3 儀器 BL420E+生物機(jī)能實驗系統(tǒng)、恒溫平滑肌槽,成都泰盟科技有限公司生產(chǎn)。
2.1 對小鼠胃排空運(yùn)動的作用〔6-7〕取小鼠40只,隨機(jī)分為4組,每組10只,各組按0.2 mL/10 g體重灌以藥物和生理鹽水。實驗前小鼠禁食24 h,實驗當(dāng)天給藥一次,給藥1 h后,各組均灌以營養(yǎng)半固體糊(取10 g羧甲基纖維素,溶于250 mL蒸餾水,然后分別加入奶粉16 g、糖8 g、淀粉8 g,攪拌均勻,最后配成300 mL約300 g的半固體糊狀物,放入冰箱冷藏,用前取出,恢復(fù)至室溫)0.5 mL/只。30 min后脫頸椎處死,剖開腹腔,結(jié)扎胃賁門和胃幽門,取胃,用濾紙拭干后稱重,然后沿胃大彎減開胃體,用生理鹽水洗凈胃內(nèi)容物,拭干稱重。以胃全重和胃凈重的差值為胃內(nèi)殘物重,計算胃內(nèi)殘留物占胃全重的百分比為胃內(nèi)殘留率。數(shù)據(jù)用均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差表示,采用t檢驗處理,見表1。
表1 褐毛荔枝核對小鼠胃排空運(yùn)動的作用(±s)
表1 褐毛荔枝核對小鼠胃排空運(yùn)動的作用(±s)
注:與對照組比較,☆:P<0.05;△:P<0.01。
分組 n生理鹽水 10劑量/(g/kg) 胃殘留率/%052.72±7.90阿托品 100.0668.94±11.16☆褐毛荔枝核低劑量 101.662.53±8.602△褐毛荔枝核高劑量 103.266.64±11.75△
結(jié)果表明,褐毛荔枝核組與對照組比較有顯著抑制小鼠胃排空運(yùn)動的作用,其低劑量組與對照組比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),其高劑量組與對照組比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。褐毛荔枝核對小鼠胃排空運(yùn)動有顯著的抑制作用,且隨著劑量增加作用增強(qiáng)。阿托品組有明顯抑制小鼠胃排空運(yùn)動的作用,與對照組比較,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。褐毛荔枝核高低劑量組與阿托品組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
2.2 對小鼠腸推進(jìn)運(yùn)動的作用〔6-7〕取小鼠40只,隨機(jī)分為4組,每組10只,各組按0.2 mL/10 g體重灌服藥物和生理鹽水,實驗前小鼠禁食24 h,實驗當(dāng)天給藥1次,給藥1 h后,各小組均灌以碳末混合液(阿拉伯膠10%,活性炭5%)0.5 mL。30 min后脫頸椎處死,剖開腹腔分離腸系膜。剪取上端至幽門,下端至盲腸的腸管,測量腸管總長度作為小腸總長度。測量幽門至碳末前沿的距離作為碳末在小腸內(nèi)的推進(jìn)距離,計算小腸的推進(jìn)率。數(shù)據(jù)用均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差表示,采用t檢驗進(jìn)行統(tǒng)計處理,見表2。
表2 褐毛荔枝核對小鼠腸推進(jìn)運(yùn)動的作用(±s)
表2 褐毛荔枝核對小鼠腸推進(jìn)運(yùn)動的作用(±s)
注:與對照組比較,△:P<0.05;☆:P<0.01。
分組 n生理鹽水 10劑量/(g/kg) 推進(jìn)率/%076.97±6.72阿托品 100.0666.67±7.81△褐毛荔枝核低劑量 101.664.94±17.83☆褐毛荔枝核高劑量 103.256.8.4±14.09☆
結(jié)果表明,褐毛荔枝核組與對照組比較,其低劑量組與對照組比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),其高劑量組與對照組比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。褐毛荔枝核有明顯抑制腸推進(jìn)的作用,且隨著劑量增加作用增強(qiáng)。阿托品組有明顯抑制腸推進(jìn)的作用,與對照組比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。褐毛荔枝核高低劑量組與阿托品組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義( P>0.05)。
2.3 對豚鼠離體回腸平滑肌收縮作用的影響〔6-7〕取禁食24 h的豚鼠,制備離體回腸肌標(biāo)本,標(biāo)本長2 cm。將標(biāo)本一端結(jié)扎固定于離體恒溫平滑肌槽的通氣鉤上,另一端用同樣方法處理后與張力換能器相連。將標(biāo)本置于盛有20 mL臺氏液(NaCl 9 g、KCl 0.2 g、MgCl20.26 g、NaH2PO40.065 g、NaHCO31 g、CaCl20.2 g、葡萄糖1 g/1000 mL)的試管內(nèi),通入95%O2+CO2氣體(1~2個氣泡/秒),37 ℃恒溫,調(diào)節(jié)張力負(fù)荷為2 g,穩(wěn)定30 min后描記正常曲線。向麥?zhǔn)喜蹆?nèi)滴加褐毛荔枝核低、高劑量溶液,記錄離體回腸平滑肌舒縮曲線,每加一種藥液后換液3次。
另取3組標(biāo)本操作同上,穩(wěn)定30 min后描記正常曲線。分別向麥?zhǔn)喜蹆?nèi)滴加乙酰膽堿,最大效應(yīng)后換液3次,加入褐毛荔枝核高劑量溶液(1.6 mg/mL)1 min后加入乙酰膽堿,記錄最大效應(yīng);加入組胺,最大效應(yīng)后換液3次,加入褐毛荔枝核高劑量溶液(1.6 mg/mL)1 min后加入組胺,記錄最大效應(yīng);加入氯化鋇,最大效應(yīng)后換液3次,加入褐毛荔枝核高劑量溶液(1.6 mg/mL)1 min后加入氯化鋇,記錄最大效應(yīng)。每組10個標(biāo)本。數(shù)據(jù)用均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差表示,采用t檢驗進(jìn)行統(tǒng)計處理,見表3。
表3 褐毛荔枝核對豚鼠離體回腸平滑肌收縮作用的影響( ±s)
表3 褐毛荔枝核對豚鼠離體回腸平滑肌收縮作用的影響( ±s)
注:與對照組比較,☆:P<0.01;與乙酰膽堿比較,★:P<0.01;與氯化鋇比較,△:P<0.01;與組胺比較,▲:P<0.01。
分組 n生理鹽水 10劑量/(mg/mL) 收縮力/g 02.02±0.06褐毛荔枝核低劑量 100.81.80±0.08☆褐毛荔枝核高劑量 101.61.75±0.19☆乙酰膽堿 100.14.36±1.03褐毛荔枝核高劑量+乙酰膽堿 101.6+0.12.18±0.62★組胺 100.14.57±0.43褐毛荔枝核高劑量+組胺 101.6+0.12.31±0.41▲氯化鋇 1016.54±0.53褐毛荔枝核高劑量+氯化鋇 101.6+15.68±0.55△
結(jié)果表明,褐毛荔枝核能夠舒張豚鼠離體回腸平滑肌,對乙酰膽堿、組胺和氯化鋇引起的豚鼠離體回腸平滑肌收縮具有明顯的抑制作用(P<0.01)。
本研究表明,褐毛荔枝核對小鼠胃排空運(yùn)動和腸推進(jìn)運(yùn)動有顯著的抑制作用,且隨著劑量增加作用增強(qiáng),其對乙酰膽堿、組胺和氯化鋇引起的豚鼠離體回腸平滑肌收縮也具有明顯的抑制作用。藥理學(xué)前期研究表明荔枝核具有抑制病毒、促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡及抑制腫瘤、抗糖尿病、抗肝損傷、抗氧化、抗炎、止痛、退熱等作用〔8-10〕。民間廣泛用于治療胃脘痛、疝氣痛、婦女血?dú)獯掏?、腹瀉等。褐毛荔枝核對小鼠胃排空運(yùn)動和腸推進(jìn)運(yùn)動的顯著抑制作用說明其具有較好的舒張胃腸道平滑肌的作用。乙酰膽堿、組胺和氯化鋇引起的豚鼠離體回腸平滑肌收縮能被褐毛荔枝核抑制,提示其作用機(jī)制可能與阻斷M受體和H1受體有關(guān),以上研究為褐毛荔枝在民間的應(yīng)用提供了實驗依據(jù)。
〔1〕國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典:一部〔S〕.2005版.北京:化學(xué)工藝出版社,2005:196.
〔2〕柳建良.荔枝種質(zhì)多樣性及其保護(hù)與發(fā)展〔J〕.韶關(guān)學(xué)院學(xué)報,2005,26( 9):11-13.
〔3〕羅興平,魏團(tuán)仁,呂玉蘭,等.云南褐毛荔枝種質(zhì)資源調(diào)查與分析〔J〕.熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué),2010,30( 9):52-54.
〔4〕朱忠良,發(fā)展元陽荔枝大有可為〔J〕.云南農(nóng)業(yè)科技,1994,6:15-16.
〔5〕蘇鴻雁.云南荔枝發(fā)展的基石:褐毛荔枝〔J〕.云南農(nóng)業(yè)科技,1995,4:10.
〔6〕方春生,王成軍,李輝.高河菜對動物消化道運(yùn)動功能的影響〔J〕.中國民族民間醫(yī)藥雜志,2006,2:113-114.
〔7〕張龍,尹興章,葉妙萍,等.西歸對動物消化道功能的影響〔J〕.云南中醫(yī)中藥雜志,2010,31( 2):48-49.
〔8〕郭潔文,潘競鏘.荔枝核的化學(xué)成分、生物活性及藥理作用研究〔J〕.中國新藥雜志,2006,15( 8):585-588.
〔9〕鄧志軍,郭潔文,潘競鏘.荔枝和荔枝核及其有效部位的藥理及藥效學(xué)作用〔J〕.今日藥學(xué),2009,19( 5):7-10.
〔10〕潘競鏘,郭潔文,韓超,等.荔枝核的藥理實驗研究〔J〕.中國新藥雜志,2000,9( 1):14-16.