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    無償獻(xiàn)血者B(A)表型2例報(bào)告

    2012-09-19 00:35:52王林張國平李雪英
    中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新 2012年20期
    關(guān)鍵詞:效價(jià)獻(xiàn)血者血型

    王林 張國平 李雪英

    筆者在工作中發(fā)現(xiàn)2例正反定型不符的無償獻(xiàn)血者標(biāo)本,經(jīng)一系列血型血清學(xué)檢查,證實(shí)為罕見的B(A)表型,現(xiàn)報(bào)告如下。

    1 材料與方法

    1.1 標(biāo)本來源 均來源于本市街頭無償獻(xiàn)血者,其中女性1名,曾有獻(xiàn)血史,獻(xiàn)血檔案記錄為B型;男性1名,為初次獻(xiàn)血者。

    1.2 材料

    1.2.1 試劑 單克隆抗-A、抗-B(分別由國內(nèi)甲、乙、丙3個(gè)試劑生產(chǎn)廠家提供,均經(jīng)中國食品藥品鑒定研究院鑒定合格并有合格標(biāo)簽);人源抗-A、人源抗-B、抗-A1、抗-H(均由上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司提供);A2、A2B細(xì)胞是本室制備的冰凍解凍紅細(xì)胞;A1、B、O紅細(xì)胞是本室使用當(dāng)天自配的新鮮紅細(xì)胞。

    1.2.2 儀器設(shè)備 KA-2200血球洗滌離心機(jī)(日本KUBOTA公司);SBHW2-1型電熱恒溫水浴箱(北京醫(yī)療設(shè)備廠有限責(zé)任公司)。

    1.3 方法

    1.3.1 ABO正反定型 分別用3個(gè)試劑生產(chǎn)廠家的單克隆抗血清和自配的A1、B、O紅細(xì)胞進(jìn)行正反定型[1]。結(jié)果見表1。

    1.3.2 亞型檢測 (1)和多克隆人源抗-A 、抗-B反應(yīng);(2)和抗-H反應(yīng)并觀察其反應(yīng)強(qiáng)度;(3)觀察和抗-A1的反應(yīng)情況;(4)觀察和A2細(xì)胞及A2B細(xì)胞的反應(yīng)情況。結(jié)果見表2。

    1.3.3 血漿中抗-A1和抗-A效價(jià)測定 (1)取2名獻(xiàn)血者血漿各0.3 ml,分別和0.15 ml A2細(xì)胞混合,置4 ℃冰箱吸收40 min,當(dāng)吸收后的血漿和A2細(xì)胞的反應(yīng)呈陰性時(shí),血漿中所剩抗體即為抗-A1。(2)取獻(xiàn)血者吸收后的血漿0.1 ml,用生理鹽水倍比稀釋,加入等量2% A1紅細(xì)胞測定抗-A1的凝集效價(jià);(3)取獻(xiàn)血者未吸收的血漿0.1 ml,用生理鹽水倍比稀釋,加入等量2% A2紅細(xì)胞測定抗-A的凝集效價(jià)。結(jié)果見表2。

    1.3.4 基因檢測 將獻(xiàn)血者標(biāo)本快遞至上海市血液中心,由血型參比實(shí)驗(yàn)室協(xié)助進(jìn)行基因檢測。

    2 結(jié)果

    2.1 血型血清學(xué)結(jié)果 由表1、表2看,2名獻(xiàn)血者的血清學(xué)反應(yīng)格局可歸納為以下3點(diǎn):(1)紅細(xì)胞A抗原減弱,B抗原正常;(2)H抗原明顯增強(qiáng),與O細(xì)胞反應(yīng)強(qiáng)度相當(dāng);(3)血清凝集A1細(xì)胞,也凝集A2細(xì)胞,即血清中既存在抗-A1,又存在抗-A,均符合B(A)表型的血型血清學(xué)特點(diǎn)[2],所以初步確定為B(A)表型。

    2.2 基因檢測結(jié)果 經(jīng)上海市血液中心血型參比實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行基因檢測,2名獻(xiàn)血者分別具有B(A)﹡02和B(A)﹡04等位基因,所以進(jìn)一步證實(shí)為B(A)表型。

    表1 2名獻(xiàn)血者ABO正反定型反應(yīng)格局

    表2 2名獻(xiàn)血者亞型檢測反應(yīng)格局及血漿中抗-A1、抗-A效價(jià)測定結(jié)果

    3 討論

    ABO亞型在血型血清學(xué)試驗(yàn)中是導(dǎo)致正反定型不一致的主要原因之一。其中B(A)表型是AB型中非常少見的亞型,在人群中的發(fā)生頻率大約在1/17萬~1/58萬[3]。其形成的機(jī)制,在文獻(xiàn)[4]中有這樣的描述:(1)A和B糖基轉(zhuǎn)移酶在選擇催化供體底物時(shí)并不是十分精確的,A和B的基因產(chǎn)物可能存在少部分的重疊,在合適的條件下,高活性的B轉(zhuǎn)移酶能夠催化N-乙酰氨基半乳糖到一種低分子質(zhì)量的H類似物(2′-巖藻糖),形成一種具有A活性的結(jié)構(gòu)。(2)在某些個(gè)體的分子遺傳學(xué)研究結(jié)果顯示,與上述高活性B轉(zhuǎn)移酶能夠產(chǎn)生A抗原的理論并不一致。有2例的核苷酸序列與正常B基因相比具有一個(gè)有意義的突變,Ser235Gly,他們是B(A)/O雜合子,他們的父親是A1B,基因型A1/B(A),因而B(A)表現(xiàn)型更像是由于底物特異性的酶轉(zhuǎn)變所致,而不是由于顯著增強(qiáng)的B轉(zhuǎn)移酶活性所致。

    無論B(A)表型的形成是哪一種機(jī)制,其血型血清學(xué)均表現(xiàn)為弱的A抗原,而血清中卻含有比較強(qiáng)的抗-A和抗-A1抗體,極易被誤定為B型而輸注給B型患者,從而導(dǎo)致輸血不良反應(yīng),給臨床安全輸血帶來極大隱患。筆者對(duì)2例獻(xiàn)血者血漿中的抗體活性及效價(jià)進(jìn)行測定,結(jié)果證實(shí),兩者均含有在37 ℃有反應(yīng)活性的抗-A抗體,所以,當(dāng)其作為受血者時(shí),只能輸注O型或B型紅細(xì)胞,而不能輸注AB型紅細(xì)胞,但需要輸注血漿類制品時(shí),則只能輸注AB型,否則,同樣發(fā)生輸血不良反應(yīng)。由此進(jìn)一步證明,正確鑒定獻(xiàn)血者的B(A)表型以及對(duì)其輸血安全問題進(jìn)行指導(dǎo)的重要性。本文中的女性獻(xiàn)血者,在以往獻(xiàn)血時(shí)即被誤定為B型,可能因本站原來初、復(fù)檢均使用丙廠家生產(chǎn)的單克隆試劑所致。這種試劑可能是針對(duì)一種血型抗原的單個(gè)抗原決定簇的單克隆細(xì)胞技術(shù)生產(chǎn)的單一抗體試劑,抗原抗體反應(yīng)極為單一[5],當(dāng)某一血型抗原的基因表位上哪怕是一個(gè)功能基團(tuán)或原子不同、位置差異和立體構(gòu)象變化,均可能不被識(shí)別而漏檢[6]。本站采用系列參考品,選擇凝集效價(jià)高、親和力強(qiáng)、亞型標(biāo)本檢出率高的甲、乙兩個(gè)生產(chǎn)廠家的單克隆抗體試劑,分別用于體采科初檢和檢驗(yàn)科復(fù)檢,從而避免了漏檢情況的再次發(fā)生。另外,由于該血型具有遺傳性,本站征得獻(xiàn)血者同意,將組織相關(guān)人員對(duì)其家系進(jìn)行調(diào)查,以觀察B(A)基因在家族中的傳遞情況,并進(jìn)一步就獻(xiàn)血、用血以及遺傳等相關(guān)問題給予具體指導(dǎo),確實(shí)保證兩個(gè)家系家庭成員的輸血安全。由此也體現(xiàn)了本站良好的獻(xiàn)血服務(wù)及科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ鲬B(tài)度。

    [1] 葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].第3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006:246-271.

    [2]郭忠慧,向東,朱自嚴(yán),等.罕見的CisAB與B(A)血型的基因型研究[[J].中華醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)雜志,2004,21(4):321-324.

    [3]范亞欣,孟慶麗,潘凌子,等.1例罕見的B(A)亞型患者的血型鑒定和配血[[J].中國輸血雜志,2011,24(10):892-893.

    [4] 杰夫.丹尼爾.人類血型[M].朱自嚴(yán),譯.北京:科學(xué)出版社,2007:27-28.

    [5] 宿蘭,楊世英,廉維,等.罕見的B(A)表型血清學(xué)及基因檢測[J].中國輸血雜志,2010,23(3):200-202.

    [6] 吳敏慧,劉毅,劉洪莉,等.ABO血型正反定型不符確認(rèn)試驗(yàn)結(jié)果分析[J].臨床輸血與檢驗(yàn),2005,7(3):198 -199.

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