老年人群載脂蛋白E基因多態(tài)性與腦梗死遺傳易感性的關(guān)系

李學(xué)軍 郭大英 曾碧映 (益陽(yáng)醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校，湖南 益陽(yáng) 413000)

動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死約占全部腦卒中的70%，是影響生活質(zhì)量、乃至引起死亡的一大主要原因?，F(xiàn)代研究認(rèn)為人載脂蛋白E(ApoE)基因多態(tài)性與脂質(zhì)代謝、動(dòng)脈粥樣硬化、腦梗死發(fā)生發(fā)展有密切關(guān)系〔1〕。ApoE參與神經(jīng)系統(tǒng)的許多病理生理過程，與神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病、腦血管疾病、水腫性損傷等多種臨床常見疾病有關(guān)〔2〕。ApoE結(jié)構(gòu)基因具有遺傳多態(tài)性特點(diǎn)〔3〕。為了明確ApoE基因多態(tài)性與老年動(dòng)脈粥樣硬化腦梗死之間的關(guān)系，本研究采用基因芯片技術(shù)測(cè)定ApoE基因多態(tài)性，探討其與動(dòng)脈粥樣硬化腦梗死病人腦動(dòng)脈粥樣硬化之間的關(guān)系。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象 經(jīng)我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過，于2009年1月至2012年6月選擇我院住院治療的老年腦梗死患者150例作為觀察組。入選標(biāo)準(zhǔn):年齡≥60歲;均通過頭顱CT或者M(jìn)RI檢查確診動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死。同時(shí)選取我院門診體檢健康年齡≥60歲的老年人群240例作為對(duì)照組。合并家族性高膽固醇血癥、脂肪肝、糖尿病、甲狀腺疾病、慢性肝腎疾病、周圍血管疾病、血液系統(tǒng)疾病、惡性腫瘤及入院前1 w內(nèi)使用降脂藥物者均不納入本研究。觀察組240例，男132例，女108例，平均年齡(69.4±9.7)歲;對(duì)照組240例，其中包括男128例，女112例，平均年齡(68.7±10.1)歲。兩組的性別、年齡構(gòu)成差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。研究開始前均已取得患者或者家屬的知情同意，并簽署同意書。

1.2 ApoE基因多態(tài)性及血脂水平檢測(cè) 所有受試者均空腹10 h后清晨抽取靜脈血。自然凝集血5 ml在常溫下2 000 r/min離心5 min，小心吸取血清置于-8O℃超低溫冰箱保存?zhèn)溆?。人血液基因組DNA的提取采用堿裂解法，基因組DNA提取系統(tǒng)(DP319-01)試劑由天根生化科技(北京)有限公司生產(chǎn)提供。ApoE基因多態(tài)性采用高通量的基因芯片檢測(cè)。所有操作均嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。ApoE基因型檢測(cè)試劑盒由珠海賽樂奇生物科技有限公司生產(chǎn)提供。所有受試者的血脂水平〔總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-c)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-c)〕均經(jīng)Olympus AU400全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行檢測(cè)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量數(shù)據(jù)采用±s的方式表示，組間均數(shù)比較用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 老年腦梗死患者與健康體檢者血脂水平比較 觀察組患者血清TC、TG水平高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(TC:t=19.125，P=0.003;TG:t=13.412，P=0.001);HDL-c 水平低于對(duì)照組，差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=8.532，P=0.007)。見表1。

表1 兩組血脂水平比較(±s，mmol/L)

表1 兩組血脂水平比較(±s，mmol/L)

與對(duì)照組比較:1)P＜0.05;下表同

組別 n TC TG LDL-c HDL-c觀察組 150 5.21±0.921)1.94±0.321)2.49±0.78 1.27±0.351)對(duì)照組240 4.72±0.87 1.45±0.51 2.35±0.65 1.68±0.47

2.2 老年腦梗死患者與健康體檢者之間的ApoE基因多態(tài)性比較 在老年腦梗死患者與健康體檢者中皆以ε3/3型頻率最高，ε3/4、ε3/2 次之，ε4/4、ε2/4、ε2/2 型頻率很低，兩組人群ApoE基因型頻率均符合 Hardy-Weinberg平衡;兩組受試者ApoE ε4等位基因頻率存在明顯差異，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=3.972，P=0.030)。見表 2。

表2 兩組ApoE基因型與ApoE等位基因頻率比較〔n(%)〕

3 討論

最新研究表明ApoE是動(dòng)脈粥樣硬化、腦卒中的危險(xiǎn)因素，與心腦血管性疾病發(fā)病相關(guān)〔4〕。ApoE是一種單鏈多態(tài)糖蛋白，包括299個(gè)氨基酸殘基，主要在肝臟實(shí)質(zhì)細(xì)胞合成，腦組織中的星形細(xì)胞也能合成一部分。ApoE是血漿重要的載脂蛋白之一，主要分布在血漿乳 糜微粒(CM)、極低密度脂蛋白(VLDL)和高密度脂蛋白(HDL)中，參與機(jī)體血脂代謝過程，起到維持膽固醇平衡的作用〔5，6〕，在動(dòng)脈硬化的發(fā)生、發(fā)展過程中起著重要的作用。在不同的人群中，三個(gè)不同的ApoE等位基因分布頻率存在一定差異，因而不同人群中ApoE表型分布頻率也有一定程度的不同。ApoE編碼基因位于第19號(hào)染色體長(zhǎng)臂13區(qū)2帶上，全長(zhǎng)3.7 kb，包含4個(gè)外顯子和3個(gè)內(nèi)含子。ApoE的合成由在同一個(gè)基因位點(diǎn)上的三個(gè)等位基因控制，通常稱為ε2、ε3和ε4，其中每一個(gè)等位基因可表達(dá)1個(gè)主要異構(gòu)體，因此總共可以產(chǎn)生包括三種純合子(ε2/2、ε3/3、ε4/4)和三種雜合子(ε2/3、ε2/4、ε3/4)的六種常見表型，其中 ε3/3 是最常見的基因表型。

國(guó)內(nèi)外研究表明ApoE是導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化的一個(gè)重要危險(xiǎn)因素，一般情況下血漿TC水平變化的8%左右與ApoE基因多態(tài)性存在關(guān)系〔7～9〕。我國(guó)學(xué)者研究顯示頸動(dòng)脈狹窄病人等位基因ε4頻率升高，ε3頻率降低，可能說明在某種程度上ε4是頸動(dòng)脈狹窄的危險(xiǎn)因素，而ε3是其保護(hù)因素〔10〕。本研究結(jié)果表明，老年腦梗死患者ApoE ε4等位基因頻率明顯高于健康對(duì)照組，與國(guó)內(nèi)相關(guān)研究報(bào)道相符〔11〕。

綜上所述，ApoE基因多態(tài)性與老年腦梗死血脂水平升高及其發(fā)病有關(guān)，ε4等位基因可能是腦梗死的危險(xiǎn)因素，值得進(jìn)一步研究。

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