全蝎純化液對實驗性動脈血栓形成t－PA、PAI－1的影響1）

趙檢英，石 雕，譚 茜，徐愛良，彭延古

心腦血管疾病已成為人類健康的最大威脅之一［1］。組織型纖溶酶原激活物（t－PA）、纖溶酶原活化物抑制劑（PAI－1）是纖溶系統中重要的活性物質，它們均由血管內皮細胞產生。在諸多因素中，纖溶系統功能失衡是造成血管事件發(fā)生的決定性因素［2］。正常情況下血漿t－PA和PAI－1處于動態(tài)平衡狀態(tài)，t－PA的血液含量及活性可預測血栓形成的危險度［3］，PAI－1水平升高則與心腦血管病變的形成關系密切［4，5］。研究表明［6］，血漿t－PA和PAI－1水平與血管內皮穩(wěn)定性密切相關，

監(jiān)測t－PA和PAI－1這兩項指標，在心腦血管事件的預防和治療方面，有簡便易行、可反復測定和經濟實用的特點。本研究旨在觀察全蝎純化液對家兔頸總動脈血栓形成血漿t－PA、PAI－1的影響。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動物 新西蘭白兔50只，1.8kg～2.1kg，雌雄各半，購自長沙市東創(chuàng)實驗動物有限公司衛(wèi)生防疫動物中心，動物許可證號：SCXK（湘）2009－0012。

1.1.2 藥物 全蝎購自湖南省醫(yī)藥有限公司，經水煮醇沉［7］、凝膠層析和離子交換層析等分離純化過程將其制備，真空冷凍干燥成粉末，－20℃保存?zhèn)溆茫b定為肽類物質。

1.2 方法 將50只新西蘭白兔采用隨機數字表法分為5組，空白組、模型組、全蝎純化液大劑量組（20mg／kg）、全蝎純化液中劑量組（10mg／kg）和全蝎純化液小劑量組（5mg／kg）。全蝎純化液各劑量組耳緣靜脈注射全蝎純化液，空白組、模型組給予同等體積的生理鹽水。注射后模型組和全蝎純化液大、中、小劑量組按鄧常青模型制備方法［8］分離兩側頸總動脈和股動脈，以兩個動脈夾夾閉一側頸總動脈兩端，夾間距離為2.5cm；用4號針頭刺入動脈并固定，迅速抽出動脈段內殘留血液，并以生理鹽水反復沖洗3次至動脈段內無殘血，然后用0.4mL 10%H2O2分3次～4次注入動脈段內連續(xù)作用10min，再以生理鹽水沖洗2次，并用ZT醫(yī)用膠粘合針孔以止血，最后再放開血流。2h后剪下頸總動脈稱質量，以另外一側等長的頸總動脈作為對照，兩者質量差即為血栓質量。造模2h后股動脈取血，采用酶聯免疫吸附法測t－PA、PAI－1的含量，試劑盒購自上海太陽生物技術有限公司，按說明書操作步驟進行。以直接計數法測定血小板計數（Pt）。

1.3 統計學處理 采用SPSS 16.0統計軟件進行數據分析，計量資料用均數±標準差（±s）表示，組間比較用t檢驗。

2 結 果

與空白組比較，模型組t－PA明顯降低，PAI－1明顯升高，差異有統計學意義（P＜0.01）；與模型組比較，全蝎大、中、小各劑量組t－PA的含量均增高，PAI－1含量均降低，差異均有統計學意義（P＜0.01），而各組的血小板計數差異無統計學意義（P＞0.05）。詳見表1。

表1 全蝎抗凝活性成分對t－PA、PAI－1的影響（±s）

表1 全蝎抗凝活性成分對t－PA、PAI－1的影響（±s）

組別 只數 t－PA（kU／L） PAI－1（kAU／L） Pt（×109／L）空白組10 2.38±0.68 3.32±1.12 76.1±10.3模型組 10 1.65±0.451） 7.89±1.231） 71.2±9.8全蝎純化液大劑量組 10 6.59±0.911）2） 2.02±0.982） 79.8±7.9全蝎純化液中劑量組 10 4.98±0.761）2） 2.98±0.842） 73.3±8.2全蝎純化液小劑量組 10 3.52±0.891）2） 3.78±1.102） 75.6±6.8與空白組比較，1）P＜0.01；與模型組比較，2）P＜0.01

3 討 論

血栓性疾病主要是指動脈血栓性疾病與靜脈血栓性疾病，已成為我國與西方國家人口死亡與致殘的主要原因，是中老年人易發(fā)的疾病之一，而且目前青年病人的數量也在上升。按世界衛(wèi)生組織的統計，每年大概有1 800萬人死于各種心腦血管疾病。動脈血栓形成是心腦血管疾病的重要病理基礎之一，探討血栓形成的病因病理，尋找抗血栓形成的藥物對于心腦血管疾病的防治具有重要意義。血管內皮細胞結構和功能的完整是機體維持血管張力、調節(jié)血壓、調節(jié)止血與抗血栓形成平衡的主要環(huán)節(jié)。在動脈血栓栓塞性疾病中，血栓形成大多在血管內皮細胞受損、動脈粥樣斑塊破裂的基礎上發(fā)生的［9］。大量研究表明，活性氧能破壞血管組織，使血管內皮受損。H2O2為活性氧的一種，與其他自由基一樣也能損害各種組織［10］。該實驗中使用高濃度H2O2溶液通過損傷血管內膜，建立家兔頸總動脈血栓模型，經實驗證明，所有家兔均有血栓形成。當家兔動脈血管內皮用H2O2損傷后，血小板黏附于受損血管處暴露的內皮下組織，進而聚集、分泌、釋放血栓素A2（TXA2），使血小板進一步活化，同時激活凝血系統，凝血酶促使纖維蛋白形成，最終形成附壁的血栓。血栓疾病與纖溶系統功能有著密切的關系，纖溶系統主要由PLg、纖溶酶原激活物和激活物抑制劑、纖溶酶和纖溶酶抑制劑組成。纖溶活性低下或纖溶抑制物活性增高，是血栓形成的一個促進因素。近年來研究顯示，t－PA、PAI－1在纖維蛋白溶解過程中起著重要作用，t－PA是纖溶系統主要的生理性激活劑，它能在纖維蛋白凝塊上高效地激活纖溶酶原生成纖溶酶使纖維蛋白降解。PAI－1能快速作用于t－PA而形成復合物使t－PA滅活。t－PA和PAI－1主要由血管內皮細胞產生，t－PA能使纖溶酶原激活為纖溶酶，繼而使纖維蛋白水解，PAI－1為此反應過程的抑制劑。當血栓形成時，t－PA選擇性地與血栓中的纖維蛋白結合，激活纖溶酶以溶解血栓。PAI－1作為一種重要的纖溶酶原激活物抑制物，主要在血小板活化釋放的同時被釋放到血液中抑制纖溶酶原激活物的活性［11］，其與t－PA是調節(jié)纖溶系統活性的重要成分，兩者功能的平衡是防止血栓形成的重要條件［12］。本實驗結果表明，全蝎純化液能增強t－PA的活性，降低PAI－1的活性，提示全蝎純化液抗栓、溶栓機制可能與其影響t－PA和PAI－1的分泌有關，通過增強t－PA的活性、降低PAI－1的活性，從而增強纖溶系統活性，呈現出纖溶作用，進而抑制血栓形成，使血栓溶解。全蝎純化液通過調節(jié)t－PA和PAI－1這兩種平衡物質，來維持機體纖溶功能的平衡穩(wěn)定，防止血栓形成。故全蝎純化液有可能發(fā)展成為一類新型的抗血栓藥物，為肝素治療無效的血栓患者開辟新的、有效的治療方案提供新的思路。

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