2型糖尿病合并腦梗死患者血清內(nèi)脂素與HCY和CRP的相關(guān)關(guān)系研究

朵慧敏 梁瑋 張眾 王春雷

2型糖尿病合并腦梗死患者血清內(nèi)脂素與HCY和CRP的相關(guān)關(guān)系研究

朵慧敏 梁瑋 張眾 王春雷

目的 探討2型糖尿病合并腦梗死患者血清內(nèi)脂素水平及臨床意義。方法 共選取研究對象116名，用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定血清內(nèi)脂素水平以及同型半胱氨酸(HCY)、C反應(yīng)蛋白(CRP)水平。全自動生化儀測定空腹血糖(FPG)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(T-ch)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、血尿酸(UA)等生化指標，高壓液相法測定糖化血紅蛋白(HbA1c)。結(jié)果 2型糖尿病合并腦梗死組血清內(nèi)脂素水平較正常對照組明顯升高。其中HCY和CRP升高的2型糖尿病組血清內(nèi)脂素水平較HCY和CRP正常的2型糖尿病合并腦梗死組明顯升高，內(nèi)脂素與HCY和CRP均呈正相關(guān)。結(jié)論 內(nèi)脂素與HCY和CRP呈正相關(guān)，并且是導致動脈粥樣硬化的重要因素。

2型糖尿病；腦梗死；內(nèi)脂素；HCY；CRP

內(nèi)脂素是近年來新發(fā)現(xiàn)的一種脂肪細胞因子，具有降糖、降脂和促炎的作用。目前認為，肥胖、DM和動脈粥樣硬化均屬于慢性低度的炎性疾病，但內(nèi)脂素具體作用機制還有待于進一步闡明。本研究收集正常人群、2型糖尿病和2型糖尿病合并腦梗死患者的一般資料，觀察其生化、糖化血紅蛋白及血清內(nèi)脂素等指標變化，分析2型糖尿病合并腦梗死患者血清內(nèi)脂素的水平及臨床意義，為進一步研究內(nèi)脂素的分子機制和作用機制提供依據(jù)，也為內(nèi)脂素的臨床應(yīng)用和糖尿病并發(fā)癥的防治提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 入選標準：⑴健康對照組：20例，均是來自我院體檢中心的健康體檢者，無糖尿病家族史；⑵2型糖尿病合并腦梗死組：96例，經(jīng)CT證實存在腦梗死，并經(jīng)TCD、MRI或CTA證實有動脈粥樣硬化性狹窄。所有入選者均為黑龍江省漢族人，年齡、性別相匹配，BM I<25kg／m2。

排除標準：排除近期嚴重的心、肝、腎、腦及肺功能不全者；感染、出血、惡性腫瘤和其他內(nèi)分泌疾??；近期服用過影響糖脂代謝藥物者。

1.2 研究方法 以上所有入選者均需隔夜空腹10h后采集靜脈血，用血清分離管收集血標本，凝結(jié)30m in后立即離心，1000 r/m in，離心15m in后分離出血清，用全自動生化分析儀測定血脂、空腹血糖、血尿酸等生化指標；將剩余的血清倒入EP管中封好，置于-20℃冰箱中保存。同時記錄入選者的身高、體重、家族史等一般資料。 酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測血清內(nèi)脂素、HCY、 CRP水平。以上試劑盒購自美國R&D公司。

1.3 統(tǒng)計學方法 應(yīng)用SPSS15.0軟件，計量資料以均數(shù)±標準差（）描述，兩組間比較采用t檢驗，以多元回歸分析內(nèi)脂素與各影響因素之間的相關(guān)性。P<0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 2型糖尿病合并腦梗死組和正常對照組兩組間單變量分析 從表1可以看出，兩組間年齡、BM I、T-ch、HDL-C、FPG等指標皆無統(tǒng)計學意義。2型糖尿病合并腦梗死組內(nèi)脂素、TG、HCY和CRP水平較正常對照組明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 病例組和對照組單變量的t檢驗：均數(shù)±標準差

2.2 2型糖尿病合并腦梗死組組內(nèi)單變量分析

2.2.1 根據(jù)血清HCY水平將2型糖尿病合并腦梗死組分成HCY正常的2型糖尿病合并腦梗死組和HCY升高的2型糖尿病合并腦梗死組。結(jié)果后者的血清內(nèi)脂素、CRP、TG、LDL-C和UA水平較前者明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義 (P< 0.05 )。兩組間年齡、T-ch、HDL-C、FPG和HbA 1C等指標比較差異均無統(tǒng)計學意義，見表2。

表2 H cy升高的病例組和H cy正常的病例組單變量的t檢驗 (均數(shù)±標準差)

2.2.2 根據(jù)血清CRP水平將2型糖尿病合并腦梗死組分成CRP正常的2型糖尿病合并腦梗死組和CRP升高的2型糖尿病合并腦梗死組。結(jié)果后者的血清內(nèi)脂素、HCY、TG、LDL-C和UA水平較前者明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。兩組間年齡、T-ch、HDL-C、FPG和HbA 1C等指標比較差異均無統(tǒng)計學意義，見表3。

表3 CRP升高的病例組和CRP正常的病例組單變量的t檢驗（均數(shù)±標準差）

2.3 多因素分析

2.3.1 內(nèi)脂素的多因素分析：以內(nèi)脂素為因變量，年齡、BM I、FPG、T-ch、HDL-C、LDL-C、TG、UA和HbA 1c為自變量進行多元線性回歸分析。結(jié)果顯示，內(nèi)脂素與HCY和CRP呈正相關(guān)，說明HCY和CRP可以影響內(nèi)脂素的生成；而內(nèi)脂素與其它指標皆不相關(guān)，見表4。

2.3.2 HCY和CPR的多因素分析：以甘油三酯為因變量，年齡、BM I、FPG、T-ch、HDL-C、LDL-C、UA、H bA 1c和內(nèi)脂素為自變量進行多元線性回歸分析。結(jié)果顯示，內(nèi)脂素、T-ch 和LDL-C進入回歸方程，即內(nèi)脂素影響了HCY和CRP的生成。見表5和表6。

表4 內(nèi)脂素的多因素分析的回歸系數(shù)及P值

表5 同型半胱氨酸的多因素分析的回歸系數(shù)及P值

表6 CRP的多因素分析的回歸系數(shù)及P值

2.4 相關(guān)性分析 以上統(tǒng)計結(jié)果顯示，內(nèi)脂素與HCY和CRP呈正相關(guān)，有統(tǒng)計學意義(r=0.7497，P=0.0249；r=0.6182，P=0.0327），而與其它指標皆不相關(guān)。HCY和CRP與內(nèi)脂素、TG、T-ch 和LDL-C呈正相關(guān)，而與其它指標不相關(guān)。

3 討論

本研究證實，2型糖尿病患者血清內(nèi)脂素水平高于正常對照者，循環(huán)血中脂質(zhì)的異位過度沉積具有脂毒性，可導致許多組織細胞或臟器的脂肪變性，如脂肪肝、動脈硬化等。Dah l等[1]研究頸動脈不穩(wěn)定粥樣硬化病變中發(fā)現(xiàn)氧化的低密度脂蛋白等增加,由此上調(diào)了人單核細胞中THP-1單核細胞中visfatin的表達；而且visfatin和不穩(wěn)定斑塊損害之間的關(guān)系同樣存在于冠狀動脈粥樣硬化性心臟病患者中。提示visfatin可能在斑塊失穩(wěn)定性中發(fā)揮一定作用。Mon talescot等[2]研究發(fā)現(xiàn)，游離脂肪酸能顯著抑制3T3-L1脂肪細胞visfatin m RNA 表達水平，并首次發(fā)現(xiàn)油酸和棕櫚酸的這種抑制作用最高分別達44%與47%。

Fukuhara等[3]發(fā)現(xiàn)血漿visfatin水平與內(nèi)臟脂肪含量呈正相關(guān)，與皮下脂肪含量關(guān)系不大。動物實驗發(fā)現(xiàn)肥胖的2型糖尿病小鼠在體重迅速增加的同時伴有內(nèi)脂素水平的明顯增加，而皮下脂肪中的內(nèi)脂素表達無變化。以上研究不但說明肥胖患者體內(nèi)visfatin水平升高而且肥胖還和血清visfatin的表達密切相關(guān)。而Pagano等[4]的研究結(jié)果與上述研究相反，發(fā)現(xiàn)肥胖患者內(nèi)脂素水平下降，Rongvaux等[5]在中國人群的研究中也得到同樣的結(jié)果。而Berndt等[6]研究發(fā)現(xiàn)血漿visfatin濃度與內(nèi)臟脂肪量無明顯相關(guān)性，但是與內(nèi)臟visfatin m RNA表達水平、體重指數(shù)、體脂指數(shù)呈正相關(guān)，與皮下脂肪visfatin mRNA表達水平呈負相關(guān)。Sam al[7]等在實驗中發(fā)現(xiàn)，visfatin與腰臀比呈正相關(guān),同時腰臀比是血漿visfatin水平的獨立相關(guān)因素，而與體重指數(shù)無關(guān)。國內(nèi)研究發(fā)現(xiàn)，WH tR與初診2型糖尿病患者血漿visfatin水平呈明顯正相關(guān)，同時是血漿visfatin水平的獨立相關(guān)因素。以上研究均提示visfatin與內(nèi)臟脂肪之間存在緊密聯(lián)系。

研究表明，內(nèi)脂素參與動脈粥樣硬化的形成，其機制可能與缺氧、易損斑塊破裂、內(nèi)皮功能紊亂、血管增生、炎癥和糖脂代謝紊亂等有關(guān)。內(nèi)脂素能促進脂肪組織的分化與合成，參與脂肪細胞周期的調(diào)節(jié)；抑制中心粒細胞的凋亡，增加黏附因子的表達，促進血管炎癥反應(yīng)；調(diào)節(jié)NAD依賴的蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶活性，促進血管平滑肌細胞成熟。此外，內(nèi)脂素主要來源于巨噬細胞，巨噬細胞是參與炎癥反應(yīng)的主要細胞之一，故認為內(nèi)脂素很可能是一個重要的促炎癥因子參與動脈粥樣硬化的形成。近年來有研究發(fā)現(xiàn)，內(nèi)脂素有一定預測動脈粥樣硬化嚴重程度的作用，急性心肌梗死患者破裂斑塊局部表現(xiàn)出更顯著的內(nèi)脂素免疫染色，提示內(nèi)脂素可能介導了動脈粥樣硬化的形成及斑塊穩(wěn)定性的降低。在動脈粥樣硬化的病理過程中，炎癥反應(yīng)起著重要作用，許多炎癥因子與心血管事件密切相關(guān)。CRP和HCY是炎癥反應(yīng)的標志物。研究發(fā)現(xiàn)，CRP是心血管事件發(fā)生的獨立預測因子[8]。CRP是一種由細胞因子如IL-6、TNFa等誘導的急性時相反應(yīng)蛋白，是反映進行性炎癥的敏感標志物。HCY是一種含巰基氨基酸,是蛋氨酸代謝的中間產(chǎn)物，其引起動脈粥樣硬化性血管疾病的確切機制尚未完全闡明，有證據(jù)提示，Hcy可直接或間接損傷血管內(nèi)皮細胞,造成血管內(nèi)皮細胞功能障礙、促進平滑肌細胞增殖,改變血液凝固狀態(tài)及血小板功能等多方面機制而引起血管疾病。HCY可上調(diào)黏附因子的表達，促進血管內(nèi)皮細胞增生，與動脈粥樣硬化的形成和發(fā)展有較強的相關(guān)性。HCY可損傷內(nèi)皮細胞使其修復延遲；激活炎性細胞如單核巨噬細胞、中性粒細胞和內(nèi)皮細胞，使炎癥因子釋放增多；同時通過氧化應(yīng)激作用促進動脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展[9]。本研究結(jié)果顯示，2型糖尿病合并腦梗死患者的血漿內(nèi)脂素、CRP和HCY水平較對照組明顯升高，與曾經(jīng)的報道[9]內(nèi)脂素在腦梗死患者中表達增加相一致，提示血漿內(nèi)脂素水平升高可能是動脈粥樣硬化的一項新的預測指標，同時也證實了炎癥因子CRP、HCY與冠心病密切相關(guān)。2型糖尿病合并腦梗死患者隨著病變程度的加重，血漿內(nèi)脂素、CRP和HCY水平明顯升高，提示上述指標的水平變化反映了動脈粥樣硬化病變的嚴重程度。相關(guān)分析顯示，血漿內(nèi)脂素水平與腦梗死的危險因素（如BM I、FPG、TG、LDL-C等）呈明顯正相關(guān)。

綜上所述，細胞因子內(nèi)脂素與炎癥因子CRP、HCY共同參與或介導了動脈粥樣硬化的形成，對2型糖尿病合并腦梗死的發(fā)生和發(fā)展起著重要的作用。血漿內(nèi)脂素、CRP和HCY水平可以預測動脈病變的嚴重程度。血漿內(nèi)脂素水平變化可作為動脈粥樣硬化的一項新的預測指標，為心腦血管疾病的臨床篩查、早期診斷和病變評估提供一定的理論依據(jù)。

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O bjective To study the Type 2 diabetic patients w ith cerebral infarction visfatin levels and clinical signi fi cance. Methods 116 subjects were selected.Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) in serum visfatin levels, same-sex cysteine (HCY) and C-reactive protein (CRP). Automatic biochem ical analyzer fasting plasma glucose (FPG), triglyceride (TG), total cholesterol (T-ch), high density lipoprotein cholesterol (HDL-C), low density lipoprotein cholesterol (LDL-C), uric acid (UA).measured in HPLC determ ination of glycosylated hemoglobin (HbA 1c). Results Cerebral infarction in type 2 diabetes serum visfatin levels were signi fi cantly higher than the normal control. HCY and CRP elevated serum levels of type 2 diabetes was signi fi cantly higher than HCY and CRP levels normal cerebral infarction in type 2 diabetes. Visfatin with HCY and CRP were positively correlated.Conclusion Visfatin w ith HCY and CRP were positively correlated, and lead to an important factor in atherosclerosis.

Type 2 diabetes; Cerebral infarction; Visfatin; HCY; CRP

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10.3969/j.issn.1009-4393.2012.26.001

150000 哈爾濱醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院內(nèi)分泌科 （朵慧敏梁瑋 張眾 王春雷）

王春雷 E-mail:oems@qq.com