慢性乙肝病毒感染者血清血管內(nèi)皮生長因子的研究

宋向芹 司秀文 張 芳 趙延婷

濱州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科 (山東濱州，256603)

慢性乙型肝炎 (CHB)是由乙型肝炎病毒 (HBV)感染而引起的一種傳染性疾病。我國是HBV感染高發(fā)地區(qū)，其中一部分患者逐漸發(fā)展為肝纖維化，25%～40%的肝纖維化患者最終發(fā)展為肝硬化乃至肝癌。肝炎、肝纖維化、肝硬化、肝癌的形成是一個(gè)多因素多細(xì)胞參與的復(fù)雜過程，其涉及多種細(xì)胞因子的改變。細(xì)胞因子對肝臟疾病的作用越來越受到關(guān)注，其血清學(xué)標(biāo)志物可能是HBV病情進(jìn)展的潛在的標(biāo)志物［1］。多項(xiàng)研究表明血管內(nèi)皮生長因子 (Vascular endothelial growth factor，VEGF)在肝臟相關(guān)疾病發(fā)生發(fā)展中起著重要作用［2，3］，但有關(guān)VEGF在HBV相關(guān)肝病患者血清中的表達(dá)變化研究較少。為探討VEGF在乙型肝炎相關(guān)肝病患者血清中的動(dòng)態(tài)變化及其意義，筆者作了相關(guān)的研究。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2010年7月-2011年12月，選擇正常對照組43例，年齡25～60歲，為我院健康體檢合格人員，無心、肺、肝、腎等重要臟器疾病，肝腎功能等血清學(xué)指標(biāo)檢查正常。慢性乙型肝炎40例，肝纖維化36例，肝硬化40例，肝細(xì)胞癌50例，診斷均符合2010年版中國慢性乙型肝炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)［4］。

1.2 主要試劑和方法 抽取住院的各種肝病患者及健康查體者清晨空腹靜脈血5ml，分別注入兩個(gè)促凝試管中，分離血清，避免溶血、脂血標(biāo)本，1管用于當(dāng)日測定 AST、ALT、GGT、HBsAg;另一管血清分別按1次用量分裝于數(shù)支離心管中，編號(hào)、密封，凍存于-80℃，集中測定VEGF。血清可溶性VEGF檢測采用雙抗體夾心ELISA法;血清ALT、AST、GGT采用OLYPUS 2700全自動(dòng)生化分析儀檢測。以上均嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)化操作程序進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS.V13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。計(jì)量數(shù)據(jù)用(±s)表示，兩組間比較用t檢驗(yàn)，兩組數(shù)據(jù)間相關(guān)關(guān)系用直線相關(guān)分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組人員血清VEGF水平 見表1。

表1 各組人員血清 VEGF水平比較 (±s，ng/L)

表1 各組人員血清 VEGF水平比較 (±s，ng/L)

組間比較，P均＜0.05

組別n VEGF慢性乙型肝炎組40 59.3 ±29.12肝炎肝纖維化組 36 106.5 ±40.7肝炎肝硬化組 40 196.3 ± 50.4肝細(xì)胞肝癌組 50 289.4 ±60.3正常對照組43 20.8 ±8.9

2.2 4 組患者VEGF與AST、ALT及GGT的相關(guān)性 見表2。

表24 組患者VEGF水平與AST、ALT、GGT相關(guān)性比較(±s)

表24 組患者VEGF水平與AST、ALT、GGT相關(guān)性比較(±s)

組別n VEGF GGT ALT AST慢性乙型肝炎組 40 59.3±29.1 65.2 ±7.8 272.8 ±80.8 178.9 ±69.8肝炎肝纖維化組 36 106.5±40.7 123.3 ±20.9 255.7 ±52.3 167.9 ±70.9肝炎肝硬化組 40 196.3 ±50.4 234.7 ±40.9 265.7 ±60.8 198.9 ±89.2肝細(xì)胞肝癌組 50 289.4 ±60.3 543.8 ±50.6 298.8 ±70.8 197.6 ±98.5

肝細(xì)胞癌、肝炎肝硬化、肝纖維化和慢性肝炎患者血清VEGF水平與AST、ALT無相關(guān)性，與GGT成正相關(guān) (r=0.337，P ＜0.05)。

2.3 VEGF與GGT聯(lián)合檢測，對肝細(xì)胞癌患者診斷的敏感性和特異性 見表3。

表3 VEGF、GGT聯(lián)合檢測對肝細(xì)胞癌診斷的靈敏性和特異性 (%)

3 討論

我國是乙型病毒性肝炎高發(fā)地區(qū)，部分患者逐漸發(fā)展成肝纖維化、肝硬化甚至肝癌，每年死于乙型肝炎相關(guān)疾病者多達(dá)35萬人，乙型肝炎相關(guān)疾病已成為我國一個(gè)重要的公共健康問題。

VEGF是目前所知最重要的直接作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長因子，可特異性地促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞分裂、增殖和移動(dòng)，增加血管通透性，在血管形成中起重要作用［5］。由于VEGF在原位誘導(dǎo)血管生成，正常人循環(huán)中的VEGF濃度比較低，而在與血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖相關(guān)的生理與病理過程中，VEGF濃度可明顯升高［6］。乙型肝炎相關(guān)肝病進(jìn)展過程中有肝細(xì)胞的損害和再生，而肝再生與VEGF的作用密切相關(guān)，肝再生包括內(nèi)皮細(xì)胞增生、新生血管的生成、肝細(xì)胞的增殖、肝竇的重構(gòu)等復(fù)雜過程，理論上認(rèn)為VEGF會(huì)有波動(dòng)，故研究患者血清VEGF水平能否敏感地反映肝細(xì)胞損傷、壞死和再生程度等具有重要的意義。

目前對于VEGF在肝病中的研究多采用肝組織免疫組化法，而對于血液中的VEGF與慢性肝病關(guān)系的研究報(bào)道較少，同時(shí)VEGF在慢性肝病中的研究結(jié)果不盡相同［7～9］。ALT、AST、GGT是較靈敏的肝功能指標(biāo)［10］，是判斷肝內(nèi)炎性反映活動(dòng)度的可靠指標(biāo)［11］。因此，檢測血液中的VEGF及VEGF、ALT、AST和GGT的聯(lián)合檢測對于進(jìn)一步探討血液中的VEGF在慢性肝病中的作用具有很高的臨床應(yīng)用價(jià)值。本研究通過檢測慢性乙型肝炎、肝纖維化、肝硬化和肝細(xì)胞癌組患者血清VEGF水平，并與正常對照組進(jìn)行比較，各組的VEGF水平高于正常對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＜0.05)，且隨著病情的進(jìn)展，VEGF呈上升趨勢。慢性乙型肝炎向肝纖維化、肝硬化、肝細(xì)胞癌發(fā)展時(shí)，VEGF可能參與了整個(gè)發(fā)展過程。似乎預(yù)示從病毒感染到組織的過度增生到腫瘤形成，血管形成可能起某種推動(dòng)作用。本研究結(jié)果表明VEGF能夠作為慢性肝病患者動(dòng)態(tài)監(jiān)測的指標(biāo)，已有研究證實(shí)VEGF可以作為肝細(xì)胞癌的一種分子標(biāo)志物［12，13］。本文研究表明：VEGF水平與ALT、AST無明顯相關(guān)性;與GGT成正相關(guān)。VEGF與GGT聯(lián)合檢測，可以進(jìn)一步提高對肝細(xì)胞癌患者診斷的靈敏度和特異性。

總之，VEGF與乙型肝炎的發(fā)病、肝細(xì)胞再生、肝組織病變等密切相關(guān)，在肝內(nèi)血管構(gòu)建中有重要的作用。檢測血清中VEGF含量為臨床觀察乙肝患者發(fā)病程度、判斷療效提供了新的工具。由于本研究采用血清標(biāo)本，用夾心ELISA法測定VEGF濃度，與免疫組化法研究組織中的VEGF表達(dá)率相比，檢測血清VEGF不需用手術(shù)標(biāo)本，取血方便，損傷小，又可反復(fù)檢測，在用于慢性乙型肝炎疾病動(dòng)態(tài)進(jìn)展監(jiān)測方面有一定的價(jià)值。

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