植物多糖對淋巴細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)功能影響的研究進(jìn)展

張 媛，尚曉婭，徐春蘭，牛衛(wèi)寧，李 洋，欽傳光

（西北工業(yè)大學(xué)生命學(xué)院，陜西 西安710072）

植物多糖是一類潛在的天然免疫調(diào)節(jié)劑，具有來源廣泛、易被人體接受、對人體無毒無害和價格低廉等優(yōu)點，是近年來國內(nèi)外研究的熱點。目前發(fā)現(xiàn)有明確藥物效應(yīng)的植物多糖有上百種，它們具有調(diào)節(jié)免疫功能、抗腫瘤、抗病毒、抗氧化、抗衰老、降血糖和降血脂等藥理作用[1～6］。植物多糖通過活化巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞，促進(jìn)有絲分裂作用和細(xì)胞因子分泌，增強(qiáng)網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)功能及紅細(xì)胞免疫等途徑達(dá)到調(diào)節(jié)機(jī)體免疫的作用[7～9］。機(jī)體免疫應(yīng)答功能的重要細(xì)胞成分是淋巴細(xì)胞（Lymphocyte），它由淋巴器官產(chǎn)生，按照其發(fā)生、遷移、表面分子和功能不同，分為T細(xì)胞、B細(xì)胞和NK細(xì)胞等亞類，分別介導(dǎo)機(jī)體的細(xì)胞免疫、體液免疫和對腫瘤細(xì)胞和病毒感染細(xì)胞的殺傷作用等免疫學(xué)功能。作者綜述了植物多糖對T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞、LAK細(xì)胞、淋巴細(xì)胞分泌抗體、淋巴細(xì)胞分泌細(xì)胞因子、淋巴細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等方面影響及多糖受體的重要研究進(jìn)展，以期為多糖免疫調(diào)節(jié)作用機(jī)制的研究提供理論依據(jù)，并為多糖類藥物的開發(fā)提供參考。

1 對T、B淋巴細(xì)胞的影響

T淋巴細(xì)胞來源于骨髓的多能干細(xì)胞，是相當(dāng)復(fù)雜的不均一體，能夠不斷地在體內(nèi)更新，在同一時間可以存在于不同發(fā)育階段或功能的亞群。B淋巴細(xì)胞也來源于骨髓多能干細(xì)胞，比T淋巴細(xì)胞體積略大，受到抗原刺激后，會增殖分化出大量漿細(xì)胞，漿細(xì)胞可合成和分泌抗體并在血液中循環(huán)。NK細(xì)胞亦稱自然殺傷細(xì)胞，是一種細(xì)胞質(zhì)中有大顆粒的細(xì)胞，沒有T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞所具有的受體，不會進(jìn)行受體的基因重組，可分泌腫瘤壞死因子，摧毀目標(biāo)細(xì)胞。

1.1 增加T淋巴細(xì)胞的數(shù)量和活性

T淋巴細(xì)胞可介導(dǎo)細(xì)胞免疫應(yīng)答，是淋巴細(xì)胞的主要組分，具有多種生物學(xué)功能，如：直接殺傷靶細(xì)胞、輔助或抑制B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體、對特異性抗原和促有絲分裂原的應(yīng)答反應(yīng)以及產(chǎn)生細(xì)胞因子等。細(xì)胞免疫的效應(yīng)形式主要有兩種：一種是與靶細(xì)胞特異性結(jié)合，破壞靶細(xì)胞膜，直接殺傷靶細(xì)胞；另一種是釋放淋巴因子，最終使免疫效應(yīng)擴(kuò)大和增強(qiáng)。Naira等[10］從心葉青牛膽中提取得到的（1→4）－α－D－葡聚糖（RRI）較容易引起機(jī)體的免疫反應(yīng)，可使T淋巴細(xì)胞數(shù)量增加1倍左右。除此之外，香菇多糖（ASP）能促進(jìn)正常小鼠和環(huán)磷酰胺引起免疫低下小鼠經(jīng)PHA3誘導(dǎo)的T淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)[11］。細(xì)辛多糖（HA）可以顯著促進(jìn)B淋巴細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞增殖，其分離后得到兩種組分HA1和HA2，HA1在小劑量下就可以很明顯地促進(jìn)淋巴細(xì)胞增殖，增殖趨勢呈現(xiàn)“鐘形”，劑量為100 mg·kg－1時效果最好；HA2可以促進(jìn)T、B淋巴細(xì)胞增殖，并具有計量依賴關(guān)系[12］。

1.2 促進(jìn)B淋巴細(xì)胞的發(fā)育、增殖和分化

B淋巴細(xì)胞是免疫系統(tǒng)中產(chǎn)生抗體的細(xì)胞，產(chǎn)生的特異免疫球蛋白能特異性地與抗原結(jié)合，從而發(fā)揮體液性免疫作用。黃芪多糖（APS）可激活小鼠的B淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞[13］。柴胡多糖可通過誘導(dǎo)PTK的磷酸化、PLC和PKC的啟動、膜轉(zhuǎn)移，促進(jìn)各細(xì)胞周期調(diào)節(jié)蛋白激酶的產(chǎn)生，進(jìn)而誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞的增殖成熟[14］。六味地黃多糖CA4－3口服給藥環(huán)磷酰胺處理對小鼠皮細(xì)胞抗體生成反應(yīng)能力低下具有明顯改善作用，體外應(yīng)用可直接促進(jìn)小鼠B淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)，提升脾細(xì)胞產(chǎn)生抗體IgG水平[15］。ASP雖由于分子量巨大而無法透過細(xì)胞膜，但可以通過與B淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞表面的受體TLR結(jié)合而產(chǎn)生免疫活性。ASP與TLR的結(jié)合可能激活促進(jìn)細(xì)胞分裂的蛋白激酶的活性而使得抗體和細(xì)胞分裂素增加[11］。川牛膝多糖對細(xì)胞不具有直接毒性作用，能夠促進(jìn)B淋巴細(xì)胞增殖，增強(qiáng)小鼠NK細(xì)胞的活性，但對T淋巴細(xì)胞的增殖無促進(jìn)作用[16］。

1.3 影響淋巴細(xì)胞的數(shù)量、比例和形態(tài)

T淋巴細(xì)胞根據(jù)細(xì)胞表面表達(dá)的共同受體不同分為CD4＋T細(xì)胞和CD8＋T細(xì)胞亞群。成熟的T淋巴細(xì)胞表面均可表達(dá)CD3分子，因此CD3被認(rèn)為是成熟T淋巴細(xì)胞的重要標(biāo)志。CD8＋T細(xì)胞是特異性細(xì)胞免疫的效應(yīng)細(xì)胞，能通過分泌各種細(xì)胞因子殺死靶細(xì)胞，是機(jī)體抵抗病毒感染的重要組成部分，其數(shù)量減少說明機(jī)體的殺傷作用減弱、抵御和清除細(xì)胞內(nèi)病原能力降低。CD4＋T細(xì)胞可以分泌多種具有免疫活性的細(xì)胞因子，刺激B淋巴細(xì)胞的活化、增殖及產(chǎn)生特異性中和抗體，因此CD4＋T細(xì)胞數(shù)量的減少會導(dǎo)致淋巴因子白介素－2（IL－2）等細(xì)胞因子減少、NK細(xì)胞活性及T淋巴細(xì)胞增殖活性下降，異致機(jī)體非特異性細(xì)胞免疫應(yīng)答反應(yīng)降低。

在醫(yī)學(xué)上，健康人群的CD4＋／CD8＋值在一定范圍內(nèi)波動。臨床上惡性腫瘤、自身免疫性疾病等常伴有T淋巴細(xì)胞亞群的異常。研究表明，云芝多糖具有免疫促進(jìn)作用，能刺激人外周淋巴細(xì)胞從G1期進(jìn)入S期，并 可 使 CD4＋細(xì) 胞 明 顯 增 加、CD4＋／CD8＋值 增大[17］?；鸺疃嗵牵≒FP）可使小鼠胸腺和脾臟指數(shù)顯著增大，促進(jìn)脾細(xì)胞增殖并提高NK細(xì)胞的活性，使CD4＋細(xì)胞數(shù)量增加、CD4＋／CD8＋值增大[18］。陳文英等[19］研究表明，CTX組在14d和21d時雛雞的CD4＋／CD8＋值大于對照組，且均值大于2，即出現(xiàn)CD4＋／CD8＋值倒置，是機(jī)體免疫機(jī)能紊亂的重要特征。但相同條件下，蒲公英多糖（TP）＋CTX可以使雛雞CD4＋／CD8＋值減小，說明TP對CTX導(dǎo)致的免疫機(jī)能紊亂具有良好的調(diào)節(jié)作用。研究還發(fā)現(xiàn)，靈芝多糖（GLPS）可通過間接激活淋巴細(xì)胞中DNA多聚酶而促進(jìn)DNA合成及T淋巴細(xì)胞增殖，從而影響T細(xì)胞亞群的數(shù)量和功能[20］。肖軍軍等[21］也發(fā)現(xiàn)GLPS可引起體外培養(yǎng)的小鼠脾細(xì)胞核DNA、RNA含量增加，細(xì)胞內(nèi)超微結(jié)構(gòu)改變，細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核平均截面積明顯增大，核質(zhì)比下降。

2 對NK細(xì)胞和LAK細(xì)胞的影響

NK細(xì)胞是具有許多胞質(zhì)顆粒的大淋巴細(xì)胞，能夠在無抗原刺激和抗體參加的情況下溶解或殺傷多種病毒感染的細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞，參與免疫調(diào)節(jié)，在機(jī)體抗腫瘤和早期抗病毒以及細(xì)胞內(nèi)寄生菌感染的免疫過程中起重要作用。LAK細(xì)胞即淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞，是外周血淋巴細(xì)胞在體外經(jīng)IL－2激活3～5d而擴(kuò)增成的具有廣譜抗瘤作用的殺傷細(xì)胞，具有抗腫瘤作用，但必須與激活后的IL－2協(xié)同作用才會有免疫增強(qiáng)效果。

2.1 增加NK細(xì)胞的數(shù)量

植物多糖通過增加NK細(xì)胞的數(shù)量來增強(qiáng)機(jī)體免疫。將RRI體外作用于正常淋巴細(xì)胞，于37℃、CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，NK細(xì)胞數(shù)量增至3倍以上[10］。研究水溶性靈芝多糖組分F3對各種免疫細(xì)胞的影響表明，CD16＋、CD56＋、NK細(xì)胞的數(shù)量是對照組的1.5倍，CD14＋單核／巨噬細(xì)胞和CD83＋分枝狀細(xì)胞數(shù)量分別達(dá)到對照組的2.9倍和2.3倍；經(jīng)F3處理后，在效應(yīng)細(xì)胞與目標(biāo)細(xì)胞之比為20∶1時，CD56＋、NK細(xì)胞的細(xì)胞毒性增強(qiáng)31.7%[22］。

能夠增加NK細(xì)胞數(shù)量的多糖還有川牛膝多糖[16］、蘆薈多糖[23］、龍眼肉多糖[24］等。

2.2 激活NK細(xì)胞和LAK細(xì)胞

NK細(xì)胞可以通過多種途徑被活化，包括膜表面的CD3分子和多種細(xì)胞因子。NK細(xì)胞表面具有IL－2親和性受體，因而IL－2可以誘導(dǎo)NK細(xì)胞的增殖，增殖一般在刺激后3～4d開始發(fā)生。油菜花粉多糖能夠促進(jìn)小鼠脾NK細(xì)胞對靶細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用，提高NK細(xì)胞的殺傷活性[25］。PFP能夠促進(jìn)脾淋巴細(xì)胞增殖、提高NK細(xì)胞的活性[18］。APS具有不同程度地提高存活LAK細(xì)胞的體密度、減少壞死，尤其是減小凋亡細(xì)胞體密度的作用。LAK細(xì)胞在進(jìn)攻腫瘤細(xì)胞的過程中會出現(xiàn)自身細(xì)胞死亡的現(xiàn)象，其主要形式是壞死。APS在LAK細(xì)胞攻擊Hela細(xì)胞的過程中可以保護(hù)LAK細(xì)胞，以免除外界因素（其中包括Hela細(xì)胞核、LAK細(xì)胞本身在免疫攻擊過程中發(fā)生壞死時釋放的各種介質(zhì)及細(xì)胞因子）對LAK細(xì)胞凋亡程序的影響[26］。枸杞多糖（LBP）體內(nèi)應(yīng)用可顯著增強(qiáng)LAK細(xì)胞的活性，促進(jìn)淋巴細(xì)胞增殖，提升抗體水平，從而起到免疫調(diào)節(jié)作用[27］。

3 對淋巴細(xì)胞分泌抗體的影響

抗體是介導(dǎo)體液免疫的重要效應(yīng)分子，是B淋巴細(xì)胞接受抗原刺激后分化為漿細(xì)胞所產(chǎn)生的糖蛋白，主要存在于血清等體液中，能與相應(yīng)抗原特異性地結(jié)合，顯示免疫功能。CA4－3可提高B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體IgG的水平，增加脾細(xì)胞中分泌抗體IgG細(xì)胞的數(shù)量，提示CA4－3具有促進(jìn)B淋巴細(xì)胞分化進(jìn)而生成抗體的作用[15］。大量的研究表明，中藥多糖可以提升淋巴細(xì)胞分泌抗體的水平，如甘薯多糖（PSPP）刺激小鼠，能使小鼠血清中產(chǎn)生的特異性IgG的濃度升高[28］；PFP能促進(jìn)小鼠血清溶血素的形成，各給藥組小鼠體內(nèi)抗體水平均高于對照組[18］；硫酸化枸杞多糖能促進(jìn)外周血淋巴細(xì)胞增殖，提高血清中抗體水平[29］。

4 對淋巴細(xì)胞分泌細(xì)胞因子的影響

細(xì)胞因子通過細(xì)胞表面的相應(yīng)受體發(fā)揮生物學(xué)作用。細(xì)胞因子的生物活性包括抗菌作用、抗病毒作用，調(diào)節(jié)適應(yīng)性免疫反應(yīng)等。IFN－γ可以抵抗病毒感染、干擾病毒復(fù)制，并且還有抗重力、免疫調(diào)節(jié)、控制細(xì)胞增殖的能力。IL－2是T淋巴細(xì)胞輔助細(xì)胞分泌產(chǎn)生的，可以促進(jìn)T淋巴細(xì)胞增殖，增強(qiáng)機(jī)體免疫能力，還可以激活NK細(xì)胞、誘導(dǎo)LAK等殺傷細(xì)胞的分化和效應(yīng)能力。細(xì)胞因子之間可以通過相互誘生和協(xié)同作用而發(fā)揮更強(qiáng)的免疫功能。

4.1 對白細(xì)胞介素的作用

目前共發(fā)現(xiàn)31種白細(xì)胞介素（IL），分別命名為IL1～I(xiàn)L31。植物多糖能促進(jìn)IL的生成。毛花獼猴桃根多糖及其純化后的4種組分可以明顯抑制荷瘤小鼠體內(nèi)腫瘤的生長，促進(jìn)淋巴細(xì)胞增殖，活化NK細(xì)胞，顯著提高細(xì)胞因子IL－2和IFN－γ的水平，并增加血清中特 異 性 抗 體 的 含 量[30］。PFP 提 高 了IL－2 的 水平[16］。當(dāng)歸多糖、板藍(lán)根多糖和刺五加多糖等均能促進(jìn)淋巴細(xì)胞分泌IL－2[31～33］。

4.2 促進(jìn)干擾素生成

干擾素是最先發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞因子，具有抗病毒、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、控制細(xì)胞增殖等重要作用，分為α、β、γ型。APS具有廣泛的免疫活性，可以通過提升臟器指數(shù)、促進(jìn)淋巴細(xì)胞增殖等方式來增強(qiáng)機(jī)體免疫能力。與對照組相比，高、中、低三個劑量組小鼠細(xì)胞分泌IFN－γ的量均有明顯提高（P＜0.05），并呈現(xiàn)計量依賴性[34］。小鼠給藥高（10mg·kg－1）、中（5mg·kg－1）、低（1mg·kg－1）劑量的 ASP后，相對脾臟和淋巴質(zhì)量增加，可以觀察到DTH反應(yīng)和巨噬細(xì)胞的吞噬作用，腫瘤形成率降低，TNF－α、IFN－γ水平升高[11］。當(dāng)歸多糖能夠活化巨噬細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞，可能通過促進(jìn)細(xì)胞因子IL－2、IFN－γ的分泌而發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用[31］。板藍(lán)根多糖在體外顯著促進(jìn)ConA誘導(dǎo)的豬脾臟淋巴細(xì)胞分泌IFN－γ，但抑制IL－2的分泌[32］。

5 多糖受體的研究

目前，多糖類藥物已經(jīng)逐步用于臨床治療，但具體的作用機(jī)制不明確，只能用于輔助治療。多糖結(jié)構(gòu)的多樣性和復(fù)雜性決定了多糖受體的研究比較困難。但受體的研究具有很重要的意義，尤其在受體蛋白表達(dá)與腫瘤發(fā)生關(guān)系及其治療、自身免疫性疾病診斷及治療等方面，受體研究的進(jìn)步將給人類許多疾病的預(yù)防和治療帶來更多有效途徑。天然多糖受體的研究方法主要包括受體－配體結(jié)合法、通過受體突變體的研究方法、利用受體的抗體干擾或者受體抑制劑的方法、利用已知受體結(jié)構(gòu)類似物進(jìn)行干擾的方法等。迄今為止，研究者發(fā)現(xiàn)的多糖受體有3種：TLRs、mIg復(fù)合受體和CR3（補(bǔ)體Ⅲ型受體）。

5.1 TLR2與TLR4

TLRs作為典型的模式識別受體（Pattern recognition receptor，PRR）可以識別病原相關(guān)的分子模式[34］。天然來源的多糖能夠通過TLR4、TLR2介導(dǎo)多種免疫細(xì)胞激活細(xì)胞內(nèi)信號通路，活化轉(zhuǎn)錄，促進(jìn)細(xì)胞因子的釋放，從而發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用。然而，在細(xì)胞增殖試驗中，GLPS無法激活有一個突變的TLR4分子（無信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的能力）的小鼠脾臟B淋巴細(xì)胞。這是因為，抗小鼠TLR4單克隆抗體 （Ab）抑制GLPS刺激下的BALB／c鼠B淋巴細(xì)胞的增殖?？剐∈骉LR4和抗免疫球蛋白 （Ig）的抗體組，幾乎完全抑制GLPS誘導(dǎo)引起的B淋巴細(xì)胞增殖，這意味著膜Ig和TLR4需要GLPS介導(dǎo)B淋巴細(xì)胞激活[35］。Zanoni等[36］研究發(fā)現(xiàn)，TLR4＋的小鼠樹突細(xì)胞經(jīng)過脂多糖（LPS）刺激后顯著升高，而 CD4＋小鼠樹突細(xì)胞經(jīng)過LPS刺激后沒有變化，由此推斷，LPS誘發(fā)樹突細(xì)胞升高是由 CD4＋細(xì)胞接受的，CD14作為TLR4的共受體，在接受抗原刺激過程中起重要作用。

5.2 mIg復(fù)合受體

B淋巴細(xì)胞表面有大量的mIg受體，與CD19、CD79b形成mIg復(fù)合受體，用于調(diào)節(jié)B淋巴細(xì)胞活化。Han等[37］研究發(fā)現(xiàn)，刺五加多糖通過膜表面的mIg與CD19和CD79b形成的復(fù)合受體而特異性激活小鼠脾臟B淋巴細(xì)胞。莢膜黃芪多糖通過mIg誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞的增殖活性[13］。

5.3 CR3（補(bǔ)體Ⅲ型受體）

CR3受體，又稱cdⅡ／cd18，是iC3b的特異受體。Vetvicka等[38］對酵母多糖與CR3受體的凝集素結(jié)合位點進(jìn)行了研究，在加入多糖前用抗CR3抗體處理淋巴細(xì)胞，能阻止受體的激活，在加入多糖后再加入抗CR3抗體，能阻止激活的CR3受體與iC3b靶細(xì)胞的結(jié)合。多糖與受體結(jié)合后受體構(gòu)型發(fā)生改變，從而調(diào)節(jié)iC3b調(diào)理靶細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用，但此受體的激活需要酪氨酸激酶，并且在受體I－結(jié)構(gòu)域有一個Mg2＋依賴的形變。

6 對淋巴細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的影響

6.1 對Ca2＋轉(zhuǎn)導(dǎo)的影響

Ca2＋是一種重要的信使分子，對淋巴細(xì)胞功能有重要作用，如調(diào)節(jié)淋巴細(xì)胞的分裂、介導(dǎo)巨噬細(xì)胞的吞噬作用等。Lichtman等[39］報道細(xì)胞內(nèi)升高是活化淋巴細(xì)胞的必要條件。細(xì)胞內(nèi)有促進(jìn)IL－2基因表達(dá)的作用，而IL－2對淋巴細(xì)胞增殖是必須的[40］。APS能計量依賴性提高淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率和細(xì)胞內(nèi) NO濃度。山豆根多糖（SSP1）通過調(diào)節(jié)蛋白激酶C和細(xì)胞內(nèi)游離鈣水平，活化T淋巴細(xì)胞并釋放NO、分泌IFN－γ；苯地平是Ca2＋阻斷劑，可以抑制SSP1激活T淋巴細(xì)胞，表明Ca2＋是活化T淋巴細(xì)胞的影響因素[41］。銀耳多糖在一定劑量范圍內(nèi)可劑量依賴性提高脾淋巴細(xì)胞內(nèi)游離Ca2＋濃度，并與ConA有協(xié)同作用，Ca通道阻斷劑可阻斷這一作用[42］。GLPS也可以通過類似機(jī)制引起小鼠T淋巴細(xì)胞升高[43］。

6.2 對NO轉(zhuǎn)導(dǎo)的影響

NO也是一種重要的信使分子，由淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞等產(chǎn)生。在傳遞神經(jīng)信息和調(diào)節(jié)免疫功能等方面具有重要生物學(xué)功能，可以殺滅微生物和腫瘤細(xì)胞，增強(qiáng)機(jī)體非特異性免疫功能，對T淋巴細(xì)胞、核巨噬細(xì)胞的細(xì)胞因子分泌有調(diào)節(jié)作用并影響到T淋巴細(xì)胞的增殖。Kosonen等[44］報道NO供體藥物Oxatriazole通過產(chǎn)生NO抑制有絲分裂原誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞的增殖反應(yīng)。但Liew[45］和Badovinac等[46］研究發(fā)現(xiàn)，NO在低濃度下刺激淋巴細(xì)胞增殖，而在高濃度下抑制淋巴細(xì)胞增殖，表明NO對淋巴細(xì)胞增殖的作用與濃度相關(guān)。

植物多糖影響淋巴細(xì)胞中NO含量已有大量報道。低劑量板藍(lán)根多糖可促進(jìn)體外培養(yǎng)的豬脾淋巴細(xì)胞分泌NO，而高劑量板藍(lán)根多糖抑制NO的分泌[32］。此外，白術(shù)多糖可以提升仔豬外周血淋巴細(xì)胞產(chǎn)生NO的水平[47］，APS可能通過NO合成酶基因的表達(dá)進(jìn)而提高NO合成酶的活性來促進(jìn)小鼠脾淋巴細(xì)胞NO的合成，并具有劑量依賴性[48］。

6.3 對cAMP和cGMP信息系統(tǒng)的影響

cAMP和cGMP是細(xì)胞內(nèi)重要的第二信使，對機(jī)體免疫功能具有重要的作用。cAMP介導(dǎo)免疫抑制效應(yīng)，淋巴細(xì)胞內(nèi)cAMP濃度升高，抑制淋巴細(xì)胞增殖和IL－2的合成。cGMP的作用與cAMP相反，能促進(jìn)淋巴細(xì)胞增殖，cAMP／cGMP值對淋巴細(xì)胞的免疫效應(yīng)起決定性作用。許多中藥提取多糖都可以影響淋巴細(xì)胞cAMP和cGMP的含量，從而調(diào)節(jié)淋巴細(xì)胞的免疫功能。白術(shù)多糖可以使仔豬外周血淋巴細(xì)胞中cAMP的濃度顯著升高（P＜0.5），ASP能夠提高小鼠血漿脾臟和胸腺中cGMP含量，降低脾臟和胸腺中cAMP含 量[47，11］。APS 可 引 起 小 鼠 淋 巴 細(xì) 胞 內(nèi)cGMP濃度快速升高，并顯著降低cAMP的濃度從而降低cAMP／cGMP值[48］。

植物多糖對cAMP的影響受時間限制。研究發(fā)現(xiàn)，APS能夠提高cAMP濃度，但同時能促進(jìn)淋巴細(xì)胞增殖，且APS對cAMP的影響有時間依賴性，當(dāng)作用時間為60min時，對淋巴細(xì)胞內(nèi)cAMP濃度沒有影響[49］。李 明 春 等[50］和 張 欣 等[51］分 別 發(fā) 現(xiàn) GLPS 和LBP對小鼠cAMP濃度的提高作用是短暫的，在30～60min內(nèi)恢復(fù)基礎(chǔ)水平。

7 不同信號分子的相互作用及其對免疫功能的調(diào)節(jié)

NO和cGMP關(guān)系表現(xiàn)在：NO是細(xì)胞間信息傳遞的重要調(diào)節(jié)因子，能激活各種靶分子。激活其受體蛋白sGC，提高cGMP水平是NO許多生理功能的主要信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制。APS可促進(jìn)小鼠脾淋巴細(xì)胞NO的生成，通過NO－cGMP信號系統(tǒng)發(fā)揮其免疫作用。

NO與cAMP關(guān)系表現(xiàn)在：cAMP對細(xì)胞產(chǎn)生NO及NOs活性具有重要的調(diào)控作用。Pahan等[52］研究發(fā)現(xiàn)，cAMP升高物Forskolin可通過激活PKA進(jìn)而激活NF－kB因子，促進(jìn)iNOs基因的表達(dá)和NO生成。Benbernou等[53］研究表明，在Jurkat T細(xì)胞，可可豆堿及前列腺素E等通過cAMP介導(dǎo)的途徑使IL－4、IL－10 合 成 增 加、IFN－γ 合 成 下 降，同 時 促 進(jìn)iNOsmRNA的表達(dá)，而用硝普鈉提供外源NO也有相同的作用。說明T淋巴細(xì)胞中通過cAMP－PKA途徑介導(dǎo)細(xì)胞因子的增加。但也有報道表明T淋巴細(xì)胞不能合成NO，而是由B淋巴細(xì)胞來完成，這還有待進(jìn)一步研究[54］。

NO與干擾素和IL的關(guān)系表現(xiàn)在：IL－2是T淋巴細(xì)胞輔助細(xì)胞分泌產(chǎn)生的，它能夠促進(jìn)T淋巴細(xì)胞增殖，提高機(jī)體免疫功能，還可激活 NK細(xì)胞，誘導(dǎo)CTL、LAK等殺傷細(xì)胞的分化和效應(yīng)功能，以達(dá)到殺傷腫瘤細(xì)胞的目的。上述細(xì)胞因子還可以通過互相誘生和協(xié)同作用而發(fā)揮更強(qiáng)的抗腫瘤作用。激活的T淋巴細(xì)胞，如小鼠的Th2細(xì)胞、人類未致敏的和記憶CD4＋或CD8＋淋巴細(xì)胞及某些B淋巴細(xì)胞株可以釋放IL－13，后者通過抑制巨噬細(xì)胞iNOsmRNA及蛋白的合成，使NO的釋放減少。此外有研究表明，脂多糖可以刺激小鼠巨噬細(xì)胞釋放IL－10和IL－12，而IL－12又參與Th1淋巴細(xì)胞的分化。淋巴細(xì)胞釋放的細(xì)胞因子和巨噬細(xì)胞釋放的細(xì)胞因子，通過細(xì)胞間的交互作用從而達(dá)到影響免疫的功能[54］。

8 結(jié)語

免疫調(diào)節(jié)作用是植物多糖最重要的生物活性，植物多糖主要通過激活T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞和補(bǔ)體系統(tǒng)，刺激巨噬細(xì)胞產(chǎn)生IL－1、IL－2、IL－12、IL－18、腫瘤壞死因子和干擾素等細(xì)胞因子而發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用，多糖藥物作為信號分子調(diào)控體內(nèi)生理和生化反應(yīng)，增強(qiáng)機(jī)體免疫能力。因此植物多糖有望開發(fā)成為一類新型的天然免疫調(diào)節(jié)劑，我國因為資源優(yōu)勢更有可能在此方面領(lǐng)先于世界水平。

然而，目前關(guān)于植物多糖免疫調(diào)節(jié)活性的相關(guān)基礎(chǔ)研究仍停留在初級階段，雖然研究表明植物多糖能夠促進(jìn)小鼠脾淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的增殖，但是免疫調(diào)節(jié)作用機(jī)制仍不明確，有待進(jìn)一步深入研究。淋巴細(xì)胞表面的多糖受體和細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制的相關(guān)研究比較少見，并且植物多糖有可能通過淋巴細(xì)胞與其它免疫細(xì)胞的相互作用而發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)活性，這方面的相關(guān)研究報道也較罕見。植物多糖研究目前主要停留在理論和實驗室階段，隨著多糖研究的不斷深入，其作為藥物和保健品將為癌癥及人類自身免疫缺陷等疾病的預(yù)防和治療開辟一條有效的新途徑。

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