丹皮與關(guān)木通配伍減毒作用研究

朱杰華

關(guān)木通為馬兜鈴科植物北馬兜鈴或馬兜風(fēng)鈴的干燥藤莖，是臨床常用的具有較強利尿通淋作用的中藥。關(guān)木通中所含的馬兜鈴酸(Aristolochic acid，AA)的毒副作用是腎毒性。本組采用丹皮與關(guān)木通配伍初步研究了配伍后的關(guān)木通腎毒性變化，為含AA的藥物減毒應(yīng)用提供了理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 色譜條件 色譜柱:依利特Hypersil ODS25(4.6 mm×250 mm，5 cm);流動相:甲醇-冰醋酸=80∶20，流速1 ml/min;柱溫:室溫;檢測波長250 nm;進樣量5 μl。

1.2 對照品溶液 稱取AA對照品0.0027 g，置于10 ml量瓶中，加無水乙醇并稀釋搖勻，0.45 μm微膜過濾，濃度為0.27 mg/ml，備用。

1.3 樣品提取液 關(guān)木通粉末0.6559 g，純化水40 ml，超聲提取30 min，過濾，向殘渣中加入純化水40 ml，超聲提取20 min兩次，合并三次濾液，蒸干，無水乙醇定容至10 ml，過微孔濾膜，備用。

1.4 混合藥物溶液 稱取關(guān)木通粉末0.6 g和丹皮0.6 g倍數(shù)，混合后，加入40(n+1)ml純化水，隨后按1.3操作。

1.5 動物實驗 由廣東省醫(yī)學(xué)實驗動物中心購買SD雌性大鼠60只，體重(170±15)g。隨機分為關(guān)木通組(關(guān)木通單煎液)、配伍組(配伍組煎液)和陰性對照組(飲用水)，各20只，灌胃1次/d，連續(xù)6周后測定大鼠靜脈血腎功能指標(biāo)。

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計學(xué)軟件，計量資料以表示，計數(shù)資料采用χ2檢驗比較，P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 定性鑒別 將對照品及關(guān)木通單煎溶液，按1.1測定。兩圖峰I的保留時間均為5.5 t/min，兩者的特征吸收峰一致，可初步認(rèn)定峰I為AA的吸收峰。

2.2 不同配比丹皮濃度對AA的影響 按上述1.2.3制備混合藥物溶液，按1.1測定。關(guān)木通單煎溶液中AA單位含量為1.41 mg/g;與不同濃度比的丹皮進行混煎，AA單位含量分別為 0.99 mg/g，0.35 mg/g，0.97 mg/g，和 0.56 mg/g，在濃度比為1:1時處于最低含量，減毒效果最佳。

2.3 大鼠腎功能相關(guān)指標(biāo)變化比較 將關(guān)木通與丹皮按1:1配比制備的溶液用于大鼠灌胃，6周后，大鼠腎功能相關(guān)指標(biāo)β2微球蛋白、血肌酐和血尿素氮含量明顯低于單純關(guān)木通溶液灌胃組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);配伍組腎功能相關(guān)指標(biāo)與陰性對照組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05);關(guān)木通組灌胃與陰性對照組相比，腎功能指標(biāo)差異有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.01)。

3 討論

關(guān)木通為馬兜鈴科植物北馬兜鈴或馬兜風(fēng)鈴的干燥藤莖，具有較強利尿通淋作用。關(guān)木通中的主要成分為:馬兜鈴酸A、B和D，馬兜鈴苷，馬兜鈴酸D甲醚，木蘭花堿等。其中AA為主要毒性成分，且含量最大，易致慢性腎功能衰竭［1］。既往對不同中藥與關(guān)木通的配伍減毒作用有較多研究［2］。張巖等研究得出當(dāng)歸、丹皮、生地、熟地、大黃可顯著降低關(guān)木通中馬兜鈴酸A的含量，從而有效減輕關(guān)木通單用的腎毒性作用［3］。黃玉璽等則認(rèn)為關(guān)木通醇提以及配伍生地、甘草并醇提能在減輕或抑制關(guān)木通的腎毒性作用中具有明顯效果［4］。

本組實驗，利用丹皮與關(guān)木通配伍，發(fā)現(xiàn)在二者配比為1∶1時，可以顯著降低關(guān)木通中AA的含量，且動物實驗研究表明，配伍后的溶液能夠明顯抑制或減輕關(guān)木通的腎毒性作用。但是，具體的減毒機制尚需進一步研究。

［1］ 張金蓮，張的鳳，喻松仁.關(guān)木通配伍減毒研究進展.江西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2007，18(6):74-6.

［2］ 周娟娟，潘金火.關(guān)木通研究進展.醫(yī)藥導(dǎo)報，2009，28(5):620-2.

［3］ 張巖，劉養(yǎng)清，趙慧輝.中藥配伍對關(guān)木通中馬兜鈴酸A含量的影響.天津藥學(xué)，2005，17(4):3-6.

［4］ 黃玉璽，歐作英.中藥關(guān)木通腎毒性及抵制其腎毒性的實驗研究.中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志，2001，2(10):566-8.