黃連解毒湯對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化兔血脂水平及血清、斑塊組織hs-CRP含量的影響

符春生，潘江慧 ，張古老，謝家和

（1.韶關(guān)市職業(yè)病防治醫(yī)院康復(fù)科，廣東 韶關(guān) 512026；2.贛南醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院心內(nèi)科，江西 贛州341000；3.南昌大學(xué)研究生院醫(yī)學(xué)部2010級(jí)，南昌330006）

冠狀動(dòng)脈粥樣硬化心臟病已成為危害人類健康最重要疾病之一，其主要病因是動(dòng)脈粥樣硬化（AS）的形成。目前研究認(rèn)為，AS形成的機(jī)制比較復(fù)雜，高脂血癥是其發(fā)生的重要原因，慢性炎癥貫穿其發(fā)展的全過(guò)程[1]。黃連解毒湯是中醫(yī)解毒清熱的名方，具有調(diào)脂﹑抗炎﹑抗免疫作用。本研究旨在探討黃連解毒湯抗AS的作用及其機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 材料

1）動(dòng)物：健康日本雄性大耳白兔24只，體質(zhì)量（2.0±0.2）kg，年齡 6 個(gè)月左右，由贛州畜牧研究所提供。

2）藥品與試劑：黃連、黃柏、黃芩、梔子購(gòu)于贛州醫(yī)藥公司，膽固醇購(gòu)于湖南衡陽(yáng)同仁化工廠，蛋黃粉購(gòu)于安徽合肥康德食品化工廠，豬油購(gòu)于贛州市農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)。高敏C反應(yīng)蛋白（hs－CRP）ELISA試劑盒購(gòu)自上海天呈生物制品有限公司，羊抗兔IgG購(gòu)于武漢博士德生物工程有限公司。

3）主要儀器：日本OLYMPUS公司生產(chǎn)的全自動(dòng)生化分析儀。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1）黃連解毒湯的制備：將黃連、黃柏、黃芩、梔子以 3∶2∶2∶3 的比例煎煮，分 2 次煎煮，第 1 次 60min（并過(guò)濾），第2次30min（并過(guò)濾），合并2次濾液，濃縮至1 g·mL-1，保存4℃冰箱備用。

2）分組與造模：將24只大耳白兔在適應(yīng)性喂養(yǎng)7 d后，按隨機(jī)數(shù)字表法分為3組，即正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、黃連解毒湯組，每組8只。正常對(duì)照組飼普通標(biāo)準(zhǔn)飼料，模型對(duì)照組、黃連解毒湯組先導(dǎo)管球囊損傷兔左側(cè)頸總動(dòng)脈并喂飼高脂飼料（15%蛋黃粉、5%豬油、1%膽固醇、80%基礎(chǔ)飼），每日每只予100 g[1-2]；黃連解毒湯組同時(shí)每天灌胃黃連解毒湯液3mL·kg-1，而正常對(duì)照組、模型對(duì)照組給予等量生理水灌胃。

3）觀察指標(biāo)與檢測(cè)方法：喂養(yǎng)12周后停藥禁食12 h，耳緣靜脈取血10mL，5mL用于做血脂檢測(cè)，檢測(cè)指標(biāo)主要為 TC、TG、LDL-C、HDL-C；5 mL 用ELISA測(cè)定血清hs-CRP含量。同時(shí)用10%烏拉坦耳緣靜脈注射麻醉，分離左頸總動(dòng)脈斑塊組織，采用免疫組織化學(xué)法測(cè)定組織hs-CRP含量，并肉眼觀察頸動(dòng)脈病理學(xué)改變情況。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 血脂水平檢測(cè)結(jié)果

3組間血脂水平比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。模型對(duì)照組﹑黃連解毒湯組血脂水平均顯著高于正常對(duì)照組（P<0.01），黃連解毒湯組血脂水平顯著低于模型對(duì)照組（P<0.01）。 見(jiàn)表 1。

表 1 3 組血脂水平比較 ±s，c/（mmol·L-1）

表 1 3 組血脂水平比較 ±s，c/（mmol·L-1）

*P<0.01與正常對(duì)照組比較；△P<0.01與模型對(duì)照組比較。

組別 n TC TG LDL-C HDL-C正常對(duì)照組 8 1.72±0.86 1.16±0.56 1.06±0.50 0.46±0.21模型對(duì)照組 8 22.08±7.56* 5.67±1.78* 17.01±2.25* 3.12±1.20*黃連解毒湯組 8 8.26±1.89*△ 2.28±0.98*△ 4.05±0.91*△ 5.21±2.09*△

2.2 血清及斑塊組織hs-CRP含量檢測(cè)結(jié)果

3組間血清及斑塊組織hs-CRP含量比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。模型對(duì)照組﹑黃連解毒湯組血清及斑塊組織hs-CRP含量顯著高于正常對(duì)照組（P<0.01），黃連解毒湯組血清及斑塊組織hs-CRP含量顯著低于模型對(duì)照組（P<0.01）。見(jiàn)表2。

表2 3組血清及斑塊組織hs-CRP含量比較 ±s

表2 3組血清及斑塊組織hs-CRP含量比較 ±s

*P<0.01與正常對(duì)照組比較；△P<0.01與模型對(duì)照組比較。

Hs-CRP含量血清 ρ∕(mg·L-1） 斑塊組織∕%正常對(duì)照組 8 0.96±0.42 1.08±0.56模型對(duì)照組 8 21.91±5.02* 45.21±11.12*黃連解毒湯組 8 7.23±4.02*△ 20.06±5.06*△組別 n

2.3 頸動(dòng)脈病理學(xué)改變情況

肉眼可見(jiàn)正常對(duì)照組內(nèi)膜光滑，無(wú)斑塊形成；模型對(duì)照組血管表面粗糙，內(nèi)膜面散在不規(guī)則隆突斑塊，顏色為瓷白色；黃連解毒湯組血管內(nèi)膜隆突斑塊減少，顏色淺黃。

3 討論

目前認(rèn)為多種機(jī)制參與冠狀A(yù)S的發(fā)病，如脂質(zhì)浸潤(rùn)、炎癥反應(yīng)、損傷應(yīng)答等。高脂血癥是其發(fā)生的重要原因，尤其是高LDL-C，它可以激活內(nèi)皮細(xì)胞和單核細(xì)胞，并使單核細(xì)胞吞噬脂質(zhì)形成泡沫細(xì)胞，導(dǎo)致斑塊的形成[3]。同時(shí)A S的發(fā)生是一個(gè)非常復(fù)雜的過(guò)程，慢性炎癥反應(yīng)貫穿A S發(fā)生發(fā)展全過(guò)程。炎癥會(huì)刺激單核細(xì)胞的遷移，平滑肌細(xì)胞的增殖，最終導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化的形成和發(fā)展[4-5]。hs-CRP作為一種急時(shí)相蛋白，不僅可以由肝臟產(chǎn)生，而且可以由AS血管壁中的巨噬細(xì)胞，平滑肌樣細(xì)胞以及脂肪組織產(chǎn)生[6]。目前認(rèn)為hs-CRP不僅是AS的標(biāo)記物，而且是AS的一個(gè)獨(dú)立危險(xiǎn)因素[7]。hs-CRP水平能夠有助于預(yù)測(cè)冠心病患者發(fā)生心肌梗死危險(xiǎn)性以及其預(yù)后情況[8]。黃連解毒湯是中醫(yī)清熱解毒的名方。有報(bào)道稱其有調(diào)脂、抗炎、抗免疫作用，降低動(dòng)脈粥樣硬化大鼠血sICAM-1，sVCAM-1水平，抑制炎癥反應(yīng)，延緩動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)展[9]。相似的研究表明，黃連解毒湯能下調(diào)MCP-1/CCR2mRNA在主動(dòng)脈的表達(dá)，減少局部炎癥反應(yīng)，進(jìn)而減輕對(duì)血管的損害[10]。同樣也有報(bào)道，黃連解毒湯有調(diào)脂功能，其高劑量能有效調(diào)節(jié)高脂血癥大鼠血脂代謝，降低 TC、TG、LDL-C，升高 HDL-C，提高機(jī)體抗氧化能力，抑制動(dòng)脈粥樣硬化形成[11]。

本研究通過(guò)兔頸總動(dòng)脈導(dǎo)管球囊損傷加高脂飲食建立兔AS模型，觀察黃連解毒湯對(duì)AS兔的血脂及血清、斑塊組織炎癥的影響。結(jié)果表明，黃連解毒湯具有降低AS兔的血清總膽固醇、甘油三酯、低密度膽固醇，升高高密度膽固醇的作用；可以減輕血清及斑塊組織的炎癥反應(yīng)，使血清及斑塊組織中的hs-CRP水平表達(dá)下降，減少內(nèi)膜面隆突斑塊形成。綜合上述，黃連解毒湯對(duì)高脂血癥兔具有調(diào)脂，抑制炎癥的進(jìn)程，抗AS發(fā)展的作用。目前臨床上主要用他汀類、貝特類降脂治療冠心?。坏@些藥物長(zhǎng)期服用有較多的不良反應(yīng)；黃連解毒湯作為天然來(lái)源的中藥材有多靶點(diǎn)抗AS且作用緩和、不良反應(yīng)小等優(yōu)勢(shì)。因此，黃連解毒湯對(duì)防治高脂血癥及其相關(guān)疾病具有良好的現(xiàn)實(shí)意義。

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