VEGF-D和VEGFR-3在胃癌淋巴轉(zhuǎn)移中的表達(dá)

朱朝勇 (青海紅十字醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，青海 西寧 810000)

胃癌患者淋巴轉(zhuǎn)移直接影響患者預(yù)后，也是引起患者死亡的主要因素。其中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子-D(VEGF-D)是特異性淋巴管生成因子，與腫瘤淋巴轉(zhuǎn)移關(guān)系較為緊密。VEGF受體-3(VEGFR-3)特異存在于淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞，臨床中常用于標(biāo)記淋巴管，以更好觀(guān)察新生淋巴管情況用于淋巴管計(jì)數(shù)〔1〕。VEGF-D常與VEGFR-3結(jié)合，誘導(dǎo)毛細(xì)淋巴管生長(zhǎng)，引起腫瘤中淋巴管增殖，發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移〔2〕。本文分析 VEGF-D和VEGFR-3與腫瘤轉(zhuǎn)移的關(guān)系，旨在探索胃癌淋巴轉(zhuǎn)移機(jī)制。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇我院2010年4月至2012年4月收治的60例胃癌患者手術(shù)切除標(biāo)本，其中男32例，女28例，年齡25～84〔平均(52.3±2.4)〕歲，所有患者均確診為胃腺癌，其中45例患者有不典型增生，所有患者術(shù)前均未給予其他治療。胃癌和黏膜組織均術(shù)中切除后立即取材，置于－80℃液氮中保存，將病灶和淋巴結(jié)行蘇木精-伊紅(HE)染色病理檢查，并進(jìn)行TNM分期。

1.2 檢測(cè)方法 分別取癌灶、癌旁、正常黏膜組織(同一患者的正常黏膜組織，距癌灶周邊至少5 cm)和部分胃癌標(biāo)本，采用ELISA試劑盒檢測(cè)VEGF-D和VEGFR-3，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作。胃癌組織的VEGF-D和VEGFR-3檢測(cè)值以絕對(duì)表達(dá)水平為主，其中腫瘤與正常黏膜組織檢測(cè)比值為相對(duì)比值(T/N)。

1.3 結(jié)果判定 VEGF-D和VEGFR-3陽(yáng)性物質(zhì)呈棕黃色細(xì)顆粒狀，淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞VEGFR-3染色陽(yáng)性呈棕黃色。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料采用±s表示，計(jì)數(shù)資料使用組間的χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 VEGF-D和VEGFR-3在胃癌組織和正常黏膜組織中的表達(dá) VEGF-D在胃癌組織中表達(dá)低于正常胃黏膜組織，VEGFR-3在胃癌組織中的表達(dá)明顯高于正常黏膜組織(P＜0.05)。見(jiàn)表1。

表1 VEGF-D和VEGFR-3在胃癌組織和正常黏膜組織中的表達(dá)(±s，pg/ml，n=60)

表1 VEGF-D和VEGFR-3在胃癌組織和正常黏膜組織中的表達(dá)(±s，pg/ml，n=60)

與胃癌組織比較:1)P＜0.05

組別VEGF-D VEGFR-3胃癌組織190.5±22.5 2 421.8±157.6正常黏膜組織 234.6±26.71) 1 872.2±244.81)

2.2 VEGF-D和VEGFR-3表達(dá)與胃癌淋巴轉(zhuǎn)移表達(dá)的關(guān)系VEGF-D在胃癌組織中的表達(dá)水平，與患者的組織學(xué)類(lèi)型、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、淋巴結(jié)分期、轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)數(shù)有關(guān)，與腫瘤大小、年齡、浸潤(rùn)深度無(wú)密切關(guān)聯(lián)。VEGFR-3在胃癌組織中表達(dá)，與組織學(xué)類(lèi)型、淋巴結(jié)分期、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，與其他無(wú)密切關(guān)聯(lián)性。見(jiàn)表2。

表2 VEGF-D和VEGFR-3水平與胃癌淋巴轉(zhuǎn)移的關(guān)系(±s，pg/ml)

表2 VEGF-D和VEGFR-3水平與胃癌淋巴轉(zhuǎn)移的關(guān)系(±s，pg/ml)

病理 n VEGF-D VEGF-D≤1＞1VEGFR-3VEGFR-3(T/N)≤1 ＞1腫瘤大小(cm)＜5 37 188.2±28.6 23 14 2 147.7±157.6 18 19≥5 23 264.8±26.9 9 14 2 879.3±245.2 10 13組織學(xué)類(lèi)型分化型 15 112.5±27.4 12 3 1 865.8±754.3 9 6未分化型 45 274.3±35.6 23 24 2 874.2±354.7 22 23年齡(歲)＜65 35 345.8±59.6 19 16 2 365.6±542.3 20 15≥65 25 198.2±54.7 14 11 2 478.8±456.2 10 15浸潤(rùn)深度T1～T2 10 271.5±84.6 8 2 2 305.6±536.7 5 5 T3～T4 50 223.4±49.7 30 20 2 673.5±456.6 27 23淋巴結(jié)分期N0 22 173.6±26.7 18 4 1 924.6±337.8 18 4 N1 16 187.4±35.9 9 7 2 438.7±443.7 4 12 N2 22 208.9±23.8 6 16 2 965.7±358.9 5 17轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)數(shù)0枚 19 183.5±42.7 15 4 1 965.5±257.9 15 4 1～6枚 17 219.3±39.7 8 9 2 732.9±453.3 5 12≥7枚 24 245.5±37.9 9 15 2 624.9±257.6 8 16 TNM分期Ⅰ+Ⅱ 21 147.6±45.9 17 4 1 687.6±249.6 17 4Ⅲ+Ⅳ 39 284.6±33.7 17 22 2 789.3±358.4 9 30淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無(wú) 22 186.3±45.4 18 4 1 886.4±423.7 18 4有 38 253.4±38.5 18 20 2 745.6±386.4 13 25 VEGFR-3≤1 33 29 4＞1 27 5 22

3 討論

胃癌常通過(guò)淋巴轉(zhuǎn)移，腫瘤細(xì)胞能直接浸潤(rùn)病灶周?chē)M織，通過(guò)對(duì)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移進(jìn)行有效評(píng)估，有利于制定治療方案，改善預(yù)后〔3〕。研究發(fā)現(xiàn)，胃癌組織存在大量新生淋巴管、微淋巴管等淋巴組織，腫瘤組織生長(zhǎng)過(guò)度會(huì)破壞淋巴管結(jié)構(gòu)，擠壓淋巴管，使淋巴管數(shù)目減少，引起管腔變窄〔4〕。

VEGFR-3是第一個(gè)被驗(yàn)證為毛細(xì)淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞特異性的標(biāo)志物，VEGFR-3失活后，陽(yáng)性淋巴管會(huì)擴(kuò)大腫瘤周?chē)馨凸?，?dǎo)致腫瘤淋巴管轉(zhuǎn)移〔5〕。VEGFR-3在胃癌早期存在于人體組織和淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞，晚期存在于淋巴管中，在早期血管生成過(guò)程中的作用較明顯;VEGFR-3血管表達(dá)逐漸減少后，僅在淋巴皮內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)。VEGFR-3是 VEGF-D的受體，受VEGF-D的誘導(dǎo)，因此利用VEGFR-3標(biāo)注淋巴管有利于探究淋巴轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制〔6〕。通過(guò)VEGFR-3定位淋巴管的特異性，通過(guò)觀(guān)察淋巴管組織學(xué)類(lèi)型、TNM分期、濃度梯度，有利于進(jìn)一步確定胃癌淋巴轉(zhuǎn)移中的表達(dá)。本文研究中，VEGFR-3在胃癌組織中表達(dá)與患者組織學(xué)類(lèi)型、淋巴結(jié)分期、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，與其他無(wú)密切關(guān)聯(lián)性。

VEGF-D可以與內(nèi)皮細(xì)胞受體VEGFR-3結(jié)合，刺激內(nèi)皮細(xì)胞增殖，引起微淋巴管增生，加速腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移，常誘導(dǎo)腫瘤內(nèi)形成淋巴管，播散淋巴結(jié)〔7〕。本文研究中，VEGF-D在胃癌組織中表達(dá)低于正常胃黏膜，表明VEGF-D對(duì)胃癌發(fā)展起著重要作用，VEGF-D會(huì)通過(guò)誘導(dǎo)淋巴管生成參與腫瘤發(fā)展變化。VEGF-D陽(yáng)性表達(dá)的胃癌組織中，會(huì)刺激胃癌組織淋巴生成〔8〕。同時(shí)，VEGF-D與患者的組織學(xué)類(lèi)型、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、淋巴結(jié)分期、轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)數(shù)有關(guān)，與腫瘤大小、年齡、浸潤(rùn)深度無(wú)關(guān)，表明VEGF-D高表達(dá)增強(qiáng)了癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的特性〔9，10〕。

VEGFR-3與配體VEGF-D結(jié)合，誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞增殖，對(duì)新生淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞及血管調(diào)控起著調(diào)節(jié)作用。本文研究表明VEGF-D陽(yáng)性胃癌組織中，受體VEGFR-3的表達(dá)也較高，表明VEGF-D高表達(dá)與腫瘤淋巴轉(zhuǎn)移關(guān)系密切。同時(shí)，VEGF-D又促進(jìn)激活淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞VEGFR-3受體，導(dǎo)致淋巴管增生，增大內(nèi)皮細(xì)胞間的縫隙，使腫瘤細(xì)胞進(jìn)入淋巴管。VEGF-D激活VEGFR-3受體，從而導(dǎo)致胃癌組織淋巴管增生，引起腫瘤細(xì)胞通過(guò)淋巴管擴(kuò)散，誘發(fā)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。

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