制備舒血寧注射液的廢棄物中銀杏內(nèi)酯的回收方法

董國蕊，王玉霞

(1.山西煤炭中心醫(yī)院，山西 太原 030006; 2.山西省太原市第二人民醫(yī)院，山西 太原 030002)

銀杏葉提取物中主要的活性成分是銀杏總黃酮和銀杏萜內(nèi)酯兩類化合物[1]。銀杏黃酮主要藥理作用是活血化瘀。銀杏萜內(nèi)酯包括銀杏內(nèi)酯和白果內(nèi)酯，銀杏內(nèi)酯是特異的血小板活化因子(PAF)[1－2]的拮抗劑，具有阻止血小板凝集、防止血栓形成的功能，同時還具有調(diào)血脂和促進大腦循環(huán)代謝、改善記憶功能的作用;白果內(nèi)酯具有特異的抗神經(jīng)末梢衰老作用，是防止老年癡呆、抗抑郁癥等神經(jīng)精神疾病的藥物。目前，我國從銀杏葉中提取有效成分主要有兩種方式:一種是銀杏葉提取物(GBE)經(jīng)真空干燥得到粉末，作為制備注射劑和口服劑型的原料;另一種是將提取的有效成分水溶液直接制備注射劑，但由于銀杏內(nèi)酯在水中溶解度小，所以注射劑的質(zhì)量標準中對銀杏內(nèi)酯要求很低。這兩種方法在提取和制劑過程中都使極大部分銀杏內(nèi)酯隨沉淀丟失，造成了極大的浪費。為綜合利用銀杏內(nèi)酯資源，提高銀杏葉制劑的藥效，回收提取銀杏內(nèi)酯，本試驗研究了從制備舒血寧注射液的廢棄物中回收提取銀杏內(nèi)酯的方法，報道如下。

1 儀器與試藥

玻璃層析柱(直徑5 cm，高60 cm);HC－TP－11B.10型架盤藥物天平(北京醫(yī)用天平廠)。試驗試劑(山西銀湖制藥廠)，氧化鋁(江蘇強盛化工有限公司);95%藥用乙醇(太原市清徐康久醫(yī)藥輔料福利廠);D101型大孔吸附樹脂(天津制膠廠)。

2 方法與結(jié)果

2.1 銀杏內(nèi)酯的回收提取方法

將制備舒血寧注射液的廢棄物，加適量熱水?dāng)嚢枞芙?，趁熱過濾，濾液放冷，調(diào)pH至1～2，冷藏過夜，再過濾，濾渣加水適量調(diào)pH值至9～10，過濾，濾液減壓濃縮至稠膏狀，真空干燥，得粉末。用95% 乙醇溶解，用濾紙過濾，濾液經(jīng)氧化鋁層析分離，用95% 乙醇洗脫，收集淡黃色洗脫液，回收乙醇后，即有銀杏內(nèi)酯析出，得粗品。再利用銀杏內(nèi)酯溶于乙醇、微溶于熱水不溶于冷水的原理，反復(fù)精制，則得銀杏內(nèi)酯精品。結(jié)果見表1。

表1 兩種樹脂制備舒血寧所得廢棄物中銀杏內(nèi)酯的回收方法

2.2 銀杏內(nèi)酯的提取結(jié)果 見表2。

表2 回收所得銀杏內(nèi)酯的質(zhì)量及各成分的百分含量

2.3 銀杏內(nèi)酯的回收率

使用大孔吸附樹脂制備舒血寧回收銀杏內(nèi)酯，每kg銀杏葉可回收0.4283 g銀杏內(nèi)酯。使用陽樹脂制備舒血寧注射液所回收銀杏內(nèi)酯，每kg陽樹脂可回收0.3738 g銀杏內(nèi)酯。

3 討論

由于白果內(nèi)酯為水溶性化合物，在回收物中含量甚微，所以可將回收所得物質(zhì)的總質(zhì)量粗略看作銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B及銀杏內(nèi)酯C的質(zhì)量之和。又因銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B和銀杏內(nèi)C在水中溶解度不同，故可進一步分離得到這3種化合物。

有人從銀杏和銀杏葉中分離得到8種化合物，比較了其對血小板活化因子誘導(dǎo)兔血小板凝集的抑制活性，結(jié)果GB和GC的IC50(半數(shù)抑制濃度)分別為 1.9 ×10－7mol/L 和 3.9 ×10－7mol/L[3]，說明銀杏內(nèi)酯B的活性最強。從表2可看出，回收得到的銀杏內(nèi)酯中銀杏內(nèi)酯B的含量最高，銀杏內(nèi)酯C含量最低。故用該方法回收得到的銀杏內(nèi)酯對血小板活化因子的拮抗作用應(yīng)很強。

銀杏又名白果，是我國特有的古老樹種之一，且資源極其豐富，除黑龍江、吉林、內(nèi)蒙古、青海、西藏外，其他各省都有分布。全國銀杏葉年產(chǎn)量在2×107kg以上，占世界總產(chǎn)量的70%[4]。日本和歐洲的一些國家大量從我國進口銀杏葉，而目前我國臨床廣泛使用的銀杏葉注射液多為進口制劑(如金納多)，其療效雖顯著，但價格較貴。因此，該方法如能在舒血寧的提取液生產(chǎn)中得到推廣應(yīng)用，將產(chǎn)生巨大的經(jīng)濟效益和生產(chǎn)效益。

因銀杏內(nèi)酯在水中溶解度小，特別是銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B，所以在注射劑中含量受到一定限制。應(yīng)在口服類劑型(片劑、膠囊劑、滴丸)的制備上尋求創(chuàng)新。

銀杏內(nèi)酯在水中溶解度大小依次為銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B、銀杏內(nèi)酯C。銀杏葉提取液經(jīng)過陽樹脂時pH很低(1－2)，此時銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B易析出(特別是銀杏內(nèi)酯A)。因此制備舒血寧時，往往要另加銀杏內(nèi)酯A，使達到舒血寧的質(zhì)量標準要求。如果使用大孔吸附樹脂，此問題則不存在，故在制備舒血寧時應(yīng)使用大孔吸附樹脂分離技術(shù)為好。

[1]管孝鞠，袁伯俊.銀杏內(nèi)酯藥理作用研究進展[J].國外醫(yī)學(xué)·藥學(xué)分冊，1995，22(3):129 －133.

[2]鄭虎占，董宏澤，佘 靖.中藥現(xiàn)代研究與應(yīng)用(第二卷)[M].北京:學(xué)苑出版社，1997:1561－1591.

[3]游 松，姚新生，崔承斌，等.銀杏葉的活性成分研究[J].沈陽藥學(xué)大學(xué)學(xué)報，1988，5(3):216.

[4]張興剛 .銀杏化學(xué)資源利用應(yīng)快步走[EB/OL].http://www.ccin.com.cn/ccin/news/2007/11/14/26592.shtml，2007－11－14/2011－11－15.