廣西杧果象牙品種果腐病病原菌種類鑒定

賀 冰，賀運(yùn)春，李志崗

（山西農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院，山西太谷 030801）

杧果（Mangifera indicaLinn）屬漆科植物，因其風(fēng)味獨(dú)特和維生素含量高，被譽(yù)為熱帶水果之王。熱帶和亞熱帶地區(qū)有100多個(gè)國(guó)家和地區(qū)廣泛種植杧果。我國(guó)種植杧果的地區(qū)有海南、廣東、廣西、云南、四川、福建、臺(tái)灣等。近些年來，隨著我國(guó)人民生活水平的提高，杧果需求量迅速增加，其種植面積逐年擴(kuò)大，產(chǎn)量穩(wěn)步上升，我國(guó)已成為世界杧果生產(chǎn)大國(guó)[1]。

杧果生產(chǎn)的整個(gè)過程中，有多種病害發(fā)生。其中，杧果在產(chǎn)后和貯運(yùn)過程中發(fā)生的果腐病，對(duì)杧果產(chǎn)量和品質(zhì)的影響，從而造成了較大的經(jīng)濟(jì)損失。據(jù)印度、澳大利亞、美國(guó)、埃及、泰國(guó)等杧果生產(chǎn)大國(guó)統(tǒng)計(jì)，杧果真菌果腐病有10種之多[2-4]。

1995年肖倩莼等[5]報(bào)道，我國(guó)華南地區(qū)杧果真菌果腐病有4種。2002年黃顯明等[6]報(bào)道，四川攀枝花地區(qū)杧果真菌果腐病有4種。2008年甘瑾等[7]報(bào)道，云南杧果真菌果腐病有4種。2009年林明光等[1]報(bào)道，海南杧果真菌果腐病有8種。

國(guó)內(nèi)真菌引起的果腐病主要種類有：Colletotrichum gloeosporioides（Penz.）Sacc.，Alternaria tenuissima（Fr.）Wiltshire，Aspergillus nigerV.Fis.，Rhizopus arrhizusFis.，Macrophoma mangiferaeHingoroai et Sharma等。其中，國(guó)外報(bào)道，杧果炭疽菌（C.gloeosporioides）和杧果大莖點(diǎn)菌（M.mangiferae）均可侵染杧果的葉子、枝干和果實(shí)[2-4]。杧果炭疽菌在我國(guó)杧果種植地區(qū)普遍發(fā)生，從而引起果腐病。杧果大莖點(diǎn)菌在我國(guó)云南三元縣和四川攀枝花地區(qū)可侵染果實(shí)，從而引起杧果果腐病[6-7]；在海南、廣西侵染葉部，引起大莖點(diǎn)菌葉斑病，但未見引起杧果果腐病的報(bào)道[5-6]。

1 材料和方法

1.1 供試材料

供試杧果為廣西象牙品種。于2010年7月18日、23日從山西太谷超市采集來自廣西的杧果病果作為供試材料，病果實(shí)已出現(xiàn)黑斑病狀。

1.2 方法

首先將杧果病果保濕培養(yǎng)5～7 d，待病果皮長(zhǎng)出小粒點(diǎn)時(shí)，分別將不同癥狀類型的病組織切成0.5 cm×0.5 cm的材料，并及時(shí)用裝有FAA固定液的玻璃小瓶固定。

采用快速石蠟制片方法[8]，分別將去蓋的玻璃小瓶放入真空干燥器中，使用醫(yī)用電動(dòng)吸引器進(jìn)行抽氣，正丁醇脫水和石蠟滲透，之后進(jìn)行材料的包埋、切片、黏貼、去蠟、染色、透明、封固等過程。切片厚度為9～12 μm。病組織切片制成后進(jìn)行觀察，并結(jié)合分離培養(yǎng)進(jìn)行病原菌種類鑒定。同時(shí)用OLYMPUS數(shù)碼顯微相機(jī)拍照。病組織及病原菌染色劑為固綠、番紅T等，進(jìn)行單染或雙重染色，以便觀察。

2 結(jié)果與分析

廣西杧果象牙品種的果腐病，經(jīng)病害癥狀和病原形態(tài)種類鑒定，病原由杧果炭疽菌（C.gloeosporioides）或杧果大莖點(diǎn)菌（M.mangiferae）侵染發(fā)病而引起，這2種病害的病狀有相似性，

但病癥有明顯差異。

2.1 杧果炭疽菌引起果腐病的癥狀及病原

2.1.1 癥狀 杧果果面初發(fā)病時(shí)，產(chǎn)生小型黑色圓形病斑，病斑進(jìn)一步擴(kuò)展成直徑1 cm的大圓斑，凹陷，且多個(gè)病斑常常連成大斑塊，果肉變色、腐爛、有異味，不能食用。潮濕時(shí)，病斑生有輪紋狀小黑點(diǎn)（為此菌的分生孢子盤），其頂端有黃褐色顆粒狀物（為分生孢子團(tuán)狀物）。

2.1.2 病原 杧果炭疽菌（C.gloeosporioides）屬子囊菌門子囊菌綱小叢殼科（此科未定目）小叢殼屬（Glomerella）圍小叢殼（G.cingulata（Stoneman）Spauld.et H.Schrenk）的無性型。該菌的有性世代在本研究中未發(fā)現(xiàn)。分生孢子盤初期埋生于寄主表皮層下，成熟后突破表皮外露，呈盤狀散生，偶生剛毛，直徑160～280 μm。分生孢子梗（17.5～28.7）μm×（2.0～3.0）μm，無色，2～3個(gè)分隔，基部有分枝。產(chǎn)孢方式為內(nèi)壁芽生瓶梗式產(chǎn)孢[9]。分生孢子直，長(zhǎng)橢圓形，頂端鈍，無色，單胞，（11.3～17.5）μm×（2.0～3.0）μm（圖1），分生孢子萌發(fā)產(chǎn)生不規(guī)則形附著胞。

2.2 杧果大莖點(diǎn)菌引起的果腐病癥狀及病原

2.2.1 癥狀 果面產(chǎn)生黑色圓形或橢圓形病斑，稍凹陷，嚴(yán)重時(shí)連片發(fā)生，果肉變黃褐色，腐爛，有異味，不能食用。潮濕時(shí)，病皮上產(chǎn)生黑色小粒點(diǎn)，小粒點(diǎn)小而密，為此菌分生孢子器。

2.2.2 病原 杧果大莖點(diǎn)菌（M.mangiferae）屬子囊菌門座囊菌綱葡萄座腔菌目葡萄座腔菌科大莖點(diǎn)菌屬（Macrophoma）杧果大莖點(diǎn)菌（M.mangiferae），目前沒有其有性世代種的記錄。此菌分生孢子器單生或聚生，初期埋生，后期喙孔口突破表皮外露，球形、半球形，直徑為110～260 μm。分生孢子梗無色，棍棒形、圓柱形，不分枝，無隔，（7.5～25.0）μm×（2.5～3.8）μm，產(chǎn)孢方式為全壁芽生單生式[10]。分生孢子單胞，無色，長(zhǎng)橢圓形、紡錘形，正直，大型，（22.5～30.0）μm×（4.5～7.5）μm（圖 2）。

3 結(jié)論與討論

1981年P(guān)rusky等[11]報(bào)道了C.gloeosporioides和A.alternata在杧果中的潛伏侵染及其危害性。1986年劉秀娟等[12]也介紹了海南島杧果果實(shí)真菌潛伏侵染的研究報(bào)告，認(rèn)為海南島杧果果實(shí)上普遍存在真菌的潛伏侵染，并驗(yàn)證了果實(shí)在采收前就已經(jīng)存在，如杧果炭疽病菌（C.gloeosporioides）等幾種真菌病害的病原菌。在潛伏侵染的幾種真菌種類中，杧果大莖點(diǎn)菌（M.mangiferae）不在其中。1995年，杧果大莖點(diǎn)菌在廣西已有侵染杧果葉子，引起葉斑病的記錄[5]。筆者分析，該菌也可能存在潛伏侵染的問題。進(jìn)入山西銷售市場(chǎng)的廣西象牙杧果品種，在7月份貯運(yùn)過程中，遇到高溫高濕天氣環(huán)境，很容易引起潛伏侵染真菌的發(fā)病，造成進(jìn)入銷售市場(chǎng)的杧果病斑滿果，嚴(yán)重的造成果肉腐爛而失去食用價(jià)值。關(guān)于杧果大莖點(diǎn)菌潛伏侵染的課題，還有待于進(jìn)一步研究。

在杧果生長(zhǎng)發(fā)育的整個(gè)過程中，可受到多種病害侵染，嚴(yán)重影響其產(chǎn)量和品質(zhì)的提高。防治杧果病害，從長(zhǎng)遠(yuǎn)目標(biāo)考慮，應(yīng)加強(qiáng)杧果抗病品種的培育、選用和引進(jìn)工作，同時(shí)搞好田間管理、病害防治、田園衛(wèi)生和減少田間菌量等。近些年，在海南等省示范推廣杧果套袋、采收后清洗、藥劑清泡和涂膜等措施，已經(jīng)降低了采后病害的發(fā)生率。搞好病害綜合防治，杧果病害發(fā)生為害將會(huì)得到有效控制。

［1］林明光，劉福秀，李偉東，等.海南省杧果作物病害調(diào)查與鑒定[J].廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，40（11）：1440-1442.

［2］Wafaa MHaggag.Mango diseases in Egypt[J].Agriculture and BiologyJournal ofNorth America，2010，1（3）：285-289.

［3］Abd-Alla MA，Wafaa MHaggag.Newsafe methods for controlling anthracnose disease of mango（Mangifera indicaL.）fruits caused byColletotrichum gloeosporioides（Penz.）[J].The American Journal ofScience，2010，8（8）：361-367.

［4］Scot C Nelson.Mango anthracnose（Colletotrichum gloeosporiodes）[J].Plant Disease，2008，48：1-9.

［5］肖倩莼，余卓桐，鄭建華，等.杧果病害種類及其病原物鑒定[J].熱帶作物學(xué)報(bào)，1995，16（1）：77-82.

［6］黃顯明，楊清楷.攀枝花地區(qū)的杧果病蟲害及防治策略[J].熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)，2002，22（1）：9-13.

［7］甘瑾，馬李一，張弘，等.杧果采收后病原菌分離及天然抗菌物質(zhì)的篩選[J].食品科學(xué)，2008，29（10）：414-417.

［8］賀運(yùn)春.植物病害制片技術(shù) [M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2002.

［9］賀運(yùn)春.真菌學(xué)[M].北京：中國(guó)林業(yè)出版社，2008：286-296.

［10］陸家云.植物病原真菌學(xué) [M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2001：507-509.

［11］PruskyD.Amethod for harvest assessment of latent infection in fruits[J].Anr appl Bol，1981，98：74-85.

［12］劉秀娟，李繼勇，楊業(yè)銅.海南島杧果果實(shí)真菌潛伏侵染的研究[J].植物病理學(xué)報(bào)，1986，6（1）：47-51.