扎龍保護(hù)區(qū)散養(yǎng)、圈養(yǎng)丹頂鶴血液生化指標(biāo)的測定與比較1)

曾祥偉 徐先云

(東北林業(yè)大學(xué)，哈爾濱，150040)

隨著自然棲息地的大量破壞，以及歷史上人為的獵殺，許多野生動物的生存受到不同程度的威脅甚至處于瀕臨滅絕的危險境地。丹頂鶴就是被國際自然保護(hù)聯(lián)盟(IUCN)的紅皮書中記載的瀕危物種之一，也是國家一級保護(hù)動物，目前野生的丹頂鶴數(shù)量僅2 000多只［1］，大力開展其保護(hù)工作迫在眉睫。黑龍江扎龍國家自然保護(hù)區(qū)1976年開始組織實(shí)施了丹頂鶴人工馴養(yǎng)繁育工作［2］，截至目前，在扎龍自然保護(hù)區(qū)的人工馴養(yǎng)繁殖丹頂鶴可分圈養(yǎng)和散養(yǎng)2種類型，這2個小群體目前在生態(tài)習(xí)性上和行為等方面已有明顯的差異［3－4］。圈養(yǎng)丹頂鶴完全在籠舍里生活，完全依賴人工投食;而散養(yǎng)丹頂鶴在自然環(huán)境下棲息、繁殖，部分依賴人工投食，是保護(hù)區(qū)進(jìn)行丹頂鶴野化訓(xùn)練的一個重要方式。

血液生化指標(biāo)是反映動物機(jī)體生理機(jī)能和健康水平的重要數(shù)據(jù)［5］。為了檢驗(yàn)散養(yǎng)方式對人工繁殖的丹頂鶴進(jìn)行野化訓(xùn)練的預(yù)期效果，本研究擬從血液生化指標(biāo)方面對扎龍自然保護(hù)區(qū)圈養(yǎng)和散養(yǎng)的丹頂鶴進(jìn)行比較分析，旨在探究丹頂鶴經(jīng)過散養(yǎng)后的生理適應(yīng)性，為今后丹頂鶴野化訓(xùn)練方案的完善提供參考，進(jìn)而在不久的將來使人工繁殖的丹頂鶴能夠真正回歸大自然。

1 材料與方法

樣品的采集和處理 2011年6月，在黑龍江扎龍國家自然保護(hù)區(qū)的同一年出生的散養(yǎng)和圈養(yǎng)的丹頂鶴種群中隨機(jī)各選取5只成體丹頂鶴，這10只丹頂鶴均在2～3歲之間，散養(yǎng)和圈養(yǎng)的丹頂鶴都是2雄3雌。在上午未飼喂前進(jìn)行血液樣品的采集，物理方法保定丹頂鶴，待其安靜后，翅下靜脈采血2 mL，于3 000 r/min離心10 min，分離血清，置4℃條件下備用。

血液生化指標(biāo)的測定 24項(xiàng)血液生化指標(biāo)(總膽固醇、高密度脂蛋白、甘油三酯、低密度脂蛋白、血糖、γ－谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、堿性磷酸酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、肌酸激酶、鈣離子、鉀離子、鈉離子、氯離子、尿酸、尿素氮、肌酐、總蛋白、球蛋白、白蛋白、總膽紅素、直接膽紅素、間接膽紅素、總膽汁酸)采用深圳邁瑞B(yǎng)S—320全自動生化分析儀結(jié)合南京建成生物工程研究所的試劑盒進(jìn)行測定，各項(xiàng)試驗(yàn)操作嚴(yán)格按儀器操作規(guī)程進(jìn)行。

數(shù)據(jù)處理 利用Excel處理程序整理各項(xiàng)血液生化指標(biāo)的檢測結(jié)果，應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件對散養(yǎng)和圈養(yǎng)丹頂鶴血液生化指標(biāo)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計和分析，計算均值和方差并進(jìn)行組間差異分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 丹頂鶴血液脂類和血糖指標(biāo)

從測定結(jié)果看，散養(yǎng)的丹頂鶴血液中總膽固醇的濃度要低于圈養(yǎng)的丹頂鶴，差異顯著(P＜0.05);而對于甘油三酯、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白的濃度，散養(yǎng)與圈養(yǎng)丹頂鶴相比差異不顯著(P＞0.05)，具體見表1。血脂是直接反映機(jī)體代謝狀況的重要指標(biāo)。其中，甘油三酯和總膽固醇是血液中酯類的主要生化指標(biāo)。散養(yǎng)丹頂鶴血液中的總膽固醇顯著低于圈養(yǎng)丹頂鶴，這與散養(yǎng)丹頂鶴在野外環(huán)境中的運(yùn)動量更大、代謝更旺盛是相符的。而血糖在散養(yǎng)與圈養(yǎng)丹頂鶴之間差異不顯著(P＞0.05)。

表1 丹頂鶴血液脂肪和血糖指標(biāo)的測定結(jié)果 mmol·L－1

2.2 丹頂鶴血液酶指標(biāo)

從測定結(jié)果看，散養(yǎng)的丹頂鶴血液中的肌酸激酶的含量明顯高于圈養(yǎng)丹頂鶴的指標(biāo)，差異顯著(P＜0.05);而堿性磷酸酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶和γ－谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶4個指標(biāo)，兩組差異不顯著(P＞0.05)，具體見表2。γ－谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶是在動物機(jī)體內(nèi)參與氨基酸代謝以及蛋白質(zhì)、脂肪和糖的相互轉(zhuǎn)化的重要酶類，它們都是衡量肝臟功能的重要指標(biāo)。當(dāng)肝臟等器官的細(xì)胞受到損傷時，血清中這3種酶的含量明顯地升高。根據(jù)王宏偉等［5］的研究結(jié)果，這3種酶的數(shù)據(jù)都在正常范圍，表明丹頂鶴都是健康的。血清中的堿性磷酸酶的測定主要用于機(jī)體肝膽系統(tǒng)和骨骼疾病的診斷，兩組的堿性磷酸酶含量均在正常范圍內(nèi)，差異不顯著。肌酸激酶是可逆地催化ATP及肌酸之間轉(zhuǎn)磷酸反應(yīng)的酶，是細(xì)胞能量代謝的關(guān)鍵酶。散養(yǎng)丹頂鶴血液中的肌酸激酶含量明顯高于圈養(yǎng)丹頂鶴，與散養(yǎng)丹頂鶴野外運(yùn)動量大、耗能多的實(shí)際情況是一致的。

表2 丹頂鶴血液酶指標(biāo)的測定結(jié)果 U·L－1

2.3 丹頂鶴血液部分無機(jī)離子指標(biāo)

從測定結(jié)果看，散養(yǎng)的丹頂鶴血液中鈣離子要高于圈養(yǎng)的丹頂鶴，差異顯著(P＜0.05);而對于鈉離子、氯離子、鉀離子的濃度，散養(yǎng)與圈養(yǎng)丹頂鶴相比差異不顯著(P＞0.05)，具體見表3。鈣離子是血液中重要的常量元素，它對丹頂鶴的骨骼發(fā)育及產(chǎn)卵孵化作用顯著。從測定結(jié)果看，散養(yǎng)的丹頂鶴血液中鈣離子的濃度明顯高于圈養(yǎng)的丹頂鶴。這可能是由于散養(yǎng)丹頂鶴在6月份正處于繁殖期，這時候丹頂鶴可從野外捕食小型魚類、甲殼類、螺類、昆蟲等多種食物，增加了鈣的攝入和吸收;而圈養(yǎng)的丹頂鶴主要還是以人工投喂的小型魚類為食，食物的單一也可能影響到鈣的吸收。

表3 丹頂鶴血液無機(jī)離子指標(biāo)的測定結(jié)果mmol·L－1

2.4 丹頂鶴血液腎功能指標(biāo)

散養(yǎng)的丹頂鶴血液中尿素氮和肌酐含量均明顯高于圈養(yǎng)的丹頂鶴的指標(biāo)，差異顯著(P＜0.05);而血清中尿酸的濃度，散養(yǎng)與圈養(yǎng)的丹頂鶴兩組差異不顯著(P＞0.05)，具體見表4。尿素氮是蛋白質(zhì)分解代謝的終產(chǎn)物，肌酐是肌肉肌酸和磷酸肌酸的代謝產(chǎn)物。散養(yǎng)丹頂鶴血液中肌酐、尿素氮的濃度要明顯高于圈養(yǎng)丹頂鶴，這與散養(yǎng)丹頂鶴的代謝水平更高是相符的。

表4 丹頂鶴血液腎功能指標(biāo)的測定結(jié)果 mmol·L－1

2.5 丹頂鶴血液蛋白指標(biāo)

散養(yǎng)的丹頂鶴血液中總蛋白、球蛋白的質(zhì)量濃度與圈養(yǎng)的丹頂鶴相比略低，而白蛋白的質(zhì)量濃度略高，但是差異不顯著(P＞0.05)，具體見表5。血液中這幾種蛋白的質(zhì)量濃度主要與丹頂鶴攝取的食物有密切關(guān)系。圈養(yǎng)丹頂鶴的食物主要以魚為主，輔以玉米等谷物;而散養(yǎng)丹頂鶴的食物則包括小型魚類、甲殼類、螺類、昆蟲、草籽等多種食物。但結(jié)果表明，無論散養(yǎng)還是圈養(yǎng)，野外環(huán)境或人工提供的食物都能滿足丹頂鶴對蛋白質(zhì)的需要。

表5 丹頂鶴血液蛋白指標(biāo)的測定結(jié)果 g·L－1

2.6 丹頂鶴血液膽紅素和膽汁酸指標(biāo)

散養(yǎng)的丹頂鶴血液中總膽紅素、直接膽紅素、間接膽紅素和膽汁酸的濃度與圈養(yǎng)的丹頂鶴相比，差異不顯著(P＞0.05)，具體見表6。膽紅素是機(jī)體組織中的血紅蛋白、肌紅蛋白、過氧化物酶、細(xì)胞色素等含鐵葉琳的化合物在體內(nèi)代謝的產(chǎn)物。血清中有兩類膽紅素，即直接膽紅素和間接膽紅素?？偰懼崾悄懼械闹饕煞?。這幾個指標(biāo)臨床上主要用于診斷肝臟和膽道疾病等。

表6 丹頂鶴血液膽紅素和膽汁酸指標(biāo)的測定結(jié)果μmol·L－1

3 討論

人工圈養(yǎng)已經(jīng)成為保護(hù)和恢復(fù)野外瀕危物種的有效途徑之一［6－7］，并被廣泛用于大熊貓、華南虎、東北虎等瀕危物種的異地保護(hù)。丹頂鶴人工圈養(yǎng)的最終目的是有效地補(bǔ)充野外種群。因此，人工圈養(yǎng)的丹頂鶴必定要經(jīng)過系統(tǒng)的野化訓(xùn)練逐步放歸自然。黑龍江扎龍自然保護(hù)區(qū)通過放飛練習(xí)、散養(yǎng)適應(yīng)等方式對丹頂鶴進(jìn)行野化訓(xùn)練。散養(yǎng)的丹頂鶴最開始在離圈養(yǎng)籠舍較近的區(qū)域生活，隨著時間的延長，丹頂鶴的適應(yīng)能力不斷增強(qiáng)，逐步遠(yuǎn)離圈養(yǎng)籠舍進(jìn)行覓食、棲息和繁殖，對人工投食的依賴性降低。散養(yǎng)的丹頂鶴無論在覓食能力、飛行能力、爭斗能力等方面都比圈養(yǎng)的丹頂鶴有明顯的提高。目前記載表明，已有多只散養(yǎng)丹頂鶴個體跑到野生群體中，冬天不再參與繁殖地的越冬活動，而成為野生丹頂鶴［8］。同時，也有的野生丹頂鶴遷移到散養(yǎng)丹頂鶴分布區(qū)，并與散養(yǎng)丹頂鶴進(jìn)行配對?？梢姡B(yǎng)已經(jīng)成為丹頂鶴野化訓(xùn)練的重要方式，達(dá)到了有效補(bǔ)充野外種群的目的。

血液生化指標(biāo)是動物機(jī)體生理機(jī)能的基礎(chǔ)指標(biāo)。對比測得的散養(yǎng)與圈養(yǎng)丹頂鶴的血液生化數(shù)據(jù)，有一部分指標(biāo)存在明顯差異，而這些差異是與散養(yǎng)過程中丹頂鶴的野外適應(yīng)能力逐步增強(qiáng)密切相關(guān)，因此可以選擇這些指標(biāo)作為衡量以散養(yǎng)方式對丹頂鶴進(jìn)行野化訓(xùn)練取得的預(yù)期效果的標(biāo)志之一。已有研究發(fā)現(xiàn):經(jīng)過放飛訓(xùn)練的亞成體丹頂鶴在體能、飛行技巧上都比一直籠養(yǎng)的亞成體丹頂鶴更強(qiáng)，同時伴隨著肌酸激酶、尿素氮和肌酐等血液生化指標(biāo)的適應(yīng)性變化［9］。本研究發(fā)現(xiàn)，人工孵化丹頂鶴經(jīng)過散養(yǎng)后的確在覓食能力、飛行能力、爭斗能力等方面表現(xiàn)出更強(qiáng)的適應(yīng)性，同樣也伴隨著總膽固醇、肌酸激酶、鈣離子、尿素氮和肌酐等血液生化指標(biāo)的適應(yīng)性變化。這與筆者先前對進(jìn)行放飛訓(xùn)練的亞成體丹頂鶴的血液生化指標(biāo)研究結(jié)果相似。可見，無論是放飛訓(xùn)練還是散養(yǎng)，都是有效的野化方式。本次測定的丹頂鶴的血液生化數(shù)據(jù)與以前一些學(xué)者測定的數(shù)據(jù)有一定差異［5，10］，主要表現(xiàn)在某些血液生化指標(biāo)的變化范圍不完全一致，這可能與樣品采集的季節(jié)、丹頂鶴的年齡和所用的測定方法不完全相同有一定關(guān)系。因此，這些數(shù)據(jù)能否作為丹頂鶴血液生化的基礎(chǔ)參考數(shù)據(jù)有待進(jìn)一步探討，但并不影響對散養(yǎng)丹頂鶴和圈養(yǎng)丹頂鶴血液生化指標(biāo)差異的比較分析。這些數(shù)據(jù)將為丹頂鶴的野化訓(xùn)練方案的科學(xué)制定及不斷完善奠定基礎(chǔ)，也為丹頂鶴健康水平的監(jiān)測和重大疾病的防治提供依據(jù)。

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