“糖脂康”對大鼠天喂養(yǎng)實驗研究

左紹遠，錢金栿

（1.大理學院基礎(chǔ)醫(yī)學院，云南大理 671000；2.大理學院藥學與化學學院，云南大理 671000）

左紹遠1，錢金栿2

（1.大理學院基礎(chǔ)醫(yī)學院，云南大理 671000；2.大理學院藥學與化學學院，云南大理 671000）

目的：觀察功能性食品“糖脂康”的安全性。方法：選用健康斷乳SD大鼠為受試對象，隨機分為4組。分別以1 875、3 750、7 500 mg/kg.BW劑量的糖脂康樣品摻入基礎(chǔ)飼料中喂養(yǎng)，對照組則給予基礎(chǔ)飼料，連續(xù)30 d后檢測相應指標。結(jié)果：試驗期間及實驗結(jié)束時，各劑量組動物體重增長、食物利用率、血常規(guī)、血生化指標及臟體系數(shù)均在正常范圍內(nèi)，與對照組比較，差異均無顯著性（P＞0.05）；病理組織學檢查表明各實驗組大鼠肝、腎、胃、腸、脾、睪丸和卵巢等組織均未見有病理改變。結(jié)論：糖脂康對大鼠的生長、發(fā)育、代謝及臟器無急性不良影響，在本實驗劑量范圍內(nèi)，無短期毒副作用。

糖脂康；毒理學安全性評價；大鼠；30天喂養(yǎng)實驗

糖脂康是大理學院研究開發(fā)的純天然功能性食品，具有調(diào)節(jié)血糖、血脂，增強機體免疫力等功效〔1-4〕。為觀察該產(chǎn)品的安全性，我們對糖脂康進行了大鼠30 d短期喂養(yǎng)實驗研究，以期為該產(chǎn)品的安全性毒理學評價提供實驗依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 受試樣品“糖脂康”，由大理學院“糖脂康”研究組提供，樣品批號：20050520。樣品性狀：片劑，瓶裝（0.3 g×50片/瓶）。人體推薦劑量為每天凈含量4 500 mg（75 mg/kg.BW）。

1.2 試驗動物與試驗環(huán)境清潔級斷乳SD大鼠，體重68.8～118.5 g，雌雄各半。由云南生物制藥有限公司提供（合格證號：滇實動證第2004013號）；飼料由云南生物制藥有限公司提供（合格證號：SCXK（滇）2005—0007）。實驗環(huán)境為溫度18.01～23.65℃，相對濕度43.37%～59.35%〔5〕。

1.3 試驗方法參照衛(wèi)生部GB15193-2003“食品安全性毒理學評價程序和方法”及相關(guān)文獻進行〔6-10〕。大鼠適應性喂養(yǎng)2 d后，按體重隨機分為4組，每組20只。設(shè)空白對照組和糖脂康樣品低、中、高3個劑量組。糖脂康樣品受試劑量為1 875、3 750、7 500 mg/ kg.BW（相當于人體推薦劑量的25倍、50倍、100倍），采用摻入飼料法，以喂飼方式給予受試物?？瞻讓φ战M則喂飼基礎(chǔ)飼料。每只大鼠單籠喂養(yǎng)，自由攝食飲水，每周稱一次體重，并根據(jù)體重調(diào)整給樣品量，連續(xù)30 d，第31天處死動物，取血作血常規(guī)和生化指示檢測，取主要臟器測定臟體系數(shù)及做病理組織學檢查。實驗結(jié)果用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行方差分析，結(jié)果以表示。檢驗水準α=0.05。

2 觀察及檢測指標

2.1 大鼠生長狀況、體重及食物利用率觀察活動、進食飲水、大小便情況，計算體重、增重、進食量及食物利用率。

2.2 血液學及血液生化指標血紅蛋白（Hb）、紅細胞計數(shù)（RBC）、白細胞計數(shù)（WBC）及分類、血小板計數(shù)（PLT）。血糖（GLU）、甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、尿素氮（BUN）、肌酐（CRE）〔11〕。

2.3 主要臟器病理學檢查肉眼觀察試驗動物主要臟器病理改變，并對肝、腎、脾、胃、十二指腸、結(jié)腸、睪丸、卵巢進行病理組織學切片檢查；對肝、腎、脾、睪丸、卵巢進行臟體系數(shù)值測定，計算臟體系數(shù)（臟器/體重×100%）〔12〕。

3 實驗結(jié)果

3.1 對一般狀況、體重及食物利用率的影響結(jié)果表明：試驗期間各組大鼠生長發(fā)育良好，行為活動、精神狀況、毛色、進食飲水及大小便正常。在實驗期間及實驗30 d結(jié)束時，各劑量組與對照組之間、各劑量組之間比較，體重增長和食物利用率等差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表1。

表1 糖脂康30d喂養(yǎng)對大鼠體重增長和食物利用率的影響（

表1 糖脂康30d喂養(yǎng)對大鼠體重增長和食物利用率的影響（

體重/g性別 劑量組/（mg/kg.BW）動物/ n 始 重 終體重 總增重量總進食量/g 食物利用率/ %雄雌0.0 1 875 3 750 7 500 0.0 1 875 3 750 7 500 20 96.75±11.36 257.62±28.23 160.87±26.42 639.60±92.24 25.20±2.38 20 98.08±12.66 268.63±27.61 170.55±21.30 620.24±67.50 25.41±1.25 20 97.32±12.02 263.46±31.15 162.14±28.20 646.78±72.85 24.81±2.25 20 97.79±12.18 259.58±45.37 161.79±39.54 625.77±98.66 26.06±4.54 20 91.63±10.42 190.70±18.17 99.07±14.21 563.60±41.84 17.62±2.48 20 91.39±7.82 181.92±13.84 90.53±18.47 546.67±38.28 16.66±3.88 20 90.47±6.80 188.08±14.37 97.61±11.13 580.54±52.37 16.84±1.49 20 90.91±8.13 190.00±16.36 99.75±18.42 550.66±41.20 18.13±3.28

3.2 對大鼠血常規(guī)的影響結(jié)果表明，各實驗組Hb、RBC、WBC及分類（LYM：淋巴細胞，GRAN：中性粒細胞，MONO：單核細胞），與對照組比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表2。

表2 糖脂康30d喂養(yǎng)對大鼠血常規(guī)指標的影響（

表2 糖脂康30d喂養(yǎng)對大鼠血常規(guī)指標的影響（

性別 動物/ n RBC/（×1012/L）WBC/（×109/L）LYM/ % GRAN/ %雄雌劑量組/ mg/kg.BW 0.0 1 875 3 750 7 500 0.0 1 875 3 750 7 500 MONO/ % 20 151.80±7.77 7.50±0.42 8.78±2.19 77.50±3.17 17.22±2.33 6.28±1.68 20 160.70±9.38 7.47±0.55 9.08±1.80 75.05±9.21 19.48±8.35 5.47±1.42 20 173.20±5.14 7.34±0.35 9.22±1.59 77.07±7.53 16.45±6.33 6.48±2.93 20 158.00±11.4 7.45±0.35 9.42±1.90 77.64±4.45 14.71±4.62 7.22±2.02 20 150.1±7.53 7.06±0.49 9.03±2.71 77.05±5.88 16.16±3.43 6.79±2.85 20 145.9±11.05 7.15±0.64 9.13±3.96 80.53±4.39 14.67±2.87 6.80±2.24 20 152.6±9.06 7.05±0.39 9.27±4.18 77.73±4.85 14.03±3.49 7.24±4.27 20 156.9±7.58 7.19±0.49 9.82±3.07 77.66±5.51 15.54±3.53 6.80±2.65 Hb/（g/L）

3.3 對大鼠血生化指標的影響見表3-1、表3-2。

表3-1 糖脂康30d喂養(yǎng)對大鼠血液生化指標的影響

表3-1 糖脂康30d喂養(yǎng)對大鼠血液生化指標的影響

性別 動物/ n ALT/（IU/L）劑量組/（mg/kg.BW）0.0 1 875 3 750 7 500 0.0 1 875 3 750 7 500 TP/（g/L）AST/（IU/L）Alb/（g/L）BUN/（mmol/L）雄雌Cr/（μmol/L）20 156.49±46.77 30.86±7.12 70.69±6.88 44.86±3.08 7.26±1.28 67.21±12.69 20 138.88±23.63 27.19±2.00 74.19±8.70 48.47±1.61 7.11±1.08 66.16±10.53 20 139.76±20.28 26.78±4.00 77.57±4.63 52.20±1.15 6.70±1.39 67.96±12.58 20 134.22±34.32 26.68±9.02 80.51±5.91 54.36±1.65 7.16±0.82 65.10±9.88 20 148.65±37.35 28.11±4.46 68.23±7.10 34.84±2.66 8.26±1.38 65.61±14.88 20 134.05±22.35 25.20±4.11 73.05±6.91 35.93±2.43 8.24±1.09 63.81±8.79 20 137.70±21.96 26.17±4.56 75.56±4.84 36.27±2.32 8.14±1.75 64.72±11.19 20 140.46±25.54 27.40±5.86 78.08±7.72 36.18±2.43 8.23±1.61 65.89±10.62

表3-2 糖脂康30d喂養(yǎng)對大鼠血液生化指標的影響

表3-2 糖脂康30d喂養(yǎng)對大鼠血液生化指標的影響

注：與對照組相比，*P＜0.05。

性別 動物/ n TC/（mmol/L）雄雌劑量組/（mg/kg.BW）0.0 1 875 3 750 7 500 0.0 1 875 3 750 7 500 Glu/（mmol/L）20 0.56±0.14 2.26±0.33 5.64±0.52 20 0.54±0.16 1.41±0.31* 5.58±0.79 20 0.53±0.13 1.52±0.19* 5.36±0.78 20 0.52±0.11 1.42±0.24* 5.31±0.71* 20 0.57±0.09 2.15±0.69 5.63±0.44 20 0.55±0.18 1.63±0.41* 5.47±0.51 20 0.54±0.16 1.57±0.26* 5.32±0.55 20 0.53±0.09 1.55±0.42* 4.87±0.34* TG/（mmol/L）

從表3-1可見，與對照組相比，雄性、雌性的糖脂康高、中、低各劑量組的AST、ALT、TP、Alb、BUN、Cr等指標差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。而從表3-2可見，與對照組相比，雄性、雌性的糖脂康各劑量組的甘油三酯（TG）有所降低，但差異無統(tǒng)計意義（P＞0.05）。而雄性、雌性的糖脂康各劑量組總膽固醇均低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），提示糖脂康可降低正常小鼠血清膽固醇含量，但無明顯的劑量效應關(guān)系。雄性、雌性的糖脂康高劑量組的血糖含量低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），提示高劑量的糖脂康可能具有降低正常小鼠空腹血糖的作用。但中、低劑量組血糖含量與對照組相比差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

3.4 病理組織學檢查對全部實驗動物進行大體肉眼解剖檢查，未發(fā)現(xiàn)異常，主要臟器肝、腎、脾、胃、十二指腸、結(jié)腸、睪丸、子宮、卵巢進行病理組織學切片檢查，均未發(fā)現(xiàn)病變。

3.5 對大鼠主要臟器系數(shù)的影響各劑量肝體系數(shù)、腎體系數(shù)、脾體系數(shù)、睪體系數(shù)、卵體系數(shù)與陰性對照組比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表4。

4 討論

本實驗以1 875、3 750、7 500 mg/kg.BW劑量（相當于人體推薦劑量的25、50、100倍）的糖脂康喂飼大鼠30 d，結(jié)果顯示：受試物對動物體重增長、食物利用率無不良影響，各組動物生長發(fā)育良好。表明受試物對大鼠的正常生長發(fā)育和食物的吸收、代謝無明顯影響。除糖脂康各劑量組總膽固醇明顯低于對照組（P＜0.05）、糖脂康高劑量組的血糖含量明顯低于對照組外（P＜0.05）外，其余各劑量組的血常規(guī)、血生化各項指標與對照組相比差異均無統(tǒng)計學意義，各劑量組動物臟體系數(shù)無異常，病理組織學檢查，被檢臟器均未見有病理改變。綜上所述，30 d短期喂養(yǎng)實驗結(jié)果表明：與陰性對照組相比，糖脂康對大鼠生長發(fā)育、代謝無不良影響。血常規(guī)、生化指標、臟體系數(shù)及病理檢查均未見異常，表明在本實驗劑量范圍內(nèi)，糖脂康對受試動物無短期毒副作用。有關(guān)糖脂康的經(jīng)口急性毒性試驗及Ames試驗、小鼠骨髓微核試驗、小鼠精子畸形試驗研究將另文報道。

表4 糖脂康30d喂養(yǎng)對大鼠臟器系數(shù)的影響（

表4 糖脂康30d喂養(yǎng)對大鼠臟器系數(shù)的影響（

性別 動物/ n 肝體系數(shù)/% 脾體系數(shù)/% 腎體系數(shù)/% 睪體系數(shù)/% 卵體系數(shù)/%雄雌劑量組/（mg/kg.BW）0.0 1 875 3 750 7 500 0.0 1 875 3 750 7 500 20 3.06±0.90 0.25±0.05 0.74±0.09 1.04±0.09 -20 3.00±0.59 0.21±0.03 0.74±0.09 1.05±0.20 -20 2.99±1.13 0.27±0.08 0.72±0.05 1.07±0.09 -20 3.05±1.58 0.26±0.05 0.74±0.04 1.11±0.16 -20 3.01±0.60 0.25±0.05 0.72±0.09 - 0.058±0.02 20 3.16±0.42 0.27±0.06 0.75±0.07 - 0.054±0.03 20 3.13±0.38 0.28±0.07 0.77±0.07 - 0.056±0.03 20 3.11±0.59 0.25±0.04 0.76±0.08 - 0.062±0.06

本實驗在云南省疾病預防控制中心協(xié)助下完成，特此致謝。

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（責任編輯 董 杰）

Study on 30-Days of Tangzhikang Tablets Feeding in SD Rats

ZUO Shaoyuan1,QIAN Jinfu2
（1.Pre-clinical College,Dali University,Dali,Yunnan 671000,China; 2.College of Pharmacy and Chemistry,Dali University,Dali,Yunnan 671000,China）

Objective:To observe the toxicological safety on functional food of Tangzhikang tablets.Methods:The SD ablactated rats were randomly divided into four groups.The control group was fed with basic diet.Three experimental groups were fed with basic diet mixed with Tangzhikang tablets with the dose of 1 875,3 750 and 7 500 mg/kg on body weight for 30 days,respectively.The corresponding indexes of each group were measured.Results:During and at the end of the experiment,the body weight,food utilization rate,full blood count,blood biochemistry,and organ/body weigh ratios had no significant differences among the four groups. Furthermore,the histopathological examination showed that there were no significant changes in liver,kidney,stomach,intestines, spleen,testicle and ovary among the 4 groups.Conclusion:Tangzhikang tablet has no acute toxic effect and is a safe functional food on rats'growth,development,metabolism and viscera organs.

Tangzhikang tablets;toxicological safety assessment;rat;30-day feeding study

R285.5

A

1672-2345（2012）06-0026-04

云南省科技廳科技計劃基金資助項目（GX10-2004）

2012-04-30

左紹遠，教授，主要從事生化藥理學研究.