兩煎常壓煎藥機(jī)制備去瘀生新湯質(zhì)量穩(wěn)定性研究

梁 盛

兩煎常壓煎藥機(jī)制備去瘀生新湯質(zhì)量穩(wěn)定性研究

梁 盛

目的探討兩煎常壓煎藥機(jī)在不同煎藥條件下對(duì)制備祛瘀生新湯質(zhì)量穩(wěn)定性的影響，以確定最佳制備工藝。方法采用L9(34)正交試驗(yàn)法，以祛瘀生新湯中主要有效成分丹酚酸B為考察指標(biāo)，采用高效液相色譜法測(cè)定有效成分的含量，對(duì)湯劑煎煮過程中的不同煎煮時(shí)間進(jìn)行比較分析。結(jié)果影響祛瘀生新湯質(zhì)量穩(wěn)定性的大小為A＞B＞C＞，可以看出C因素F值小于10，影響不顯著，B因素F值在19～99之間，為顯著影響，A因素非常顯著影響，F(xiàn)值大于99。祛瘀生新湯的最佳煎煮工藝為A2B1C3。即煎煮前加水500mL浸泡30 min后進(jìn)行煎煮，一煎煮沸30 min，二煎煮沸15 min制備的祛瘀生新湯工藝合理，可有效提取藥物有效成分。結(jié)論采用藥材煎煮前加水500mL浸泡30 min后進(jìn)行煎煮，一煎煮沸30 min，二煎煮沸15 min制備的去瘀生新湯工藝合理，可有效提取藥物有效成分。

祛瘀生新湯；質(zhì)量；穩(wěn)定性研究

近年來煎藥機(jī) 作為普通煎藥鍋的替代品具有煎煮中藥簡(jiǎn)便，封裝嚴(yán)密，中藥口服方便等特點(diǎn)，受到廣大患者的歡迎[1]。最初研發(fā)的煎藥機(jī)以單煎高壓式為主，這種煎藥模式在藥物的充分利用方面呈現(xiàn)出一定的缺點(diǎn)，受到多數(shù)制劑研究工作者的爭(zhēng)議[2]在常壓煎煮、自動(dòng)攪拌、自動(dòng)二煎等功能上新型兩煎常壓煎藥機(jī)表現(xiàn)最佳，更加符合傳統(tǒng)中藥煎煮原理[3]。對(duì)我院制備去瘀生新湯質(zhì)量上具有更加有利的特點(diǎn)。本研究利用兩煎常壓煎藥機(jī)煎煮受試方劑，在煎煮操作方法上根據(jù)《醫(yī)療機(jī)構(gòu)中藥煎藥室管理規(guī)范》要求并結(jié)合兩煎常壓煎藥機(jī)的特點(diǎn)[4]，對(duì)煎煮過程中的藥物侵泡、加水量、一煎煮沸時(shí)間、二煎煮沸時(shí)間進(jìn)行比較，并利用正交試驗(yàn)法優(yōu)選最佳煎煮條件，現(xiàn)將具體情況如下。

1 儀器與試藥

1.1儀器

本研究選用YFML20兩煎常壓煎藥機(jī)，為北京東華原醫(yī)療設(shè)備有限責(zé)任公司生產(chǎn)；1100高效液相色譜儀、VWD檢測(cè)器、110LC色譜工作站；(美國(guó)Agilent 公司)；UV-265 紫外分光光度計(jì)(日本島津公司)；KQ-50B 超聲提取器(昆山市超聲儀器有限公司)。

1.2試藥

祛瘀生新湯是我院根據(jù)生化湯改進(jìn)的湯劑，由當(dāng)歸、桃仁、益母草、川芎、蒲黃等9味藥材組成。中藥藥材均購(gòu)自廣州致信中藥飲片有限公司，丹酚酸 B 對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào):110722-200309，含量測(cè)定用) 。

2 方法及結(jié)果

2.3.1色譜條件

色譜柱為：LunaC18（250 mm×4.6mm，5μL）；流動(dòng)相: 乙腈—甲醇—甲酸—水（體積比為10∶30∶1∶59）；檢測(cè)波長(zhǎng)為286nm；流速為1.0mL/min。理論塔板數(shù)按丹酚酸B計(jì)算不低于2000。

2.3.2煎煮液制備

采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)法：祛瘀生新湯（以一劑藥為標(biāo)準(zhǔn)），①藥材煎煮前加水500mL浸泡30 min后進(jìn)行煎煮，一煎煮沸30min，二煎煮沸10 min；②藥材煎煮前加水500mL浸泡 30min后進(jìn)行煎煮，一煎煮沸 30min，二煎煮沸 15 min；③藥材煎煮前加水500mL浸泡30min后進(jìn)行煎煮，一煎煮沸30 min，二煎煮沸20min。選取二煎煎煮為主要考察因素，根據(jù)煎煮時(shí)間不同設(shè)計(jì)3個(gè)水平，以丹酚酸B為考察指標(biāo)，選用L9(34)正交試驗(yàn)法[5]，采用兩煎常壓煎藥機(jī)煎煮不同湯劑，并分裝成袋，每袋150ml，備用（見表1）。

表1正交試驗(yàn)因素水平表

2.3.3制備對(duì)照品溶液

將精密稱取的丹酚酸 B10mg，加水制成500μg/mL。

2.3.4供試品溶液制備

取各水平煎煮液2ml，放置于500ml容量瓶加水搖勻，并利用微孔濾過膜濾過，選用 0.45μm，濾液即為供試品溶液。

2.3.5線性關(guān)系考察

精密吸取丹酚酸B對(duì)照品10μL，置于高效液相色譜儀中，以峰面積為縱坐標(biāo)，丹酚酸B濃度為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，結(jié)果顯示丹酚酸 B檢測(cè)濃度在27～396μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好[6]。

2.3.6精密度試驗(yàn)

吸取對(duì)照品重復(fù)進(jìn)樣5次，記錄丹酚酸B峰面積積分值，結(jié)果得丹酚酸B峰面積積分值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差SR=1.34%。

2.3.7重復(fù)性試驗(yàn)及穩(wěn)定性試驗(yàn)

重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果測(cè)得丹酚酸 B平均含量為2.568mg/mL，SR=0.96%。穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果表明峰面積無變化，表明供試品在9h內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.3.8樣品中丹酚酸B含量測(cè)定

分別吸取對(duì)照品溶液及各類供試品溶液10μL，注入高效液相色譜儀中，以外標(biāo)法計(jì)算每份樣品中丹酚酸B的含量。

2.3.9正交試驗(yàn)方差分析

結(jié)果見表 2.結(jié)果顯示：影響去瘀生新湯質(zhì)量穩(wěn)定性的大小為A＞B＞C＞，可以看出C因素F值小于10，影響不顯著，B因素F值在19～99之間，為顯著影響，A因素非常顯著影響，F(xiàn)值大于99。祛瘀生新湯的最佳煎煮工藝為 A2B1C3。即煎煮前加水500mL浸泡30 min后進(jìn)行煎煮，一煎煮沸30 min，二煎煮沸15 min制備的去瘀生新湯工藝合理，可有效提取藥物有效成分。

表2 方差分析表

3 討論

傳統(tǒng)的煎藥機(jī)以單煎高壓式為主，這種煎藥模式在藥物的充分利用方面呈現(xiàn)出一定的缺點(diǎn)。在煎藥過程中先將中藥冷水侵泡15～30min，后進(jìn)行煎煮，煎煮的中藥能夠使藥物有效成分充分滲透，否則受熱凝固的組織蛋白質(zhì)會(huì)阻礙水分滲入影響藥物有效成分滲出[7]。但當(dāng)有效成分充分溶出后，煎藥時(shí)間與藥效即不成促進(jìn)作用，此外，侵泡時(shí)間過長(zhǎng)可導(dǎo)致藥物內(nèi)雜質(zhì)溶出，本研究將兩煎常壓煎藥機(jī)制備祛瘀生新湯為研究重點(diǎn)。采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)法，分別采用兩煎常壓煎藥機(jī)制成不同煎煮條件下的湯劑，觀察其結(jié)果。

結(jié)果方差分析表明：煎煮時(shí)間對(duì)藥物含量影響較大，且加熱煎煮時(shí)間不宜過長(zhǎng)。主要因素與氧化降解的酚酸，藥物在不加熱的情況下易于滲出有效成分，但侵泡時(shí)間過長(zhǎng)也不利于藥物的有效成分溶解，因溶劑用量取決于最終平衡濃度[8]。煎煮時(shí)間取決于藥材與溶劑最終平衡關(guān)系，將煎煮時(shí)間延長(zhǎng)會(huì)使提取物提高，但煎煮時(shí)間過長(zhǎng)則會(huì)破壞藥物的有效成分。因此，本研究一煎時(shí)間設(shè)定不超過30min。兩煎常壓煎藥機(jī)的 2次煎煮可形成新的濃度差。祛瘀生新湯是我院根據(jù)生化湯改進(jìn)的湯劑，由當(dāng)歸、桃仁、益母草、川芎、蒲黃、丹參等9味藥材組成。具有活血化瘀、溫經(jīng)止痛的功效，主治產(chǎn)后血虛受寒，惡露不行，小腹冷痛。用于治療胎盤殘留，人流及引產(chǎn)等陰道出血、子宮復(fù)舊不良，子宮內(nèi)膜炎，子宮肌瘤及肥大癥，宮外孕，產(chǎn)后尿潴留等癥。

綜上，利用兩煎常壓煎藥機(jī)在 2次煎煮條件下形成新的濃度差，促進(jìn)有效成分的滲出。祛瘀生新湯的最佳煎煮工藝即煎煮前加水500mL浸泡30 min后進(jìn)行煎煮，一煎煮沸30 min，二煎煮沸15 min制備的祛瘀生新湯工藝合理，可有效提取藥物有效成分。

[1]張芳華，田其學(xué).中藥煎藥機(jī)煎藥法與傳統(tǒng)煎藥法利弊談[J].湖南中醫(yī)雜志，2000，16(6)：51-52.

[2]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(一部)［M］.北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2010: 71.

[3]王會(huì)平,王會(huì)生.傳統(tǒng)煎藥與現(xiàn)代煎藥機(jī)煎藥的區(qū)別[J].遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2009,11（6）：217-218.

[4]姜黎濱.中藥煎藥機(jī)的應(yīng)用及發(fā)展方向探討[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志,2009,18（18）：2177-2178.

[5]袁世清，夏麗娜.傳統(tǒng)煎藥與煎藥機(jī)煎藥對(duì)比研究概述[J].實(shí)用中醫(yī)藥雜志,2011,27（1）：65-66.

[6]梁文能，肖毓芳，李彥.兩種煎藥方法對(duì)黃連解毒湯中黃芩苷含量的研究[J].國(guó)際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報(bào)，2008，l4(3)：72-75.

[7]馮欣.麻黃湯煮散顆粒湯劑與麻黃湯傳統(tǒng)湯劑的藥學(xué)比較研究[D].成都：中醫(yī)藥大學(xué)，2008：34.

[8]穆蘭澄，曹京梅，李冀湘.中藥煮散的歷史沿革與現(xiàn)代研究概述[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2008，14(7)：74.

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