膀胱移行細(xì)胞癌組織中XIAP蛋白的表達(dá)及其與患者臨床病理特征的關(guān)系

朱憶凌

[摘要] 目的 探討膀胱移行細(xì)胞癌組織（BTCC）中XIAP的表達(dá)及其與患者臨床病理特征的關(guān)系。 方法 免疫組化Envision二步法檢測60例BTCC標(biāo)本中XIAP的表達(dá)，并探討其與患者臨床病理特征的關(guān)系。另選擇同期30例正常的膀胱黏膜組織標(biāo)本作為對照。 結(jié)果 BTCC組織標(biāo)本中XIAP的陽性表達(dá)率明顯高于正常膀胱黏膜組織（χ2=31.42，P < 0.01）。BTCC組織中XIAP的表達(dá)與腫瘤數(shù)量、是否轉(zhuǎn)移、病理分級和臨床分期等臨床病理特征均無明顯的相關(guān)性（P > 0.05），而與腫瘤是否復(fù)發(fā)密切相關(guān)（P < 0.05）。 結(jié)論 XIAP基因與BTCC的發(fā)生和發(fā)展密切有關(guān)，作為判斷BTCC的術(shù)后復(fù)發(fā)和評估預(yù)后的獨立指標(biāo)，有望成為BTCC基因診療的新靶點。

[關(guān)鍵詞] 膀胱移行細(xì)胞癌；免疫組化；XIAP；臨床病理特征

[中圖分類號] R737.14[文獻標(biāo)識碼] B[文章編號] 1673-9701（2012）32-0081-02

膀胱癌是泌尿系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤，近年來發(fā)病率呈上升趨勢，到目前為止其發(fā)病機制尚未完全闡明。近年來已證實腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移和預(yù)后與腫瘤細(xì)胞的凋亡功能紊亂有密切關(guān)系[1]。XIAP是近年來新發(fā)現(xiàn)的一種凋亡抑制基因家族分子，在成人許多腫瘤組織或胚胎組織中高表達(dá)，而在正常組織中無明顯表達(dá)或表達(dá)較弱[2]。有關(guān)XIAP的抗腫瘤細(xì)胞凋亡的特性及其在腫瘤發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移和預(yù)后中的作用越來越引起醫(yī)學(xué)工作者的重視[3]。本研究初步探討了XIAP蛋白在膀胱移行細(xì)胞癌（BTCC）組織中表達(dá)及其與患者臨床病理特征的關(guān)系?，F(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源

選擇我院病理科2006年1月～2012年4月收集的BTCC患者的手術(shù)標(biāo)本共60例，其中男48例，女12例；年齡31～87歲，平均（59.4±6.1）歲，所有患者術(shù)前均未行放療或化療。另選擇同期在我院行開放手術(shù)時切除的正常膀胱黏膜標(biāo)本30例作為對照組。

1.2 免疫組化染色

采用免疫組化Envision二步法。石蠟切片常規(guī)脫蠟至水，3%H202室溫孵育15min阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，0.05%胰酶37°C消化15 min，正常血清封閉10 min，滴加1∶100稀釋的濃縮型XIAP一抗室溫孵育2 h，滴加二抗工作液37°C孵育30 min。各步驟間用磷酸鹽緩沖液（PBS）沖洗。DAB顯色，蘇木素復(fù)染，梯度酒精脫水、透明、封片和鏡檢。以已知陽性的乳腺癌組織切片作陽性對照，以PBS代替一抗作陰性對照。濃縮型XIAP兔抗人單克隆抗體和Envision免疫組化試劑盒均購自北京中山生物制品有限公司，按試劑盒中所附的操作步驟進行實驗。

1.3 結(jié)果判定

XIAP陽性染色定位于細(xì)胞質(zhì)，呈棕黃色顆粒，多為彌漫性分布，部分患者胞核輕度染色。根據(jù)高倍鏡視野下計數(shù)細(xì)胞的染色強度進行計分，其中無色計0分、淺色計1分、棕黃色計2分，褐色計3分；同時再根據(jù)計數(shù)細(xì)胞中陽性細(xì)胞所占比例進行計分，其中陰性計0分，陽性細(xì)胞比例≤10%計1分，陽性細(xì)胞比例11%～50%計2分，陽性細(xì)胞比例51%～75%計3分，陽性細(xì)胞比例>75%計4分。計算計數(shù)細(xì)胞染色強度計分和陽性細(xì)胞比例計分的乘積≥2分即為XIAP表達(dá)（+）。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 13.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行分析，采用χ2檢驗。

2 結(jié)果

2.1 BTCC和正常膀胱黏膜標(biāo)本中XIAP表達(dá)水平的比較

60例BTCC患者組織標(biāo)本中37例（61.67%）XIAP表達(dá)陽性。30例正常膀胱黏膜標(biāo)本XIAP表達(dá)均陰性。BTCC組織標(biāo)本中XIAP的陽性表達(dá)率明顯高于正常膀胱黏膜標(biāo)本（χ2=31.42，P < 0.01）。見圖1、2。

2.2 BTCC組織中XIAP的表達(dá)與患者臨床病理特征的關(guān)系

BTCC組織中XIAP的表達(dá)與腫瘤數(shù)量、是否轉(zhuǎn)移、病理分級和臨床分期等臨床病理特征均無明顯的相關(guān)性（P >0.05），而與腫瘤是否復(fù)發(fā)密切相關(guān)（P < 0.05）。見表1。

3 討論

腫瘤細(xì)胞的增殖和凋亡的平衡失調(diào)是引起腫瘤形成和發(fā)展的主要機制，凋亡蛋白抑制物（IAP）家族是一種具有廣泛表達(dá)細(xì)胞凋亡抑制物基因的家族，該基因家族成員均具有強大抑制細(xì)胞凋亡的功能。XIAP是近年來新發(fā)現(xiàn)的IAP家族的成員，在腫瘤細(xì)胞凋亡調(diào)控中起著重要作用。XIAP基因定位于Xq25，編碼分子量為55000，主要通過與caspase-3、caspase-7和caspase-9直接結(jié)合，抑制Caspase活性，從而對腫瘤細(xì)胞凋亡產(chǎn)生抑制作用，促進腫瘤的形成和發(fā)展，是目前已知最強的內(nèi)源性caspase抑制性基因[4]。XIAP幾乎于成人許多腫瘤組織和胚胎組織中均高表達(dá)，對腫瘤的形成、發(fā)展、惡變和轉(zhuǎn)移均發(fā)揮著重要作用[5，6]。

近年來XIAP基因在膀胱癌的形成、發(fā)展、惡性轉(zhuǎn)化和預(yù)后中的作用越來越引起人們的重視。宋濤等[7]研究發(fā)現(xiàn)60例BTCC組織中XIAP蛋白陽性表達(dá)率65.0%，正常膀胱黏膜組織均陰性。表明XIAP在BTCC的發(fā)生發(fā)展中起重要作用，可作為BTCC早期診斷和治療的標(biāo)記物。同時研究發(fā)現(xiàn)BTCC中XIAP的表達(dá)率和表達(dá)程度與癌細(xì)胞的病理分級和臨床分期無明顯關(guān)系；復(fù)發(fā)患者XIAP蛋白陽性表達(dá)率（90.5%）明顯高于原發(fā)性（51.3%），XIAP蛋白可用于膀胱癌術(shù)后復(fù)發(fā)預(yù)測、預(yù)后評估的指標(biāo)。董雪成等[8]研究發(fā)現(xiàn)XIAP在BTCC的發(fā)生、發(fā)展、惡變和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用，XIAP可作為BTCC臨床靶向治療的新靶點。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)BTCC標(biāo)本中XIAP的陽性率明顯高于正常膀胱黏膜標(biāo)本，表明BTCC組織中XIAP表達(dá)上調(diào)與膀胱癌的發(fā)生、發(fā)展和惡性轉(zhuǎn)化密切相關(guān)，抑制癌細(xì)胞的凋亡，促進膀胱癌的發(fā)生和發(fā)展。推測XIAP基因可能通過與caspase-3、caspase-7和caspase-9的直接結(jié)合，抑制caspase家族的活化，從而調(diào)控癌細(xì)胞凋亡，抑制癌細(xì)胞的凋亡，導(dǎo)致癌細(xì)胞增生和繁殖，延長癌細(xì)胞的生存期，增加癌細(xì)胞的基因突變率，參與BTCC的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移過程[9，10]。同時研究發(fā)現(xiàn)BTCC組織中XIAP的表達(dá)與腫瘤數(shù)量、是否轉(zhuǎn)移、病理分級及臨床分期等臨床病理特征無明顯的相關(guān)性，但BTCC的復(fù)發(fā)患者的XIAP的陽性表達(dá)率明顯高于初發(fā)的患者。表明XIAP的表達(dá)程度可作為判斷BTCC的術(shù)后復(fù)發(fā)和評估預(yù)后的獨立指標(biāo)。

總之，XIAP基因與BTCC的發(fā)生和發(fā)展密切有關(guān)，作為判斷BTCC的術(shù)后復(fù)發(fā)和評估預(yù)后的獨立指標(biāo)，有望成為BTCC基因診療的新靶點。

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（收稿日期：2012-06-18）