從過敏性鼻炎模型豚鼠免疫功能的變化評價(jià)玉屏風(fēng)散不同劑量配比的干預(yù)作用

粟 栗，張文風(fēng)，蘇 鑫

（長春中醫(yī)藥大學(xué)，吉林長春130117）

過敏性鼻炎屬中醫(yī)“鼻鼽”范圍，對于鼻鼽的病因病機(jī)，歷代醫(yī)家雖有不同的認(rèn)識，但大多認(rèn)為其內(nèi)因主要是臟腑功能失調(diào)，肺脾腎三臟虛損，以致氣虛不能衛(wèi)外，外因主要是風(fēng)邪侵襲，異氣之邪侵襲鼻竅。因其病位在鼻，肺開竅于鼻，故肺氣虛弱，衛(wèi)陽不固，風(fēng)邪外襲是其關(guān)鍵所在。玉屏風(fēng)散扶正祛邪，是益氣固本之經(jīng)典方，能夠調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫功能［1］，治療過敏性鼻炎［2-3］，但目前玉屏風(fēng)散出處較多，雖然功效相似，藥物劑量比例卻相差很多，比例不同則應(yīng)用各異［4］。本實(shí)驗(yàn)通過觀察玉屏風(fēng)散各單味藥不同劑量比例對過敏性鼻炎模型豚鼠行為學(xué)及免疫功能的影響，探尋臨床應(yīng)用此方治療過敏性鼻炎的最佳配比。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

中藥復(fù)方玉屏風(fēng)湯劑由黃芪、白術(shù)、防風(fēng)組成，由本校制劑室提供。血清IgE試劑盒由北京博奧森公司提供。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷慕ⅲ?］取Strain豚鼠75只，體重（300±20）g，適應(yīng)喂養(yǎng)1 w后，取其中10只為空白對照組，另外65只采用卵清蛋白致敏法制作過敏性鼻炎模型。每只豚鼠以卵清蛋白0.3 mg作為抗原，氫氧化鋁粉末30 mg作為佐劑，加生理鹽水1 mL制成混懸液，隔日灌胃1次，共7次，為基礎(chǔ)致敏。繼而以2 g/L卵清蛋白生理鹽水溶液滴鼻，每側(cè)10 μL，連續(xù)7 d。造模動物于末次鼻腔致敏30 min內(nèi)，采用“量化疊加記分法”對豚鼠行為學(xué)指標(biāo)進(jìn)行指標(biāo)評分，疊加總分≥5為造模成功。取造模成功豚鼠60只，隨機(jī)分為模型組，息斯敏組，玉屏風(fēng)散1組，玉屏風(fēng)散2組，玉屏風(fēng)散3組，玉屏風(fēng)散4組6組，每組10只。玉屏風(fēng)散1、2、3、4組根據(jù)比例給予玉屏風(fēng)散湯劑［10 mL/（kg·d）］，模型組和空白對照組給予等量生理鹽水，息斯敏組給予息斯敏［0.3 mg/（kg·d）］灌胃，連續(xù)給藥4 w。

1.2.2 行為學(xué)觀察 藥物連續(xù)胃飼4 w，給藥后每隔7 d，鼻部滴卵清蛋白生理鹽水，觀察30 min內(nèi)搔鼻次數(shù)、噴嚏次數(shù)和鼻涕程度，并對其行為學(xué)進(jìn)行評分。

1.2.3 血清IgE檢測 豚鼠麻醉后，腹主動脈采血，分離血清，ELISA法檢測血清中IgE含量。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

選用SPSS11.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，多組均數(shù)之間的比較來用方差分析，兩兩比較來用q檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 各組豚鼠行為學(xué)評分

結(jié)果見表1。

表1 各組豚鼠行為學(xué)評分比較 （±s）

表1 各組豚鼠行為學(xué)評分比較 （±s）

注：與模型組比較，1）P<0.05

組別 0 d 7 d 14 d 21 d 28 d空白對照組 - - - - -模型組 5.3±0.48 6.1±0.73 6.3±0.48 6.5±0.70 6.8±1.03息斯敏組 5.4±0.51 5.6±0.51 4.3±0.82 2.6±0.51 2.2±0.78 1）玉屏風(fēng)散 1 組 5.5±0.52 5.6±0.53 4.5±0.70 3.2±0.63 2.7±0.94 1）玉屏風(fēng)散 2 組 5.3±0.48 5.7±0.48 4.9±0.56 4.1±0.73 3.9±1.10 1）玉屏風(fēng)散 3 組 5.4±0.51 5.6±0.51 4.6±0.51 3.7±0.48 3.4±0.51 1）玉屏風(fēng)散 4 組 5.4±0.51 5.8±0.63 5.1±0.56 4.6±0.51 4.2±0.78 1）

由表1可見，空白對照組始終無明顯的鼻癢、噴嚏和清涕。模型組撓鼻、噴嚏的次數(shù)以及流清涕程度逐天增加。給藥第14天開始，玉屏風(fēng)散各組及息斯敏組豚鼠的鼻炎癥狀隨給藥時(shí)間的增加而逐漸減輕，好轉(zhuǎn)率逐漸提高。至給藥第21天，玉屏風(fēng)散各組豚鼠的鼻炎癥狀好轉(zhuǎn)率＞70%；給藥第28天時(shí)，玉屏風(fēng)散各組豚鼠的鼻炎癥狀好轉(zhuǎn)率＞80%。組間方差分析結(jié)果顯示，玉屏風(fēng)散各組與模型組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），其療效以第1組最佳，與息斯敏組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），玉屏風(fēng)散2、3、4、組與息斯敏組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

2.2 血清中IgE含量的變化

結(jié)果見表2。由表2可以看出，與空白對照組相比，模型組豚鼠血清IgE濃度明顯增高（P<0.01）。與模型組相比，玉屏風(fēng)散各組及息斯敏組豚鼠血清IgE濃度均有所減輕（P<0.05），玉屏風(fēng)散1組與息斯敏組對血清IgE含量的影響作用相當(dāng)。與息斯敏組相比，玉屏風(fēng)2、3、4組豚鼠血清IgE濃度較高（P<0.05）。

表2 豚鼠血清中IgE濃度比較 （±s）

表2 豚鼠血清中IgE濃度比較 （±s）

注：與空白對照組比較，1）P<0.01；與模型組比較，2）P<0.05；與息斯敏組相比，3）P<0.05

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3 討論

變應(yīng)性鼻炎（Allergic Rhinitis，AR），又稱過敏性鼻炎，是特應(yīng)性個體接觸致敏原后由IgE介導(dǎo)的介質(zhì)釋放，為開端的、有多種免疫活性細(xì)胞和細(xì)胞因子等參與的鼻黏膜慢性炎癥反應(yīng)性疾病，臨床主要表現(xiàn)為打噴嚏、流清涕、鼻塞和鼻癢。鼻癢、噴嚏是變態(tài)反應(yīng)性鼻炎的特征性外在臨床表現(xiàn)，也是I型變態(tài)反應(yīng)在鼻局部的集中癥狀，故而消除或減少局部癥狀是改善和調(diào)整I型變態(tài)反應(yīng)的客觀依據(jù)，也是構(gòu)成變態(tài)反應(yīng)性鼻炎的診斷和療效評定標(biāo)準(zhǔn)的主要內(nèi)容。

IgE是1966年發(fā)現(xiàn)的一類免疫球蛋白，又稱反應(yīng)素或親細(xì)胞抗體。IgE主要由呼吸道（鼻咽、扁桃體和支氣管）和消化道等處黏膜固有層中的漿細(xì)胞產(chǎn)生，這些部位也正是變應(yīng)原易于侵入和發(fā)生變態(tài)反應(yīng)的場所，因此IgE在哮喘、過敏性鼻炎以及其他變應(yīng)性疾病的發(fā)生發(fā)展中起著關(guān)鍵的介導(dǎo)作用［6］。

通過實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，玉屏風(fēng)散各組方給藥后均可以改善過敏性鼻炎模型豚鼠的鼻癢、噴嚏、清涕等癥狀，降低過敏性鼻炎模型豚鼠血清中IgE濃度，證實(shí)玉屏風(fēng)散對過敏性鼻炎模型豚鼠有較好的治療作用，當(dāng)黃芪∶白術(shù)∶防風(fēng)為3∶1∶1時(shí)效果最佳，為臨床治療提供了依據(jù)，其作用機(jī)理值得進(jìn)一步研究。

［1］粟栗.玉屏風(fēng)散中補(bǔ)氣與解表藥對小鼠細(xì)胞免疫功能的影響［J］.長春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，28（5）：380.

［2］顧珺，沈朝斌，陸磊.玉屏風(fēng)散對過敏性鼻炎動物模型的Th1/Th2影響［J］.中成藥，2006，28（8）：1163-1166.

［3］渠開虎，張敏敏.自擬加味玉屏風(fēng)散治療過敏性鼻炎的體會［J］.現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2005，14（16）：2113.

［4］劉青，楊雪.玉屏風(fēng)散不同劑量比例關(guān)系研究及治療上呼吸道感染概況［J］.云南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2008，31（3）：61-63.

［5］劉建國，楊政，劉月輝.變應(yīng)性鼻炎大鼠模型建造［J］.江西醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2008，48（5）：33-34.

［6］Leung，D Y.Molecular basis of allergic disease［J］.Mol Genet Metab，1998，63（3）：157-167.