泌尿生殖道感染解脲脲原體培養(yǎng)及耐藥性分析

高昆 韓倩

解脲脲原體（Ureaplasma urealyticum,Uu）是引起非淋球菌性泌尿生殖道感染（Nongonococcal urethritis,NGU）的主要病原體，近年來，由于抗生素的濫用，導(dǎo)致支原體對常用抗生素的耐藥性逐年上升，由于不同地區(qū)使用抗生素的種類和習(xí)慣不同，地區(qū)間也存在一定差異。為了解本地區(qū)支原體感染及耐藥情況，為臨床治療提供可靠依據(jù)，我們對2010年1月～2010年12月疑為NGU患者的泌尿生殖道標(biāo)本進(jìn)行支原體培養(yǎng)及耐藥性檢測，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料和方法

1.1 標(biāo)本來源 標(biāo)本來自2010年1月～12月我院皮膚性病科、婦科就診疑似支原體感染患者939例，男性626例，女性313例，年齡18～65歲。

1.2 標(biāo)本采集 常規(guī)消毒外陰后，男性標(biāo)本：用無菌棉拭子插入尿道2～3cm處，旋轉(zhuǎn)360度，停留15s獲得細(xì)胞后取出；女性標(biāo)本：以陰道窺器擴(kuò)張陰道后用無菌棉拭子取宮頸分泌物，標(biāo)本及時(shí)送檢。

1.3 試劑 采用珠海銀科醫(yī)學(xué)工程有限公司的支原體培養(yǎng)、鑒定、計(jì)數(shù)、藥敏一體化試劑，抗生素包括強(qiáng)力霉素（DOX）、美滿霉素（MIN）、環(huán)丙沙星（CPF）、氧氟沙星（OFL）、司帕沙星（SPA）、羅紅霉素（ROX）、阿奇霉素（AZI）、克拉霉素（CLA）、交沙霉素（JOS）和壯觀霉素（SPE）；培養(yǎng)陽性用固體支原體鑒定瓊脂培養(yǎng)基確證。

1.4 試驗(yàn)方法 將棉拭子插入培養(yǎng)液中充分振蕩并在瓶壁擠壓棉簽，使標(biāo)本滲入，充分混勻后吸取混有標(biāo)本的培養(yǎng)液100μl加入有蓋板條微孔中，加入礦物油，放入（36±1）℃恒溫箱培養(yǎng)，24h、48h分別觀察記錄結(jié)果。判斷原則：培養(yǎng)基不變色為陰性，無支原體生長；培養(yǎng)基由黃色變?yōu)榧t色且液體清亮，為有支原體生長。藥敏結(jié)果判斷：藥物低濃度孔和高濃度孔均不變色為敏感；高濃度孔不變色，低濃度孔變紅為中度敏感；兩孔均變紅為耐藥。固體培養(yǎng)基結(jié)果判斷：液體培養(yǎng)瓶微變紅時(shí)，滴加3滴20μl標(biāo)本在固體瓊脂平板上培養(yǎng)24～72h，在低倍鏡下見棕黑色海膽樣或油煎蛋樣菌落判斷為陽性。

2 結(jié)果

2.1 解脲脲原體培養(yǎng)結(jié)果 939例送檢標(biāo)本中，單純解脲脲原體陽性242例（25.7%），其中男性626例，陽性95例（15.2%），女性313例，陽性147例（47.0%）。

2.2 藥物敏感情況 選取單純解脲脲原體陽性且菌落計(jì)數(shù)≥104CCU/ml共177例，藥物耐藥率結(jié)果如下:強(qiáng)力霉素2.82%、美滿霉素3.95%、環(huán)丙沙星65.54%、氧氟沙星72.32%、司帕沙星37.29%、羅紅霉素49.15%、阿奇霉素38.42%、克拉霉素30.51%、交沙霉素3.95%和壯觀霉素40.68%。

2.3 解脲脲原體在固體培養(yǎng)基上的形態(tài)呈多樣性，以棕黑色海膽樣、油煎蛋樣多見。

3 討論

近年來，非淋球菌性泌尿生殖道感染在性傳播疾病中的比例逐年增加，解脲脲原體是引起非淋球菌性泌尿生殖道感染的主要病原體之一[1]。本次試驗(yàn)結(jié)果顯示，939例送檢標(biāo)本中，單純Uu陽性242例，陽性率為25.7%，與國內(nèi)其他地區(qū)報(bào)道［2-3］有所不同，這可能與檢測方法、檢測對象組成和標(biāo)本量有關(guān)。

本次檢測中，男性為626例，陽性率15.2%，女性為313例，陽性率為47.0%，女性患者的檢測例數(shù)少于男性，陽性率明顯高于男性患者，男女之間有顯著差異（x2=110，P＜0.01)。一方面，由于兩者的生理解剖特征不同，支原體的定植機(jī)會(huì)不同，形成男女支原體的檢出率有所差別，另一方面，與部分女性臨床癥狀不明顯，未引起足夠重視，未及時(shí)治療有關(guān)，因此，對疑有性病的女性患者應(yīng)及時(shí)進(jìn)行支原體的檢測。

由于目前Uu檢測多用液體培養(yǎng)基，根據(jù)顏色變化來判斷陰陽性，容易受到細(xì)菌等的干擾，產(chǎn)生假陽性的結(jié)果，我們用固體確證培養(yǎng)基轉(zhuǎn)種陽性液體培養(yǎng)基，根據(jù)培養(yǎng)基的菌落判斷陽性，發(fā)現(xiàn)菌落在培養(yǎng)基上顯示多樣性，以棕黑色海膽樣、油煎蛋樣多見，也有一些微小菌落，值得進(jìn)一步研究。

解脲脲原體由于沒有固定的細(xì)胞壁，對作用于細(xì)胞壁合成的抗生素如β-內(nèi)酰胺類抗生素等不敏感，臨床多采用四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類和氟喹諾酮類藥物治療。近年來由于Uu感染率的不斷增加及抗生素的不規(guī)范使用，導(dǎo)致Uu對上述藥物的耐藥性不斷增加。藥敏統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，Uu對10種常用抗生素的耐藥率中，強(qiáng)力霉素、美滿霉素和交沙霉素耐藥率較低，可作為經(jīng)驗(yàn)用藥的首選，環(huán)丙沙星、氧氟沙星、司帕沙星、羅紅霉素等耐藥率較高，與國內(nèi)報(bào)道［4］類似，不適合作為經(jīng)驗(yàn)用藥。

綜上所述，臨床在診斷Uu感染時(shí)，對疑似感染者可用固體確證培養(yǎng)基培養(yǎng)，以排除假陽性的標(biāo)本，治療Uu感染時(shí)，在用藥前進(jìn)行支原體的培養(yǎng)和藥敏試驗(yàn)，根據(jù)藥敏結(jié)果指導(dǎo)臨床合理使用抗生素，可提高治療成功率，減少耐藥菌株的產(chǎn)生。

［1］吳移謀，葉元康.支原體學(xué)［M］.2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2008:193-199.

［2］王勇，祝曉瑩，袁紅英，等.泌尿生殖道支原體感染及耐藥性研究［J］.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2009,19（6）：702-704.

［3］胡會(huì)霞，郭海波，張永軍，等.非淋病性生殖道感染解脲支原體培養(yǎng)及其耐藥性分析［J］.中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2008,18（11）：2295-2296.

［4］任小榮，陳冰，張書嶺，等.解脲支原體藥敏及對氟喹諾酮類藥物的耐藥機(jī)制研究［J］.中華實(shí)用診斷與治療雜志，2008,22（7）：511-515.