東亞五味子的木脂素類化學(xué)成分研究

楊黎彬，黃勝雄，普建新*，李麗梅，趙勇

(1.西安醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，陜西西安710021;2.中科院昆明植物研究所植物化學(xué)與西部植物資源持續(xù)利用國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南昆明650204)

近年來，本課題組從五味子科植物中分離得到了眾多結(jié)構(gòu)新穎的高氧化度三萜［1-5］。產(chǎn)自陜西秦嶺的東亞五味子Schisandra elongata(BI.)Baill.中化學(xué)成分尚未見相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，本實(shí)驗(yàn)首次對其進(jìn)行了次生代謝產(chǎn)物研究，從中分離得到8個(gè)已知木脂素類化合物schizantherin B(1)［6］，tigloylgomisin P(2)［7］，gomisin G(3)［7］，gomisin M1(4)［8］，gomisin K3(5)［9］，epigomisin O(6)［10］，gomisin J(7)［11］，pre-gomisin(8)［12］，從中沒有發(fā)現(xiàn)高氧化度的三萜。

1 藥材、儀器與材料

1.1 藥材東亞五味子Schisandra elongata(BI.)Baill.于2005年6月采自陜西省秦嶺豐裕口，由中國科學(xué)院昆明植物研究所李錫文研究員鑒定。植物標(biāo)本存放于昆明植物所植物化學(xué)與西部植物資源持續(xù)利用國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室。

1.2 儀器BruckerAM-400和DRX-500型核磁共振儀，TMS為內(nèi)標(biāo);VG Autospec-3000質(zhì)譜儀;Agilent 1100 HPLC，色譜柱為ZorbaxSB-C18(Agilent，4.6 mm×250 mm，1 mL/min;9.4 mm×250 mm，3 mL/min)，二極管陣列檢測器(DAD);Shimadazu LC-8A型制備HPLC，色譜柱為ShimadazuPRC-ODS(25 mL/min)，單波長紫外檢測器。

1.3 材料薄層硅膠板、柱層析硅膠均為青島海洋化工廠生產(chǎn);反相材料Lichroprep RP-18為Merk公司生產(chǎn);MCI GEL CHP20P(75～150 μm)日本Mitsubishi化學(xué)公司生產(chǎn);凝膠Sephadex LH-20為美國GE公司生產(chǎn)。

2 提取分離

東亞五味子干燥莖(3.5 kg)粉碎后在室溫下70%丙酮浸提3次，每次5 d。合并提取液減壓濃縮至無丙酮后，依次用石油醚、乙酸乙酯及正丁醇連續(xù)萃取3～4次，分別得到石油醚、乙酸乙酯和正丁醇提取物。

乙酸乙酯提取物(70 g)用80～100目硅膠80 g拌樣后，500 g硅膠干法裝柱，石油醚-丙酮(15∶1～1∶1)進(jìn)行梯度洗脫，TLC檢測合并相同部分，得到8個(gè)部分:Ⅰ～Ⅷ。第Ⅳ部分［石油醚-丙酮(8∶1)部分］反復(fù)用正相硅膠柱層析、RP-18、Sephadex LH-20以及半制備HPLC得到化合物1(6 mg)，2(11 mg)，3(9 mg)，4(12 mg)，5(15 mg)，6(8 mg)。第Ⅴ部分2.3 g［石油醚-丙酮(7∶1)部分］分離得到化合物7(35 mg)和8(15 mg)。

3 分離鑒定

化合物1:不定形粉末。FAB MS:m/z513［M-H］－。1H-NMR(acetone-d6，500 MHz)δ:6.87(1H，s，H-4)，5.73(1H，s，H-6)，1.87(1H，m，H-8)，2.32(1H，m，H-9α)，2.06(1H，overlap，H-9β)，6.47(1H，s，H-11)，0.95(3H，d，J=7.0 Hz，CH3-17)，0.83(3H，d，J=6.9 Hz，CH3-18)，3.45(3H，s，OCH3-1)，5.93和5.98(2 H，s，OCH2O)，3.79，3.81和3.87(各3H，s，OCH3-2，3，14)，5.96(1H，overlap，H-3')，1.54(3H，s，CH3-4')，1.81(3H，dd，J=7.1，1.4 Hz，CH3-5');13C-NMR(acetone-d6，125 MHz)δ:152.8(s，C-1)，135.9(s，C-2)，152.7(s，C-3)，112.3(d，C-4)，133.8(s，C-5)，81.2(d，C-6)，72.2(s，C-7)，37.7(d，C-8)，38.0(t，C-9)，135.3(s，C-10)，102.7(d，C-11)，149.7(s，C-12)，142.5(s，C-13)，142.9(s，C-14)，122.7(s，C-15)，124.6(s，C-16)，18.3(q，C-17)，14.9(q，C-18)，57.2，58.7，60.5和60.8(q，4(OCH3)，166.8(s，C-1')，128.9(s，C-2')，138.19(d，C-3')，20.3(q，C-4')，15.7(q，C-5')。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道［6］的化合物schizantherin B基本一致。

化合物2:不定形粉末。FABMS:m/z513［MH］－。1H-NMR(acetone-d6)δ:7.18(1H，s，H-4)，5.70(1H，s，H-6)，2.04(1H，overlap，H-8)，2.39(1H，brd，J=13.6 Hz，H-9α)，2.24(1H，overlap，H-9β)，6.81(1H，s，H-11)，1.33(1H，s，C-17)，1.29(1H，d，J=7.2 Hz，C-18)，3.77(3H，s，OCH3-1)，6.22(2H，s，OCH2O)，3.96，4.02和4.06(各3H，s，OCH3-2，3，14)，7.17(overlap，H-3')，2.04(s，CH3-4')，1.98(dd，J=7.1，1.4 Hz，CH3-5');13C-NMR(acetone-d6)δ:153.4(s，C-1)，142.0(s，C-2)，151.8(s，C-3)，107.2(d，C-4)，134.9(s，C-5)，78.0(d，C-6)，74.9(s，C-7)，47.5(d，C-8)，37.0(t，C-9)，136.3(s，C-10)，103.5(d，C-11)，150.2(s，C-12)，138.1(s，C-13)，142.3(s，C-14)，120.9(s，C-15)，123.5(s，C-16)，19.0(q，C-17)，17.8(q，C-18)，101.9(t，OCH2O)，56.1，59.8，60.6和60.8(q，4×OCH3)，166.6(s，C-1')，129.6(s，C-2')，137.8(d，C-3')，12.2(q，C-4')，14.3(q，C-5')。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道［7］的化合物tigloylgomisin P基本一致。

化合物3:無色晶體。FABMS:m/z535［MH］－。1H-NMR(acetone-d6)δ:6.92(1H，s，H-4)，5.95(1H，s，H-6)，2.15(1H，m，H-8)，2.75(1H，dd，J=13.8，9.4 Hz，H-9α)，2.28(1H，brd，J=13.8 Hz，H-9β)，6.81(1H，s，H-11)，1.23(3H，d，J=6.5 Hz，CH3-17)，1.33(3H，s，CH3-18)，3.37(3H，s，OCH3-1)，6.05和6.07(各1H，s，OCH2O)，4.00(3H，s，OCH3-12)，3.77(3H，s，OCH3-13)，3.14(3H，s，OCH3-14)，7.42(2H，d，J=7.2 Hz，H-3')，7.35(2H，t，J=7.2 Hz，H-4')，7.56(1H，t，J=7.2 Hz，H-5');13C-NMR(acetone-d6)δ:151.6(s，C-1)，137.5(s，C-2)，148.4(s，C-3)，107.7(d，C-4)，131.4(s，C-5)，85.6(d，C-6)，72.9(s，C-7)，43.3(d，C-8)，37.3(t，C-9)，138.1(s，C-10)，108.6(d，C-11)，154.4(s，C-12)，140.8(s，C-13)，142.0(s，C-14)，122.9(s，C-15)，123.5(s，C-16)，19.2(q，C-17)，29.2(q，C-18)，101.7(t，OCH2O)，60.9，60.7，58.6和57.8(q，4×OCH3)，130.2(s，OCO-Ph)，165.2(s，C-1')，130.2(d，C-2'，C-6')，128.9(d，C-3'，C-5').以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道［7］的化合物gomisin G基本一致。

化合物4:黃色塊狀結(jié)晶。FABMS:m/z385［M-H］－。1H-NMR(CDCl3)δ:6.51(1H，s，H-4)，2.58(1H，overlap，H-6a)，2.54(1H，overlap，H-6b)，1.89(1H，m，H-7)，1.78(1H，m，H-8)，2.04(1H，d，J=13.0 Hz，H-9a)，2.25(1H，dd，J=9.0，13.0 Hz，H-9b)，6.38(1H，s，H-11)，0.75(3H，d，J=7.1 Hz，CH3-17)，0.98(3H，d，J=7.0 Hz，CH3-18)，3.87，3.89，3.92(各3H，s，3×OCH3)，5.72(s，-OH)，5.93和5.96(各1H，s，OCH2O);13C-NMR(CDCl3)δ:140.9(s，C-1)，134.4(s，C-2)，148.8(s，C-3)，103.4(d，C-4)，138.3(s，C-5)，35.6(t，C-6)，40.7(d，C-7)，33.5(d，C-8)，39.2(t，C-9)，134.6(s，C-10)，107.2(d，C-11)，150.4(s，C-12)，133.5(s，C-13)，146.8(s，C-14)，116.6(s，C-15)，120.2(s，C-16)，12.9(q，C-17)，21.4(q，C-18)，100.7(t，OCH2O)，60.9，59.7，55.6(q，3×OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道［8］的化合物gomisin M1基本一致。

化合物5:黃色結(jié)晶。FABMS:m/z401［MH］－。1H-NMR(CDCl3)δ:6.57(1H，s，H-4)，2.48(1H，d，J=1.8，12.8 Hz，H-6α)，2.06(1H，d，J=12.8 Hz，H-6β)，1.90(1H，m，H-7)，1.89(1H，m，H-8)，2.26(1H，dd，J=9.6，13.6 Hz，H-9α)，2.57(1H，dd，J=7.6，13.6 Hz，H-9β)，6.37(1H，s，H-11)，0.99(3H，d，J=7.1 Hz，17-CH3)，0.74(3H，d，J=7.0 Hz，18-CH3)，3.92，3.90，3.88，3.87，3.63(各3 H，s，5×OCH3);13C-NMR(CDCl3)δ:151.0(s，C-1)，139.6(s，C-2)，152.9(s，C-3)，107.0(d，C-4)，139.5(s，C-5)，38.9(t，C-6)，33.5(d，C-7)，40.6(d，C-8)，35.5(t，C-9)，134.0(s，C-10)，107.5(d，C-11)，150.3(s，C-12)，133.6(s，C-13)，146.6(s，C-14)，116.7(s，C-15)，121.0(s，C-16)，12.5(q，C-17)，21.6(q，C-18)，61.4，60.8，60.7，55.7，55.5(q，5×OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道［9］的化合物gomisin K3基本一致。

化合物6:白色粉末。FABMS:m/z415［MH］－。1H-NMR(500Hz，acetone-d6)δ:7.00(1H，s，H-4)，4.56(1H，brs，H-6)，1.97(1H，overlap，H-7)，1.92(1H，m，H-8)，2.13(1H，m，H-9α)，2.01(1H，overlap，H-9β)，6.45(1H，s，H-11)，1.00(3H，d，J=6.0 Hz，CH3-17)，0.69(3H，d，J=6.5 Hz，CH3-18)，3.54(3H，s，OCH3-1)，5.93(2H，s，OCH2O)，3.83，3.84和3.87(各3H，s，OCH3-2，3，14);13C-NMR(125Hz，acetone-d6)δ:151.0(s，C-1)，140.5(s，C-2)，152.1(s，C-3)，106.2(d，C-4)，136.5(s，C-5)，73.3(d，C-6)，42.4(d，C-7)，39.2(d，C-8)，34.6(t，C-9)，137.8(s，C-10)，102.8(d，C-11)，149.0(s，C-12)，134.4(s，C-13)，140.7(s，C-14)，119.5(s，C-15)，121.2(s，C-16)，21.9(q，C-17)，7.7(q，C-18)，100.8(t，OCH2O)，60.9，60.6，59.2，55.9(q，4×OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道［10］的化合物epigomisin O基本一致。

化合物7:不定形粉末。FABMS:m/z387［M-H］－。1H-NMR(500Hz，acetone-d6)δ:6.45(1H，s，H-4)，2.41(1H，dd，J=13.5，7.8 Hz，H-6α)，2.30(1H，brd，J=13.5 Hz，H-6β)，1.63(1H，m，H-7)，1.75(1H，m，H-8)，2.10(1H，dd，J=12.8，10.0 Hz，H-9α)，1.90(1H，overlap，H-9β)，6.45(1H，s，H-11)，0.84(3H，d，J=7.1 Hz，CH3-17)，0.59(3H，d，J=7.0 Hz，CH3-18)，3.36(各3H，s，OCH3-1，14)，3.68(各3H，s，OCH3-2，13)，7.63和7.68(各1H，s，OH);13C-NMR(125Hz，acetone-d6)δ:150.9(s，C-1)，140.4(s，C-2)，152.2(s，C-3)，114.7(d，C-4)，135.0(s，C-5)，39.5(t，C-6)，42.1(d，C-7)，34.7(d，C-8)，35.8(t，C-9)，139.3(s，C-10)，111.4(d，C-11)，152.1(s，C-12)，139.5(s，C-13)，149.7(s，C-14)，122.0(s，C-15)，123.0(s，C-16)，21.9(q，C-17)，12.9(q，C-18)，60.1，60.1，60.9和60.9(q，4×OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道［11］的化合物gomisin J基本一致。

化合物8:白色固體。FABMS:m/z389［MH］－。1H-NMR(400Hz，acetone-d6)δ:6.89(2H，d，J=1.8 Hz，H-3，3')，6.55(2H，d，J=1.8 Hz，H-5，5')，2.82(2H，dd，J=13.2，5.0 Hz，H-7a，7'a)，2.33(2H，dd，J=13.2，9.6 Hz，H-7β，7'β)，1.92(2H，m，H-8，8')，0.87(6H，d，J=6.5 Hz，CH3-9，9');13C-NMR(100Hz，acetone-d6)δ:138.4(s，C-1，1')，151.9(s，C-2，2')，104.8(d，C-3，3')，135.5(s，C-4，4')，111.3(d，C-5，5')，154.0(s，C-6，6')，39.3(t，C-7，7')，39.6(d，C-8，8')，16.5(q，C-9，9')，55.9，55.9，60.5和60.5(q，4×OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道［12］的化合物pre-gomisin基本一致。

［1］Xiao W l，Yang L，Gong N B，et al.Rubriflordilactones A and B，two novel bisnortriterpenoids fromSchisandra rubrifloraand their biological activities［J］.Org Lett，2006，8(5):991-994.

［2］Pu J X，Xiao W L，Lu Y，et al.Kadlongilactones A and B，two novel triterpene dilactones fromKadsura longipedunculatapossessing a unique skeleton［J］.Org Lett，2005，7(22):5079-5082.

［3］Xue Y B，Yang J H，Li X N，et al.Henrischinins A C:three new triterpenoids fromSchisandra henryi［J］.Org Lett，2011，13(6):1564-1567.

［4］Li R T，Zhao Q S，Li S H，et al.Micrandilactone A，a novel triterpene fromSchisandra micrantha［J］.Org Lett，2003，5(7):1023-1026.

［5］Huang S X，Yang L B，Xiao W L，et al.Wuweizidilactones A-F:novel highly oxygenated nortriterpenoids with unusual skeletons isolated fromSchisandra chinensis［J］.Chemistry，2007，13(17):4816-4822.

［6］Ikeya Y，Taguchi H，Sasaki H，et al.The constituents ofSchizandra chinensisBaill.C-13 nuclear magnetic-resonance spectroscopy of dibenzocyclooctadiene lignans［J］.Chem Pharm Bull，1980，28(8):2414-2421.

［7］陳業(yè)高，秦國偉，謝毓元.滿山香化學(xué)成分的研究［J］.中國中藥雜志，2001，26(10):693-696.

［8］Hu Di，Wang Xiaokang，Cao Yunfeng，et al.Studies on the chemical constituents of the carpopodiums ofSchisandra chinensis(Turcz.)Baill.［J］.Asian J Tradi Medicines，2009，4(1):14-18.

［9］李蓉濤，韓全斌，鄭永唐，等.小花五味子中抗HIV活性的木脂素類化合物［J］.中國天然藥物，2005，3(4):208-212.

［10］Ikeya Y，Taguchi H，Yosioka I，et al.Constituents ofSchizandra chinensis Baill.Structures of 4 new lignans，gomisin N，gomisin O，epigomisin O and gomisin E，and transformation of gomisin-N to deangeloylgomisin-B［J］.Chem Pharm Bull，1979，27(11):2695-2709.

［11］陳海永，周長新，姚巍，等.北五味子中2種木脂素的NMR數(shù)據(jù)解析［J］.波譜學(xué)雜志，2005，22(1):43-54.

［12］Ikeya Y，Taguchi H，Yosioka I，et al.The constituents of Schizandra chinensisBaill.The structures of two new lignans:Pregomisin and Gomisin J［J］.Chem Pharm Bull，1978，26(2):682-684.