河南科技大學(xué)醫(yī)學(xué)技術(shù)與工程學(xué)院 楊建英
河南科技大學(xué)動物科技學(xué)院學(xué)院 李元曉
豆粕作為生產(chǎn)大豆油的副產(chǎn)品因其營養(yǎng)豐富是畜禽飼料的主要原料。但豆粕中存在多種抗?fàn)I養(yǎng)因子,降低了畜禽對豆粕中營養(yǎng)物質(zhì)的吸收和利用。通過發(fā)酵可以將豆粕中的抗?fàn)I并因子去除,能提高其營養(yǎng)價值。本文就近年來國內(nèi)外有關(guān)發(fā)酵豆粕的研究作一綜述。
目前我國豆粕生物降解生產(chǎn)工藝,主要有酶解法和微生物發(fā)酵法兩種,其中微生物發(fā)酵豆粕的技術(shù)方法主要包括固態(tài)發(fā)酵技術(shù)和液態(tài)發(fā)酵技術(shù)?;诃h(huán)保和經(jīng)濟方面的綜合考慮,對于低質(zhì)的豆粕發(fā)酵,目前多采用的是固體發(fā)酵,而液體發(fā)酵雖然能夠保證產(chǎn)品的優(yōu)良品質(zhì)和穩(wěn)定性,但是設(shè)備造價高,發(fā)酵過程中的廢液排放易造成環(huán)境污染,處理成本高,不易被采用。
生產(chǎn)的工藝條件對發(fā)酵豆粕產(chǎn)品質(zhì)量有很大影響,因此,需要對原料的狀態(tài)(如含水量、pH值、底物組成、料水比等)和發(fā)酵條件(發(fā)酵時間、菌種的組成和接種量、溫度、通氣量等)進行優(yōu)化。高愛琴和賈仙(2009)研究認為,較佳的發(fā)酵工藝是固體密閉無氧靜止發(fā)酵,基質(zhì)為豆粕,料水比為3∶2,起始溫度為40℃,起始pH自然,接種量發(fā)酵菌株1為0.005%,發(fā)酵菌株2為0.5%,發(fā)酵周期為5 d;在此條件下,發(fā)酵后的豆粕水解度達5%以上,鮮發(fā)酵物的酸度在4.5以上。莫重文和黃崗(2007)研究發(fā)現(xiàn),發(fā)酵溫度為28℃,發(fā)酵料組成為 100∶6(豆粕∶麩皮),接種菌配比為 1∶3(米曲霉∶酵母),接種量6%,發(fā)酵時間為72 h,發(fā)酵豆粕中粗蛋白質(zhì)含量可達49.10%,比原料中增加12.1%。楊旭等(2008)研究顯示,在接種量,7.5%,培養(yǎng)時間,54 h,料水比,1∶1,硫酸銨添加量,2%,葡萄糖添加量,1%時,發(fā)酵豆粕的蛋白質(zhì)含量從43.78%提高到53.33%。王金斌等(2009)研究發(fā)現(xiàn),最佳發(fā)酵條件為枯草芽孢桿菌M5094和熱帶假絲酵母C3161接種比例為1∶1,接種量為20%,基質(zhì)初始含水量為52%,發(fā)酵溫度為38℃,發(fā)酵時間為48 h。在此條件下,豆粕粗蛋白質(zhì)含量由31.75%升至49.27%。戚薇等(2008)利用納豆芽孢桿菌和凝結(jié)芽孢桿菌TQ33對豆粕進行固態(tài)發(fā)酵,結(jié)果表明,最適發(fā)酵工藝為先接納豆芽孢桿菌,發(fā)酵12 h后再接凝結(jié)芽孢桿菌,接種量為10%,兩菌比例為1∶1,發(fā)酵基質(zhì)中豆粕與麩皮質(zhì)量比為7∶3,初始含水量為 40%,初始 pH自然,37℃發(fā)酵48 h。發(fā)酵豆粕的蛋白質(zhì)水解度為20.14%,其中大多數(shù)肽類的分子質(zhì)量為620~1242 Da,降解率達95%;產(chǎn)品中含納豆芽孢桿菌1.0×109CFU/g,凝結(jié)芽孢桿菌9.2×107CFU/g,此外,其中還含有蛋白酶、短肽和乳酸等生物活性物質(zhì)。吳勝華等(2008)采用枯草芽孢桿菌、蠟樣芽孢桿菌、植物乳酸菌及酵母菌對普通豆粕進行二元混菌固態(tài)發(fā)酵,結(jié)果表明,豆粕經(jīng)過混菌發(fā)酵后小肽含量顯著提高,當(dāng)采用枯草芽孢桿菌和植物乳酸菌(KC-RS)組合,接種量為4%,料水比為1∶1.2,通氣量為60 g/mL,發(fā)酵溫度為40℃時,發(fā)酵豆粕中的小肽含量可達12.01%。馬文強等(2008)用枯草芽孢桿菌、釀酒酵母菌、乳酸菌對豆粕進行發(fā)酵,結(jié)果表明,微生物發(fā)酵使豆粕發(fā)生一定程度的分解,發(fā)酵后豆粕中高分子和中分子量蛋白質(zhì)含量下降,低分子蛋白質(zhì)含量提高,粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、磷和氨基酸的含量顯著高于發(fā)酵前,胰蛋白酶抑制因子和其他抗?fàn)I養(yǎng)因子得到了有效去除。朱曦和田慧文(2007)利用芽孢桿菌、酵母菌和乳酸菌混合發(fā)酵分解破壞豆粕中抗?fàn)I養(yǎng)因子,結(jié)果表明,在料水比為 1∶0.8 ~ 1.0,pH 為(7.0±0.2),溫度為(25±5)℃,發(fā)酵時間為72 h,48 h時翻料1次,翻料料溫為60℃左右的條件下發(fā)酵豆粕抗?fàn)I養(yǎng)因子被分解去除。
豆粕經(jīng)過發(fā)酵可將其中的抗?fàn)I養(yǎng)因子有效去除,同時,增加了益生菌、肽、氨基酸、活性酶、乳酸、維生素、大豆異黃酮等含量。進而使低質(zhì)的蛋白原料轉(zhuǎn)變?yōu)楦哔|(zhì)的蛋白原料,相比于普通豆粕,發(fā)酵豆粕具有以下優(yōu)點。
2.1 有效去除豆粕中的抗?fàn)I養(yǎng)因子 豆粕中含有大量的抗?fàn)I養(yǎng)因子,如胰蛋白酶抑制因子、脲酶(又稱尿素酶)、大豆凝血素等,這些物質(zhì)的存在均可危害動物健康。通過微生物發(fā)酵技術(shù),可有效去除豆粕中的抗?fàn)I養(yǎng)因子。鄭裴等(2009)采用植物乳桿菌固態(tài)發(fā)酵豆粕,對豆粕中抗?fàn)I養(yǎng)因子進行降解,結(jié)果表明,豆粕中尿素酶活由原來的0.373 U/g降至0.166 U/g,胰蛋白酶抑制劑含量由原來的40.42 mg/g降至 18.01 mg/g。 Hirabayashi和 Yano(1998)研究發(fā)現(xiàn),使用宇佐美曲霉發(fā)酵大豆粕,發(fā)酵后植酸全部被降解。馬文強等(2008)研究表明,經(jīng)過發(fā)酵豆粕胰蛋白酶抑制因子、脂肪氧化酶、大豆凝血素和致甲狀腺腫素均能被較完全降解。張麗靖等(2008)研究表明,在適宜條件下發(fā)酵后豆粕脲酶活性降低93%。歐陽亮等(2008)研究報道,大豆蛋白中大多數(shù)抗?fàn)I養(yǎng)因子的分子質(zhì)量集中在35~600 kD,發(fā)酵處理后43 kD以上的大分子蛋白質(zhì)大部分被降解,20 kD~43 kD的大分子幾乎全部被降解為14.4 kD以下,這說明微生物發(fā)酵法確實能夠降解豆粕中的大部分抗?fàn)I養(yǎng)因子。Feng等(2007)研究發(fā)現(xiàn),豆粕經(jīng)米曲霉3.042(產(chǎn)蛋白酶菌)發(fā)酵后胰蛋白酶抑制因子被完全消除。
2.2 蛋白質(zhì)含量顯著增高 豆粕發(fā)酵過程中,微生物大量繁殖,將豆粕培養(yǎng)基中的非蛋白氮、培養(yǎng)基無機氮(硫酸銨或尿素)及抗?fàn)I養(yǎng)因子等各種物質(zhì)分解利用,轉(zhuǎn)化為營養(yǎng)價值高的菌體蛋白。程秋根等(2008)研究報道,去皮豆粕經(jīng)發(fā)酵后粗蛋白質(zhì)含量提高12.38%。蔡國林等(2008)研究表明用酵母菌和乳酸菌混合發(fā)酵豆粕后蛋白質(zhì)含量從46.2%提高到49.7%,氨基酸組成和含量也有所變化和提高。馬文強等(2008)研究發(fā)現(xiàn),發(fā)酵后豆粕中小于25 kD的低分子蛋白質(zhì)含量,比發(fā)酵前提高2.25倍。張紅和褚西寧(1996)研究表明,豆粕固態(tài)發(fā)酵后的產(chǎn)品經(jīng)檢測其蛋白質(zhì)含量幾乎較先前有提高;而且經(jīng)過微生物酶的作用,使發(fā)酵豆粕的必需氨基酸含量較普通豆粕豐富,結(jié)構(gòu)更加合理。湯紅武(2003)等認為這主要是因為在發(fā)酵過程中,酵母的呼吸作用消耗了部分有機物料,使產(chǎn)物總量減少,蛋白質(zhì)含量相對提高,出現(xiàn)了蛋白質(zhì)的“濃縮效應(yīng)”;還有部分增加的蛋白質(zhì)是酵母菌體含有的蛋白質(zhì)和發(fā)酵過程中硫酸銨經(jīng)由酵母轉(zhuǎn)化生成的。
2.3 產(chǎn)生肽 豆粕通過微生物的降解,可產(chǎn)生具有特殊功能的營養(yǎng)肽。肽的吸收具有吸收快、能耗低、效率高、載體不易飽和等優(yōu)點。大豆肽還能賦予產(chǎn)品特殊生物活性,如促生長、調(diào)節(jié)免疫、抗菌、抗病毒、催乳、抗氧化、刺激食欲、促進礦物質(zhì)吸收和抗腫瘤。大豆肽的開發(fā)開創(chuàng)了動物營養(yǎng)的新紀(jì)元,豐富了大豆制品的種類,增加了大豆產(chǎn)品的附加值(Netto和 Galeazzi等,2008)。劉喚明和鄧楚津(2006)研究表明,使用枯草芽孢桿菌發(fā)酵豆粕生產(chǎn)大豆多肽,豆粕的蛋白水解度達60%。
2.4 富含多種生物活性物質(zhì) 豆粕發(fā)酵過程中產(chǎn)生的益生菌和乳酸,一方面能抑制腸道中有害菌的繁殖,另一方面可促進動物消化,改善動物小腸機能,減少仔豬等幼畜酸化劑的用量。微生物代謝產(chǎn)生蛋白酶、淀粉酶、纖維素酶等各種消化酶,可促進豆粕中蛋白質(zhì)和一些多糖類物質(zhì)的降解,提高消化率。另外,微生物代謝物中還可產(chǎn)生對動物有直接營養(yǎng)作用的未知生長因子、維生素等,對促進營養(yǎng)物質(zhì)消化,提高動物免疫機能有積極意義。
由于在豆粕發(fā)酵過程中加入了很多有益微生物,因此,發(fā)酵結(jié)束后,經(jīng)測定發(fā)酵物料中含有大量的有益微生物菌群,而菌種類主要取決于發(fā)酵前物料中所添加的微生物,常見的有芽孢菌、酵母菌、乳酸菌,這些益生性微生物對于改善畜禽腸道微生態(tài)環(huán)境具有非常重要的作用。陳文靜(2004)對發(fā)酵后的豆粕進行測定,發(fā)現(xiàn)乳酸菌數(shù)達到107CFU/g。除此之外,發(fā)酵豆粕還含有乳酸、各種酶等活性物質(zhì)。目前國內(nèi)發(fā)酵豆粕中乳酸含量多數(shù)大于2%。周伏忠(2007)等研究發(fā)現(xiàn),乳酸桿菌、芽孢桿菌以及曲霉菌均能利用發(fā)酵過程中自身分泌的蛋白酶來分解豆粕的大分子蛋白質(zhì),且蛋白酶活性大于200 U/g。
2.5 改善適口性 豆粕發(fā)酵后由于可溶性肽類和游離氨基酸以及酸性物質(zhì)增加,使得發(fā)酵產(chǎn)物氣味醇香,適口性提高動物,采食量增加。吳暉等(2008)研究發(fā)現(xiàn),豆粕在28~32℃下經(jīng)枯草芽孢桿菌發(fā)酵后具有或淡或濃郁的醇香氣味。發(fā)酵產(chǎn)物的氣味酸香,發(fā)酵過程中蛋白質(zhì)水解產(chǎn)生的可溶性肽類和游離氨基酸能提高發(fā)酵產(chǎn)物的適口性(Douamba 等,2012)。 Omafuvbe 等(2009)研究認為,混合發(fā)酵中的非優(yōu)勢菌主要是起調(diào)節(jié)風(fēng)味的作用。Refstie等(2011)用乳酸菌發(fā)酵豆粕,發(fā)現(xiàn)精氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸和纈氨酸含量上升,而亮氨酸、賴氨酸和苯丙氨酸含量下降。
發(fā)酵豆粕資源豐富、價格低廉、無化學(xué)殘留、應(yīng)用安全、營養(yǎng)性能好,在飼料中可替代部分魚粉,緩解了我國優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)飼料原料不足的現(xiàn)狀,經(jīng)濟效益顯著。
但是目前發(fā)酵豆粕的研究還存在以下幾方面問題:(1)發(fā)酵豆粕營養(yǎng)特性的研究還不夠全面;(2)發(fā)酵豆粕產(chǎn)品在動物生產(chǎn)中的應(yīng)用研究還應(yīng)進一步拓展和深入,應(yīng)加強其機理研究;(3)不同發(fā)酵菌種和發(fā)酵條件下產(chǎn)生的發(fā)酵豆粕質(zhì)量差異很大,因此,優(yōu)良的發(fā)酵菌種和適宜的發(fā)酵條件還有待進一步研究和摸索;(4)應(yīng)盡快統(tǒng)一和規(guī)范其質(zhì)量指標(biāo)和分級標(biāo)準(zhǔn)。
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