畜牧獸醫(yī)科技文摘

奶牛乳房炎金黃色葡萄球菌基因多態(tài)性分型試驗/鄧海平（中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院新獸藥工程重點開放實驗室甘肅省新獸藥工程重點實驗室，甘肅蘭州 730050），倪春霞，蒲萬霞//中國獸醫(yī)學(xué)報.-2011，31(6).-891～898

利用隨機引物AP-7，建立引物隨機多態(tài)性擴增(RAPD)體系對71株引起內(nèi)蒙古和貴州地區(qū)奶牛乳房炎的金黃色葡萄球菌分離株進行基因分型研究。結(jié)果表明，71株金黃色葡萄球菌均得到清晰的RAPD指紋圖譜，擴增產(chǎn)物為2～9條帶，產(chǎn)物大小為240～4 500bp。菌株共分為6個基因型，其中Ⅰ型17株(占23.9%)、Ⅱ型3株(占4.2%)、Ⅲ型33株(占46.5%)、Ⅳ型15株(占21.1%)、Ⅴ型2株(占2.8%)、Ⅵ型2株(占2.8%)。Ⅰ型為內(nèi)蒙古地區(qū)的流行優(yōu)勢菌群，Ⅲ型為貴州地區(qū)的流行優(yōu)勢菌群。兩地區(qū)各基因型菌株比例有明顯差異，這可能與奶牛養(yǎng)殖業(yè)水平和環(huán)境差異有關(guān)。

大鼠感染微小隱孢子蟲后小腸、腎及肺臟病理學(xué)變化/劉德義（安徽科技學(xué)院，安徽鳳陽 233100），顧有方， 李升和…//中國獸醫(yī)學(xué)報.-2011，31(6).-880～883

將40只SPF級SD大鼠隨機均分為地塞米松免疫抑制感染組和對照組n=20，免疫抑制感染組大鼠一次性接種1×106個/L微小隱孢子蟲卵囊液1mL，空白對照組接種1mL滅菌生理鹽水。于試驗結(jié)束后宰殺大鼠，立即剖檢取小腸、脾、肺，Bouin液固定，常規(guī)石蠟切片，HE染色，奧林巴斯顯微攝影系統(tǒng)觀察并顯微攝影。結(jié)果顯示，免疫抑制感染組大鼠小腸絨毛和腸腺受損嚴重，數(shù)量明顯減少，結(jié)構(gòu)模糊，絨毛上皮細胞和腸腺細胞明顯腫脹、解體，細胞結(jié)構(gòu)消失;腎臟腎小體數(shù)量減少，有的血管球明顯萎縮甚至碎解，腎小囊腔明顯增大，有的腎小囊壁層細胞的連續(xù)性遭到破壞;肺臟肺泡隔明顯增厚，充血現(xiàn)象嚴重，肺泡隔內(nèi)的細胞萎縮，胞核固縮，細胞結(jié)構(gòu)模糊。試驗結(jié)果表明，微小隱孢子蟲對大鼠小腸、腎和肺等器官的組織結(jié)構(gòu)具有明顯損傷作用，進而影響大鼠的消化吸收、泌尿和呼吸等功能。

柴胡舒肝湯對脂肪肝模型動物的影響/張 雨，（吉林大學(xué)和平校區(qū)門診部，吉林長春 130062）韋 倩//中國獸醫(yī)學(xué)報.-2011，31(6).-870～874

采用高脂日糧飼喂海蘭褐蛋公雛，制作脂肪肝動物模型，再以柴胡舒肝湯進行干預(yù)。結(jié)果顯示，試驗組雞只逐漸出現(xiàn)類似脂肪肝綜合征的臨床癥狀，實驗室檢驗血清呈黃色稠膏凝脂狀，血脂含量顯著升高，剖檢肝臟腫大呈土黃色澤，肝臟脂肪含量明顯升高，表明以高脂日糧加丙基硫氧嘧啶人工造模成功。中藥預(yù)防組在其飲水中加入4.5mL柴胡舒肝湯，結(jié)果較好地對抗了高脂日糧與丙基硫氧嘧啶的作用，試驗雞沒有出現(xiàn)相應(yīng)臨床癥狀與實驗室檢驗指標(biāo)，表明柴胡舒肝湯對高脂日糧加丙基硫氧嘧啶所致脂肪肝有預(yù)防作用。對已發(fā)生脂肪肝病變的雞以柴胡舒肝湯進行治療，使相關(guān)臨床癥狀逐步消失，肝臟病變與其他檢驗指標(biāo)得到恢復(fù)，表明柴胡舒肝湯對高脂日糧加丙基硫氧嘧啶所致脂肪肝有治療作用，可將在其飲水中加入4.5mL柴胡舒肝湯作為推薦劑量。試驗中沒有發(fā)現(xiàn)動物對柴胡舒肝湯呈現(xiàn)不良反應(yīng)。

重慶地區(qū)家畜附紅細胞體分子流行病學(xué)調(diào)查及危險性因素/聶 奎（西南大學(xué)動物科技學(xué)院，重慶北碚 400715），周作勇，周榮瓊…//中國獸醫(yī)學(xué)報.-2011，31(6).-848～851

本試驗對重慶地區(qū)牛、豬和羊附紅細胞體進行分子流行病學(xué)調(diào)查及危險性因素分析。在2006～2008年期間，采用鮮血壓片法、姬姆薩染色法和基于16SrRNA-PCR方法，共檢測了307頭份牛血樣，檢測陽性率分別為46%、48%和11%;檢測豬血樣1 658頭份，檢測陽性率分別為63%、68%和76%;檢測羊血樣1 191份，檢測陽性率分別為61%、70.4%和16.1%。危險性因素分析結(jié)果顯示，山區(qū)牛附紅細胞體感染陽性率極顯著高于丘陵地區(qū)(OR=16.03，95%CI=5.47～17.11)(P<0.01)，山區(qū)豬和山羊附紅細胞體感染陽性率顯著高于丘陵地區(qū)(豬:OR=1.38，95%CI=1.06～1.79;羊:OR=1.43，95%CI=0.54～3.82)(P<0.05)。農(nóng)戶散養(yǎng)牛和豬的附紅細胞體感染陽性率極顯著高于規(guī)模化養(yǎng)殖(牛:OR=3.2，95%CI=1.48～6.89;豬:OR=2.28，95%CI=1.79～2.89)(P<0.01)。農(nóng)戶散養(yǎng)山羊附紅細胞體感染陽性率高于規(guī)?；B(yǎng)殖場(OR=1.19，95%CI=1.09～1.54)(P>0.05)，但差異不顯著。

云南省不同宿主H9N2感染調(diào)查和NA分子進化分析/張泉鵬（成都軍區(qū)疾病預(yù)防控制中心，云南昆明 65003），李作生，鮑曉偉…//中國獸醫(yī)學(xué)報.-2011，31(6).-828～834

2006年6月-2007年10月，從云南省16個地州隨機采集的各種家禽、家豬的喉氣管和口腔棉拭子樣品7 901份，應(yīng)用RT-PCR結(jié)合血凝、血凝抑制試驗和抗原捕捉ELISA，檢測H9N2亞型禽流感感染情況，選擇具有代表性的陽性樣品，克隆NA全基因并進行基因序列分和推導(dǎo)氨基酸的糖基化位點分析。結(jié)果表明，云南省2006～2007年H9N2亞型禽流感病毒在全省14個地州均有流行，感染宿主包括雞、鴨、鵝和豬;分離的19個毒株中的13個雞源和1個鵝源毒珠的NA全基因長1 407bp，編碼469個氨基酸，同源性為96.1%～99.6%，是目前云南省流行的優(yōu)勢亞群;3個鴨源毒株、1個鵝源和1個豬源毒株NA基因長1 398bp，編碼466個氨基酸，5個非雞源毒株的NA基因的同源性為99%，構(gòu)成云南目前流行的另一分支，推導(dǎo)氨基酸第61～63位3個氨基酸的缺失是與優(yōu)勢分支的特征性區(qū)別;2個分支間NA基因同源性為90%，與國內(nèi)外其他毒株比較神經(jīng)氨酸酶基因序列具有多態(tài)性。

山羊痘、羊口瘡及山羊傳染性胸膜肺炎混合感染的檢測與分析/顏新敏（中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所家畜疫病病原生物學(xué)國家重點實驗室農(nóng)業(yè)部畜禽病毒學(xué)重點開放實驗室農(nóng)業(yè)部草食動物疫病重點開放實驗室，甘肅蘭州730046），儲岳峰，吳國華…//中國獸醫(yī)學(xué)報.-2011，31(6).-809～813

利用特異性PCR方法從病山羊組織病料中分別擴增山羊痘病毒、羊口瘡病毒和山羊支原體山羊肺炎亞種特異性片段，繼而將擴增的特異性片段克隆、測序，并與GenBank上相應(yīng)的基因序列進行比對、繪制系統(tǒng)進化樹，進行流行病學(xué)分析。結(jié)果表明，從病山羊中可同時擴增出山羊痘病毒、羊口瘡病毒和山羊支原體山羊肺炎亞種特異性片段，并通過基因序列比對分析確證了PCR檢測結(jié)果，首次證實我國存在山羊痘、羊口瘡及山羊傳染性胸膜肺炎的混合感染，為我國現(xiàn)階段羊病的流行病學(xué)和有效防制措施的制定提供了參考依據(jù)。

禽多殺性巴氏桿菌ompa DNA疫苗在小鼠體內(nèi)免疫效果試驗/牛明福（河南科技大學(xué)，河南洛陽 471003），宮 強，秦翠麗…//中國獸醫(yī)學(xué)報.-2011，31(6).-799～803

應(yīng)用PCR技術(shù)擴增獲得禽多殺性巴氏桿菌的ompa基因片段，克隆到pUCm-T載體，再亞克隆到真核表達質(zhì)粒載體pCDNA3.1(+)上，構(gòu)建重組質(zhì)粒pcA，體外轉(zhuǎn)染Vero細胞，RT-PCR和間接免疫熒光試驗檢測其轉(zhuǎn)錄表達情況。動物免疫分為3組:pCDNA3.1(+)組、PBS對照組和pcA組，每組16只BALB/c小鼠，pCDNA3.1(+)組和pcA組以100μg/只的劑量肌注免疫，PBS組每只小鼠肌注100μL 1×PBS，各組均免疫3次，每次間隔2周。間接ELISA檢測免疫后小鼠血清特異性抗體水平，MTT法檢測免疫小鼠脾淋巴細胞增殖情況，三免2周后檢測脾淋巴細胞IFN-γ分泌情況。強毒攻擊，計算小鼠存活數(shù)目及保護率。結(jié)果顯示，間接免疫熒光試驗和RT-PCR檢測結(jié)果均表明pcA可在體外培養(yǎng)的Vero細胞中表達目的蛋白。動物免疫后，pcA組免疫小鼠血清抗體水平持續(xù)上升，與pCDNA3.1(+)組和PBS組相比差異極為顯著(P<0.01)。經(jīng)提取的禽多殺性巴氏桿菌總外膜蛋白(Omps)刺激后，pcA組的刺激值(SI值)與pCDNA3.1(+)組及PBS免疫組相比均差異顯著(P<0.05)。脾細胞產(chǎn)生的IFN-γ極顯著高于兩對照組(P<0.01)。強毒攻擊后pcA組保護率明顯高于兩對照組，可達60%。結(jié)果表明，成功構(gòu)建了禽多殺性巴氏桿菌ompa DNA疫苗，該疫苗可誘導(dǎo)免疫小鼠產(chǎn)生較強的體液和細胞免疫應(yīng)答及一定的保護效果。

山西豬源基因Ⅰ型乙型腦炎病毒的分離與鑒定/曹齊樹（華中農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)微生物學(xué)國家重點實驗室，湖北武漢430070），錢 平，朱巧艷…//中國獸醫(yī)學(xué)報.-2011，31(5).-696～696，702

利用RT-PCR技術(shù)從2009年山西運城某豬場疑似乙型腦炎仔豬腦組織擴增出乙型腦炎病毒pr M和E基因，采取病樣通過BHK-21細胞傳代，分離到1株病毒。間接免疫熒光和RT-PCR進一步證實該病毒為豬源乙型腦炎病毒，并命名為SX09S-01。根據(jù)pr M基因繪制的進化樹表明SX09S-01毒株屬于基因Ⅰ型，E基因與SA-14、SA-14-14-2、P3、HW和XJ69株的核苷酸同源性分別為88%，87%，88%，88%，98%，其蛋白具有強毒株典型特征。

H9N2亞型禽流感病毒西藏分離株的全基因組遺傳進化分析/索朗斯珠（華中農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)微生物國家重點實驗室，湖北武漢 430070），鄒 威，王 燦…//中國獸醫(yī)學(xué)報.-2011，31(5).-668～673

根據(jù)GenBank登陸的H9N2亞型AIV全基因組序列，設(shè)計了8對引物，運用RT-PCR的方法獲取了3株H9N2亞型AIV西藏分離株A/Chiken/Tibet/S1/2009、A/Duck/Tibet/S2/2009和A/Chiken/Tibet/S4/2009的8個基因序列，并對所得序列進行同源性及遺傳進化分析。結(jié)果顯示，分離毒株的各基因片段均有完整的開放閱讀框，HA基因裂解位點處均為RSSR/G，符合低致病性禽流感的特征;3株西藏分離毒株之間同源性為98%～99%，可能起源于同一種系;各分離毒的HA、NS和NA基因與歐亞分支A/Chiken/Beijing/1/94分支中的A/Duck/HongKong/Y280/97遺傳距離最近，而M、NP、PA、PB1和PB2基因與歐亞分支中另一分支A/Quail/HongKong/G1/97群系遺傳關(guān)系近。由此可見3株分離株的各基因所屬分支不具有統(tǒng)一性，說明本研究所分離的3株H9N2亞型AIV西藏分離毒株可能是來源于不同亞系A(chǔ)IV的毒株在感染同一種宿主時發(fā)生基因重排的產(chǎn)物。

野生樹鼩寄生蟲感染調(diào)查/楊建發(fā)（云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，昆明 650201），馬玉華，呂龍寶…//中國動物傳染病學(xué)報.-2011，19(2).-73～74

為了解野生樹鼩的寄生蟲感染狀況，剖檢昆明市西郊野外捕獲的3只樹鼩(雄性1只、雌性2只)后進行寄生蟲檢查。結(jié)果顯示，雌性樹鼩的體表和體內(nèi)均未檢出寄生蟲，在雄性樹鼩的腸道發(fā)現(xiàn)嚴重絳蟲感染，共檢出蟲體16條，經(jīng)鑒定為長膜殼絳蟲(Hymenolepis diminuta)，絳蟲總重量為3.4 g，占該樹鼩體重的3.6%。

1991～2010年江蘇省世業(yè)鎮(zhèn)牛血吸蟲感染情況調(diào)查/任雪楓（江蘇省動物疫病預(yù)防控制中心，南京20110036），高 升，包新奇…//中國動物傳染病學(xué)報.-2011，19(2).-69～72

本文報告了江蘇省鎮(zhèn)江市丹徒區(qū)世業(yè)鎮(zhèn)1991～2010年牛血吸蟲感染情況。世業(yè)鎮(zhèn)牛血吸蟲感染率在不斷反復(fù)中逐漸降低，到2006年下降至0。在1994～1998年和2002～2005年出現(xiàn)不同程度的反彈，經(jīng)分析與江水水位變化有密切的關(guān)系。觀測結(jié)果說明江蘇省取得了顯著血防效果，但血吸蟲病防控仍是一項長期任務(wù)。

上海及周邊地區(qū)豬圓環(huán)病毒2型基因型分析/劉 ?。ㄉ虾Ｊ袆游镆卟☆A(yù)防控制中心，上海 201103），周錦萍，王建…//中國動物傳染病學(xué)報.-2011，19(1).-27～30

采集上海及周邊地區(qū)豬內(nèi)臟樣本，進行豬圓環(huán)病毒2型(Porcine circovirus type 2， PCV22)病原學(xué)檢測，并對陽性樣本的ORF2序列進行分析和比對。結(jié)果顯示，發(fā)病豬群PCV22陽性率為39. 06% (25 /64) ，健康豬群陽性率為13. 51% (5 /37) ， PCV22總陽性率為29. 70% ( 30 /101) 。30份陽性樣本中PCV22a亞型為2株，檢出率為1. 98 % (2 /101) ，其余28株均為PCV22b亞型，檢出率為27. 72% (28 /101) 。PCV22的ORF2序列與已登錄的ORF2序列的同源性在90.7% ～100%。2株P(guān)CV22a株相互間的同源性為99. 6%; 28株P(guān)CV22b株的同源性在94.4%～100% ， PCV22b株中只有4株與已登錄株DQ141322、AY321984和AY484413株同源性關(guān)系最近，處于同一分支中，而另外24株與Q151643中國株同源性關(guān)系最近且處于同一分支中。研究結(jié)果表明上海及周邊地區(qū)PCV22感染比較普遍，發(fā)病豬場的感染率遠高于健康豬場，且感染率比往年有升高， PCV22在豬場疫病的爆發(fā)和傳染中起著重要的協(xié)同作用;在PCV22的感染病例中， PCV22b亞型為感染的優(yōu)勢毒株;絕大多數(shù)PCV22b ORF2片段的同源性與已登錄的一株中國株同源性關(guān)系密切，在基因進化樹上處于同一分支，但是否可以推斷其為PCV22的另一個亞型有待進一步考證。